缺氧状态下内皮源性一氧化氮合酶与大鼠肺血管结构重建的关系

目的　探讨内皮源性一氧化氮合酶 (eNOS)对缺氧大鼠肺血管结构重建的影响。方法　将大鼠随分为2组 :常氧组 (n =12 )、低氧组 (n =12 )。以光学显微镜观测 2组大鼠中型肺动脉及小型肺动脉的相对中膜厚度(RMT)。应用eNOS的抗体经免疫组织化学技术对 2组大鼠肺动脉内皮细胞进行定位及半定量分析。结果　低氧组大鼠中型肺动脉及小型肺动脉RMT均高于常氧组 (P <0 .0 1) ;2组大鼠各级肺动脉内皮细胞中均有eNOS的表达 ,常氧组较低氧组表达增强 (P <0 .0 1) ;中型肺动脉内皮细胞中eNOS的表达与相应中型肺动脉RMT之间呈负相关 (r为 - 0 .875 7,P <0 .0 1) ;小型肺动脉内皮细胞中eNOS的表达与相应小型肺动脉RMT之间呈负相关(r为 - 0 .80 4 1,P <0 .0 1)。结论　缺氧大鼠肺动脉中eNOS含量下降参与肺血管结构重建。     

Essential fatty acid treatment prevents nerve ischaemia and associated conduction anomalies in rats with experimental diabetes mellitus

Summary In rats with 6 weeks streptozotocin-diabetes there was a 53% reduction in sciatic nerve laser Doppler flux compared to controls (p<0.01). Treatment of a parallel group of diabetic rats with evening primrose oil, by dietary admixture throughout the protocol, prevented this ischaemia (Doppler flux was 91% of evening primrose oil-treated controls and was not significantly different). There were no differences in systemic arterial pressure. In another experiment evening primrose oil markedly antagonised the development of exaggerated resistance to anoxic conduction failure in sciatic nerves from diabetic rats. The resistance to anoxia of nerves from non-diabetic rats was also reduced by evening primrose oil. These observations suggest that the sciatic nerves of diabetic rats with short-term streptozotocin-diabetes are markedly ischaemic and that this ischaemia is involved in the development of increased resistance to anoxic/ischaemic conduction failure in diabetic nerve. The findings also promote evening primrose oil as a potential treatment to prevent nerve ischaemia.     

组织工程化成年心肌细胞的构建

背景：采用成年心肌细胞构建组织工程细胞已成为心脏疾病领域新的科研热点。 目的：探讨简单、快捷的成年大鼠心肌细胞分离方法,并初步探索组织工程化成年心肌细胞的构建方式。 方法：采用分段式酶消化方法消化成年大鼠心室肌心肌细胞。分别转染腺病毒和脂质体介导的红色荧光蛋白基因,倒置荧光显微镜、流式细胞仪检测组织工程细胞的构建效率。转染腺病毒介导的缺氧诱导因子1a,采用Western blot检测目标蛋白的表达。 结果与结论：采用分段式酶消化方法可获得大量心肌细胞。流式细胞分析表明所获得的成年心肌细胞的存活率为（87.03±0.70）%。与脂质体转染相比（转染效率为0）,腺病毒感染效率高,为（70.31±1.39）%,荧光显微镜下细胞发出红色荧光。在腺病毒转染第4天后,可有效表达目标蛋白缺氧诱导因子1a。以上结果表明分段式酶消化法是成熟心肌细胞的快速分离方式,并明确重组腺病毒载体是转染心肌细胞的最佳基因载体。     

1992年-2012年新生儿缺氧缺血性脑病回顾性调查及危险因素logistic多元回归分析

目的:通过回顾性分析各种围产期危险因素对新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)发生的可能影响,寻求预防HIE发生及改善其预后的方法.方法:对302例HIE患儿性别、胎龄、出生体重、临床表现、母亲孕期病史及分娩情况进行回顾性调查分析.同时随机抽取128例同期住院的新生儿肺炎、新生儿黄疸患儿作对照,应用logistic多元逐步回归分析的方法筛选HIE发病的危险因素.结果:两组患儿中10个围产因素存在统计学差异.应用logistic多元逐步回归分析结果显示:分娩方式、羊水污染、胎膜早破、脐带异常、Apgar评分异常等为主要危险因素.结论:增强孕妇医学保健意识、加强围产期保健、提高基层医疗机构产科质量、根据不同产妇和胎儿的具体情况,采取适当的个体化干预措施,对预防和减少新生儿HIE发生,降低围产儿死亡率和致残率具有重要意义.     

间断性常压低氧后适应对慢性脑血流低灌注大鼠脑白质损伤和认知功能障碍的影响

目的探讨间断性常压低氧后适应(intermittent normobaric hypoxia postconditionning,INHP)对慢性脑血流低灌注大鼠脑白质损伤和认知功能障碍的影响。方法选择健康成年雄性SD大鼠32只,随机分为假手术组、模型组、INHP1组和INHP2组,每组8只。Morris水迷宫用于评价大鼠的认知功能,Klüver-Barrera染色用于评价脑白质损伤的严重程度,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体、Iba-1抗体分别用于免疫标记脑白质中星形胶质细胞和小胶质细胞。结果与假手术组比较,模型组大鼠出现认知功能障碍、脑白质中髓鞘脱失、空泡形成,并有星形胶质细胞、小胶质细胞活化;与模型组比较,INHP1组大鼠参考记忆力较差、脑白质损伤较重,脑白质中GFAP阳性星形胶质细胞、Iba-1阳性小胶质细胞较多(P<0.05),而INHP2组大鼠参考记忆力较好、脑白质损伤较轻,脑白质中GFAP阳性星形胶质细胞、Iba-1阳性小胶质细胞较少(P<0.05)。结论延迟INHP可改善慢性脑血流低灌注导致的认知功能障碍和脑白质损伤,而早期INHP是有害的。     

间断性脐带闭塞对胎羊静脉导管搏动指数、Tei指数、脐血神经元特异性烯醇化酶、S100B蛋白的影响及其相关性分析

目的 探讨胎羊间断性脐带闭塞后静脉导管搏动指数（ductus venosus pulsatility index，DVPI）、Tel指数评估胎儿缺氧缺血性脑损伤的应用价值。方法 7只晚孕山羊作为实验组，于妊娠116～130d对胎羊行宫内外科手术，用套囊充气闭合器完全夹闭脐带，每次夹闭90S，间隔30min，重复5次。于实验前5min、每次夹闭后3min应用彩色多普勒血流显像技术检测DVPI、Tei指数，抽取胎羊脐动脉血做血气分析，应用电化学发光法测定脐血神经元特异性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）、S100B蛋白含量，同时分析这些指标的相关性。另选5只晚孕山羊作为对照组，只手术不夹闭脐带。结果 实验组胎羊脐动脉血PaO2和pH随夹闭时间下降，PaCO2、DVPI、右心室和左心室Tei指数、脐血NSE和S100B均随夹闭时间而升高（P均〈0．05）。实验组夹闭后PaO2低于对照组，夹闭后36min开始pH值低于对照组，PaCO2高于对照组；从夹闭后36min开始实验组NSE和S100B蛋白较对照组升高（P均〈0．05）。实验组DVPI、右心室Tei指数、左心室Tei指数、脐血NSE、S100B含量与血pH值呈负相关（r分别为-0．358、-0．538，-0．681、-0．388、-0．539，P均〈0．05），与血PaO2呈负相关（r分别为-0．435、-0．684、-0．725、-0．602，-0．447，P均〈0．01），与血PaCO2呈正相关（r分别为0．699、0．682、0．780、0．477、0．527，P均〈0．01）。实验组DVPI、右心室和左心室Tei指数与血清NSE含量呈正相关（r分别为0．394、0．653、0．687，P均〈0．05），与血清S100B含量呈正相关（r分别为0．359、0．606、0．640，P均〈0．05）。结论 Tei指数与血气指标及血清NSE、S100B的相关性较好，可能成为预测胎儿缺氧缺血性脑损伤简便而有效的指标。     

缺氧性脑病3例临床病理报告

三例不同病因所致缺氧性脑病的尸检材料表明脑部损害共同性的神经病理改变是急性缺血性神经元改变,普金野细胞尼氏体溶解或消失及胶质反应。选择性的改变:苏满氏段锥体细胞消失仅见死于癫痫连续状态的病人。每例皮质中均可找到弥散性急性神经元肿胀变化,为可逆性的,如及时认识及适当治疗,有益于防止神经细胞死亡。     

二硫卡钠对原代培养皮层神经元缺氧损伤的保护作用

取体外原代培养14 d左右的大鼠皮层神经元，换上无血清除氧培养基并置通95％ N₂+5% CO₂的缺氧罐中造成神经元缺氧. 以研究缺氧对皮层神经元的损伤及二硫卡钠(DTC)的保护作用. 用存活神经元数目及神经元线粒体活性来评价神经元活力. 乳酸脱氢酶(LDH)活性及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量分别用紫外分光光度法和硫代巴比酸法测定，作为评价损伤的指标. 原代培养皮层神经元分别缺氧4, 5和6 h后，活细胞数显著减少，线粒体活性明显降低；LDH释放及MDA产生显著增加；而缺氧2 h 后，仅活细胞数无明显变化. 超氧阴离子清除剂超氧化物歧化酶(SOD)可逆转上述变化，抑制缺氧对神经元的损伤， 表明培养神经元缺氧损伤可能与自由基产生有关. 类似SOD作用，DTC可显著对抗缺氧对神经元的损伤，剂量依赖地抑制缺氧引起的LDH释放和MDA形成的增加. 结果表明：DTC对神经元缺氧损伤具保护作用，其作用可能与清除自由基有关.     

缺氧对平滑肌细胞生长特性,细胞内游离钙及环磷酸腺苷浓度的影响

文中报道了缺氧条件下培养的肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）的形态特点、生长曲线和蛋白质含量的变化，测定了缺氧时ＰＡＳＭ游离钙浓度（［Ｃａ＾２＋］）和环磷酸腺苷（ｃＡＭＰ）含量的变化。主要结果与结论如下：（１）培养的ＰＡＳＭ能在２％Ｏ２缺氧条件下生长，其光镜形态、生长情况与细胞蛋白质含量与２１％Ｏ２常氧条件下相似；（２）向ＰＡＳＭ的无钙细胞悬液中发别通入０％Ｏ２、３％Ｏ２和５％Ｏ２１ｍｉｎ，细胞内［Ｃａ     

三种血管舒张剂对慢性缺氧性肺动脉高压大鼠肺动脉收缩反应的比较

观察了米力农（Ｍｉｌ），ｌｅｍａｋａｌｉｍ（Ｌｅｍ）和维拉帕米（Ｖｅｒ）三种血管舒张剂对前列腺素Ｆ２α（ＰＧＦ２α）所致缺氧２和４ｗｋ大鼠肺动脉和主动脉环收缩反应的影响．Ｌｅｍ（０．０１～１．０μｍｏｌ·Ｌ－１），Ｍｉｌ和Ｖｅｒ（均为０．１～１０．０μｍｏｌ·Ｌ－１）对主动脉和肺动脉都有明显的抑制作用，使ＰＧＦ２α引起的血管收缩反应曲线压低，ＥＣ５０显著增高（Ｐ＜０．００１），呈剂量相关关系．其抑制强度为Ｌｅｍ＞Ｍｉｌ＞Ｖｅｒ，缺氧前后顺序不变．无论缺氧前后，Ｌｅｍ和Ｖｅｒ对主动脉和肺动脉的抑制强度都较接近，Ｍｉｌ则在缺氧条件下，对肺动脉的抑制作用选择性地增强