肿瘤抑制因子PTEN亚细胞定位与缺血-缺氧性脑损伤

第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源等位基因(PTEN)具有脂质和蛋白双重磷酸酶活性。脑组织缺血-缺氧后PTEN发生活化并向线粒体或胞核内转移,而这种在神经元内的不同亚细胞定位可能最终决定细胞命运。因此,阐明PTEN在脑缺血-缺氧后的亚细胞定位机制,将为各种急慢性神经退行性变疾病的靶向治疗和药物研发提供新思路。     

Ion Transport and Energy Metabolism in Brain

Abstract

The kinetics of extracellular K⁺ activity was compared to the availability of energy in the cortex of rats and gerbils exposed to anoxia, hypoxia, spreading depression, and ischemia.

A combined K⁺/DC surface electrode was used alone or together with a fiber optic light guide in various experiments. All experiments were done on slightly anesthetized animals that were practically awake. The results can be summarized in the following conclusions: (1) Under conditions such as hypoxia or ischemia, K⁺₀ showed a two-phase efflux kinetics, and a transition or critical point was reached where the response proceeds at a higher rate. This critical point was in the range of 10-16 mEq/1 potassium. (2) Availability of oxygen is necessary but not sufficient for a full rate of recovery from a long-term oxygen-deprivation insult. (3) There is an energy debt or energy-transduction bottleneck fonned during a prolonged O₂ insufficiency. This debt is reversed slowly during the recovery phase even when full restitution of O₂ supply and blood flow has occurred.     

RANKL/OPG在高原低氧条件下兔牙周炎发病机制中的作用

目的 研究模拟高原低氧条件下兔牙周炎的病理改变以及与破骨细胞相关的核因子κB受体活化子配体( receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)、骨保护素(osteoprotegenn,OPG)的相关性.方法 40只家兔完全随机分成4组:平原实验组、平原对照组、高原实验组、高原对照组,每组各10只.通过钢丝结扎切牙方法建立家兔牙周炎模型,动物于分组饲养8周后处死,制作牙周组织石蜡切片,HE染色观察牙周组织病理变化、破骨细胞的表达,荧光免疫组化检测牙周组织中RANKL、OPG的表达.免疫荧光组化采用激光扫描共聚焦显微镜对实验组与对照组RANKL、OPG进行半定量分析,并比较其差异.结果 高原实验组与平原实验组、高原对照组和平原对照组RANKL灰度值分别为(1.799±0.036)、(1.519±0.061)、(1.242 ±0.078)、(0.963±0.098),差异有统计学意义(P＜0.05),与高原对照组比较,高原实验组OPG表达降低无统计学意义.高原实验组RANKL与牙周指数呈正相关(P＜0.01).结论 高原低氧条件下可能通过改变破骨细胞的RANKL/OPG调节途径促进牙周炎的发生、发展.     

The stimulus-secretion coupling of glucose-induced insulin release

Summary Above a threshold of 3.0–4.2 mmol/l, D-glucose provoked a transient increase in ³²P fractional outflow rate from rat pancreatic islets prelabelled with ³²P-orthophosphate. Nutrients which stimulate insulin release in the absence of glucose, -ketoisocaproate and L-leucine, also provoked a phosphate flush. No flush occurred in islets exposed to non-insulinotropic nutrients (L-glutamine and L-lactate) or non-nutrient secretagogues (arginine, tolbutamide, theophylline). A late increase in ³²P fractional outflow rate was observed in Ca²⁺ deprived islets stimulated with BaCl₂ and theophylline. The occurrence of a phosphate flush did not appear to be attributable to changes in insulin release, cyclic AMP content, membrane polarisation, K⁺ conductance, or reduced pyridine nucleotide content. The ³²P response to glucose was slightly decreased in the absence of extracellular Ca²⁺ or HCO₃ ^-, markedly impaired in the absence of K⁺, and virtually abolished in the presence of menadione (10 mol/l). It is proposed that the occurrence of a phosphate flush is linked to the metabolism of nutrient secretagogues, possibly via an increase in O₂ uptake and the production rate of NAD(P)H and ATP.     

硫化氢对低氧性肺动脉高压大鼠细胞因子的调节作用

目的探讨硫化氢对低氧性肺动脉高压大鼠细胞因子的调节作用。方法将Wistar大鼠22只随机分为3组。对照组(8只),低氧组(7只),低氧+硫氢化钠(NaHS)组(7只),测定3组大鼠肺动脉平均压(mPAP),观测肺血管结构变化,并用免疫组织化学方法研究α-平滑肌肌动蛋白(-αSM-actin)、弹力蛋白、转化生长因子β(TGF-β)和结缔组织生长因子(CTGF)在肺动脉平滑肌细胞的表达含量。结果低氧组的mPAP明显高于对照组和低氧+NaHS组;低氧组肌型动脉、部分肌型动脉百分比明显高于对照组和低氧+NaHS组,非肌型动脉百分比明显低于对照组和低氧+NaHS组;低氧组肺中、小型肺动脉平滑肌细胞-αSM-actin、弹力蛋白和TGF-β表达含量分别明显高于对照组和低氧+NaHS组;对照组、低氧+NaHS组以及低氧组肺中、小型肺动脉平滑肌细胞CTGF表达含量依次增高,但3组之间无显著差异。结论硫化氢可能通过调节低氧性肺动脉高压大鼠肺小血管肌性动脉TGF-β的表达,进而抑制细胞外基质成分之一的弹力蛋白合成,参与低氧性肺动脉高压的形成。     

妊娠期绵羊不同程度高原缺氧模型的建立

目的 应用西北人工实验舱建立妊娠期绵羊不同程度高原缺氧模型,并评估其氧合状态及氧化损伤程度.方法 采用24只人工授精配种成功的妊娠期绵羊,随机均分为平原对照组(LAC)、轻度低氧暴露组(MHE)和重度低氧暴露组(SHE).用人工实验舱模拟西北地区高原低氧低压低温环境,通过调节温度、湿度、压力和空气氧含量等参数制备MHE与SHE动物模型,分别于建模前(0d)与建模后7、15、30、90、120d检测3组动物氧合状态、生命体征及行为模式,动态检测肝脏组织氧化损伤标志物的水平.结果 经不同条件人工实验舱造模30d(MHE组)及90d(SHE组)后,妊娠期绵羊动脉血气指标分别达到轻度和重度缺氧诊断标准.建模后90d,与LAC组比较,MHE组及SHE组妊娠期绵羊呼吸频率减低(P＜0.05),心率升高(P＜0.05),运动减少,且SHE组饮食较MHE组减少;建模后120d,MHE组及SHE组妊娠期绵羊蛋白质氧化损伤的生物标志物羰基(CO)和细胞氧化损伤的生物标志物丙二醛(MDA)水平均明显高于LAC组(P＜0.05),且SHE组明显高于MHE组(P＜0.05).结论 应用西北人工实验舱成功建立了妊娠期绵羊不同程度高原缺氧模型.高原低氧环境可引起妊娠期绵羊氧化应激损伤.     

肝孤核受体激动剂对间充质干细胞的抗缺氧复氧损伤作用及机制

目的探讨肝孤核受体(LXR)激动剂对脂肪间充质干细胞(AD-MSCs)缺氧损伤的保护作用及可能机制。方法酶消化法分离稳定表达萤火虫荧光素酶(Fluc)报告基因的小鼠AD-MSCs,流式细胞术检测CD90、CD44、CD34、CD45细胞表面标记物。3代AD-MSCs分为7组:对照组;缺氧6 h/复氧2 h组(缺氧复氧组);缺氧/复氧+DMSO组(DMSO组);缺氧复氧+不同浓度LXR激动剂T0901317干预组(1μmol/L组、5μmol/L组、10μmol/L组、15μmol/L组)。运用Fluc报告基因生物发光成像技术对AD-MSCs细胞增殖进行定量评价,免疫印迹法检测细胞NF-κB表达水平,ELISA法检测AD-MSCs的白细胞介素6(IL-6)、TNF-α分泌水平。结果流式细胞术结果显示.AD-MSCs呈CD44(+)、CD90(+)、CD34(-)、CD45(-)。光学成像结果显示,AD-MSCs细胞数与Fluc平均生物发光信号强度呈正相关(r~2=0.97)。与对照组比较,缺氧复氧组AD-MSCs分泌TNF-α、IL-6、NF-κB明显升高;与缺氧复氧组比较,10μmol/L组AD-MSCs分泌TNF-α、IL-6、NF-κB明显减少(P<0.05,P<0.01)。结论 LXR激动剂可以促进缺氧复氧损伤后AD-MSCs的存活,并能通过NF-κB信号途径抑制炎性因子IL-6、TNF-α的释放,可为干细胞移植治疗心肌缺血再灌注损伤提供新的细胞保护方法。     

腺病毒载体介导肝细胞生长因子基因对血管内皮细胞的作用

目的：研究腺病毒载体介导肝细胞生长因子（HGF）基因感染血管内皮细胞后在正常供氧、缺氧及缺氧后复氧的情况下细胞的凋亡情况。方法：将分离、培养的内皮细胞分为3组，分别给予M199（对照组）、HGF（HGF组）和HGF基因腺病毒载体（Ad-HGF组），分别在正常供氧、缺氧及缺氧后复氧3种情况下观察细胞的凋亡情况。结果：Ad-HGF组及HGF组细胞凋亡数均低于对照组（P〈0．01），Ad-HGF组与HGF组细胞凋亡数差异无显著性意义。结论：腺病毒载体介导HGF基因感染内皮细胞后能在缺氧情况下有效地阻止细胞凋亡。