芸香科花椒属植物两面针抗肿瘤作用研究进展

目的综述芸香科花椒属两面针抗肿瘤作用研究进展。方法检索近30年来有关两面针抗肿瘤的作用的文献并进行分析。结果芸香科花椒属植物两面针含有丰富的生物碱、黄酮类、酰胺类、木脂素类等化合物,具有杀菌、抗肿瘤、抗癌、细胞毒、抗血小板凝集等功效。最新的研究表明,其活性成分具有抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡及逆转肿瘤多药耐药的作用。结论芸香科花椒属植物两面针含有的生物碱类具有抗肿瘤作用。     

Gastroprotective activity of Zanthoxylum rhoifolium Lam. in animal models

Ethnopharmacological relevance

The stem barks of Zanthoxylum rhoifolium Lam. (Rutaceae), locally known as “mamica de cadela”, are popularly used in dyspepsies, stomachic, tonic, antitumoral, antipyretic and are used in treating flatulence and colic. The objective of this study was to evaluate the gastroprotective effect of the ethanolic extract of Zanthoxylum rhoifolium (EEZR) stem barks in acute gastric lesion models, investigating their possible mechanisms.

Materials and methods

Mice were used for the evaluation of the acute toxicity, and mice and rats to study the gastroprotective activity. The gastroprotective action of EEZR was analyzed in the absolute ethanol, HCl/ethanol and indomethacin-induced gastric lesion models in mice, hypothermic-restraint stress, and ischemia/reperfusion in rats. In the investigation of the gastroprotective mechanisms of EEZR, the participation of the NO-synthase pathway, ATP-sensitive potassium channels (K_ATP), the levels of the non-protein sulfhydril groups (NP-SH) and the catalase activity using the ethanol-induced gastric mucosa lesion model and the quantification of the gastric mucus and the antisecretory activity through pylorus ligature model in rats were analyzed.

Results

The animals did not present any signs of acute toxicity for the EEZR (up to the 4 g/kg dose, po), and it was not possible to calculate the DL₅₀. EEZR (125-500 mg/kg) exhibited a significant gastroprotective effect in absolute ethanol, HCl/ethanol, hypothermic-restraint stress, and ischemia/reperfusion-induced gastric lesion models. EEZR (250 and 500 mg/kg) exhibited still a gastroprotective activity in the indomethacin-induced ulcer model. Gastroprotection of EEZR was significantly decreased in pre-treated mice with l-NAME or glibenclamide, the respective nitric oxide synthase and K_ATP channels inhibitors. Our studies revealed that EEZR (500 mg/kg) prevented the decrease of the non-protein sulfhydril groups (NP-SH) and increased the catalase levels in ethanol-treated animals. Furthermore, the extract (500 mg/kg) significantly increased the mucus production, however, the gastric secretion parameters (volume, [H⁺], pH) did not show any alteration.

Conclusions

Our results indicate that the ethanolic extract of Zanthoxylum rhoifolium exhibits a significant gastroprotection, because it inhibits the formation of gastric lesions using different models. The release of the nitric oxide, the opening of the K_ATP channels, the participation of the non-protein sulfhydril groups (NP-SH), catalase and the increase of mucous secretion seem to be involved in the gastroprotection activity of the EEZR. Nevertheless, this activity does not seem to be related to antisecretory mechanisms.     

中药两面针不同入药部位金属元素的含量测定

目的:测定中药两面针植物根、茎和叶中20种金属元素的含量。方法:通过硝酸-高氯酸消解体系,有效地彻底消解样品中的有机物;而对于易挥发元素Hg、Se,则通过控制样品的消解量、消解温度和消解时间,从而达到最佳的消解效果,应用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)和原子荧光光谱法(ASF)进行元素分析。结果:中药两面针不同入药部位金属元素含量有别,Na在根中的含量比茎、叶高,而K、Ca、Mn和Mg在叶中的含量较根、茎高,20种元素回收率为93.9%～102.2%,RSDs均小于2.0%。结论:此方法简单、快速、准确,结果可为研究扩大中药两面针药用植物资源及综合开发利用提供科学依据。     

ICP-AES法测定12个产地两面针药材中重金属元素的含量

目的:对广西12个不同产地两面针药材中6种重金属元素进行含量测定。方法:通过HNO3-HClO4硝解体系,彻底有效地硝解样品中的有机物,应用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)测定As、Cr、Hg、Ni、Cd、Pb重金属含量。结果:建立了高效、简单、准确的实验方法,建立的各元素回归方程线性关系良好,相关系数在0.9993～1之间,加样回收率为90.82%～101.21%,RSD均小于3.0%。结论:各产地中药两面针的重金属元素含量有差异,As、Cr和Hg未检出;除南宁市产地外,11个产地Pb含量均符合药用和出口标准,但Cd含量均超过药用和出口标准。     

酶解法辅助浸渍提取两面针中总生物碱的工艺优选

目的:优选酶解法辅助浸渍提取两面针中总生物碱的工艺。方法:以总生物碱提取率为指标,采用单因素试验考察酶的种类、加酶量、pH、酶解温度及时间对酶解工艺的影响;以总生物碱提取率为指标,采用正交试验考察提取次数、提取时间及乙醇体积分数对两面针总生物碱浸渍提取工艺的影响。结果:酶解工艺条件为纤维素酶、果胶酶与底物质量比均为1∶250,4倍量pH 5缓冲液,室温(30℃)下酶解30 min;最佳浸渍提取工艺为以12,4,3倍量60%乙醇溶液(盐酸质量浓度5 g·L-1)室温下浸渍3次,每次2 h,总生物碱提取率85.22%。结论:该优选的工艺简单高效、节能环保,为工业生产提供实验依据。     

花椒油对HaCaT细胞膜流动性及膜电位的影响及其机制研究

目的：本文选择HaCaT角质形成细胞测定花椒挥发油对其细胞膜流动性和膜电位的影响及其机制,研究花椒挥发油对皮肤活性表皮的影响,探讨其促进药物透皮吸收的作用机制。方法：采用CCK-8试验测定花椒挥发油的细胞毒性,利用荧光漂白恢复技术（FRAP）考察不同浓度花椒挥发油对细胞膜流动性的影响,采用流式细胞仪测定不同浓度花椒挥发油对细胞膜电位的改变,同时考察了花椒挥发油对HaCaT细胞内Ca²⁺浓度的影响,采用超微量Ca²⁺-ATP酶试剂盒测定花椒挥发油对HaCaT细胞内Ca²⁺-ATP酶活性的影响。结果：相对于常用化学促透剂氮酮,花椒挥发油具有较低细胞毒性,花椒挥发油可增加HaCaT细胞膜流动性、降低细胞膜电位,同时可降低Ca²⁺-ATP酶活性、增加HaCaT细胞内Ca²⁺浓度而影响细胞Ca²⁺平衡。结论：花椒挥发油可能通过改变细胞内Ca²⁺平衡而影响细胞膜流动性及膜电位,增加活性表皮流动性以降低皮肤表皮屏障作用,从而利于药物的透皮吸收。     

花椒挥发油乳霜剂治疗蠕形螨病疗效观察

目的　观察花椒挥发油乳霜剂治疗蠕形螨病的疗效和安全性。　方法　采用单盲、平行对照试验方法。分别选择螨性痤疮、酒渣鼻、脱发患者各 10 0、6 0、45例 ,随机分成试验与对照两组 ,分别涂抹花椒挥发油乳霜剂和新肤螨灵霜 ,早晚各 1次 ,连续 6周。　结果　试验组治疗痤疮、酒渣鼻、脱发的有效率分别为 10 0 % ( 5 0 / 5 0 )、10 0 % ( 30 / 30 )和 78.3%( 18/ 2 3) ,对照组分别为 96 % ( 48/ 5 0 )、10 0 % ( 30 / 30 )和 72 .7% ( 16 / 2 2 ) ,两组间差异无显著性 ( P>0 .0 5 ) ;两组的治愈率分别是 5 4% ( 2 7/ 5 0 )、40 % ( 12 / 30 )、8.7% ( 2 / 2 3)和 36 % ( 18/ 5 0 )、40 % ( 12 / 30 )、0 ( 0 / 2 2 ) ;两组间的差异有显著性 ( P<0 .0 1)。试验和对照组的副反应发生率分别是 0和 2 .86 %。　结论　花椒挥发油乳霜剂治疗蠕形螨病无毒高效。     

三种调味品对小鼠骨髓细胞增殖和染色体稳定性的影响

目的探讨八角、桂皮、花椒对小鼠骨髓细胞增殖和染色体稳定性的影响。方法采用不同浓度(500,1000,2000,4000 mg/kg)的调味品提取液,一次性灌胃。取小鼠骨髓细胞制备染色体标本,检测骨髓细胞增殖指数、染色体结构畸变率等指标。结果八角、桂皮各剂量组的细胞增殖指数略有增高,但与阴性对照组比较,均无显著性差异;花椒高剂量(4000mg/kg)组的细胞增殖指数明显降低(P<0.01);花椒各剂量组和八角、桂皮的两个较低剂量组(50、1000mg/kg)的染色体畸变率和细胞畸变率与对照组比较,差异无显著性(P>0.05),而高剂量(2000、4000mg/kg)的八角、桂皮的染色体畸变率和细胞畸变率与对照组比较有显著性差异(P<0. 05,P<0.01)。结论花椒和低剂量的八角、桂皮对小鼠骨髓细胞染色体没有损伤作用,高剂量花椒对小鼠骨髓细胞的增殖有一定抑制作用,高剂量八角、桂皮对小鼠骨髓细胞染色体的稳定性有不同程度的影响。     

D-101大孔树脂分离纯化两面针总生物碱

目的研究大孔树脂分离纯化两面针总生物碱的工艺。方法用UV测定总生物碱含量来优化工艺参数,用TLC分析分离效果。结果以体积分数60%乙醇-5g·L-1盐酸提取液上D-101大孔树脂柱,流出液回收乙醇至45%,再上D-101大孔树脂柱,其流出液再回收乙醇至无醇味,再上D-101大孔树脂柱,分别用体积分数95%,80%和50%乙醇洗脱。产品总生物碱质量分数为18.07%～27.67%。结论该法既富集了总生物碱,又初步分离了不同极性成分。     

两面针根抗菌活性成分研究

目的 研究两面针Zanthoxylum nitidum根提取物中具有抗菌活性的化学成分。方法 以药理活性测试为导向,综合利用硅胶柱、氧化铝柱、制备TLC和制备HPLC等色谱技术分离两面针提取物活性成分,采用NMR和MS谱学数据及其理化性质鉴定化合物结构。结果 从两面针根提取物中分离得到11个化合物,分别鉴定为茵芋碱（1）、氧化白屈菜红碱（2）、8-甲氧基二氢白屈菜红碱（3）、β-谷甾醇（4）、L-芝麻脂素（5）、8-甲氧基-9-羟基白屈菜红碱（6）、4-羟基-N-甲基脯氨酸（7）、鹅掌楸碱目的 研究乌拉尔甘草Glycyrrhiza uralensis根及根茎的化学成分。方法 应用溶剂法和色谱法进行分离纯化,利用波谱技术鉴定化合物结构;并测试化合物的细胞毒活性。结果 从乌拉尔甘草50%乙醇提取物中分离得到14个皂苷类化合物,分别鉴定为uralsaponin C（1）、uralsaponin D（2）、licorice-saponin A3（3）、uralsaponin F（4）、22β-acetoxyl-glycyrrizin（5）、24-hydroxyl-licorice-saponin E2（6）、licorice-saponin E2（7）、licorice-saponin G2（8）、22β-acetoxyl-glyrrhaldehyde（9）、3β-O-[β-D-glucuronopyranosyl-(1→2)-β-D-glucuronopyranosyl]-glycyrretol（10）、araboglycyrrhizin（11）、licorice-saponin J2（12）、甘草酸（13）、单葡糖醛酸基甘草次酸（14）。化合物1～14对3种人源肿瘤细胞MGC-803、SW620、SMMC-7721的半数抑制率（IC₅₀）均大于100 μmol/L,化合物2、6～8、13的水解后苷元对3种人源肿瘤细胞的抑制率为18.3～41.6 μmol/L。结论 化合物14是一个新的天然产物,化合物11为首次从该植物中分离得到;化合物1～14对3种人源肿瘤细胞MGC-803、SW620、SMMC-7721均无显著的细胞毒活性,化合物2、6～8、13水解后苷元细胞毒活性增强。