补中益气颗粒联合曲美布汀治疗脾胃虚弱证腹泻型肠易激综合征的疗效观察

目的观察补中益气颗粒联合曲美布汀治疗脾胃虚弱证腹泻型肠易激综合征的临床疗效。方法选取2015年6月—2016年5月在天津中医药大学第一附属医院脾胃科门诊就诊的脾胃虚弱证腹泻型肠易激综合征患者60例,每组各30例。对照组患者口服马来酸曲美布汀片,0.2 g/次,3次/d。治疗组在对照组的基础上口服补中益气颗粒,3 g/次,3次/d。两组患者均连续治疗4周。观察两组患者临床疗效,比较治疗前后两组症状积分、排便情况和焦虑抑郁症状评分的变化。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为83.33%和96.67%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者腹泻、腹痛、腹胀积分均较治疗前明显下降(P0.01);且治疗组低于对照组(P0.01)。治疗后,两组患者日排便次数及10 d内排便急迫天数均较治疗前降低(P0.05);且治疗后治疗组优于对照组(P0.05)。治疗后,两组SAS评分、SDS评分均较治疗前显著降低(P0.05);且治疗后治疗组SAS和SDS评分优于对照组(P0.05)。结论补中益气颗粒联合曲美布汀对脾胃虚弱证腹泻型肠易激综合征疗效确切,具有一定的临床推广应用价值。     

左金方对幽门螺旋杆菌感染的人GES-1细胞增殖与凋亡的作用研究

目的研究左金方对幽门螺旋杆菌引起人正常胃黏膜上皮(GES-1)细胞增殖与凋亡的影响。方法幽门螺旋杆菌以不同的感染复数(1∶1、50∶1、100∶l、200∶1、300∶1)感染GES-1细胞,于12、24、48 h后,CCK-8检测细胞的增殖活性;以不同质量浓度(0.5、1.0、2.0、4.0μg/m L)左金方作用幽门螺旋杆菌感染的GES-1细胞12、24、48 h后,收集细胞,CCK-8检测细胞的增殖活性,流式细胞仪和Western blotting检测细胞的凋亡率;Hochest染色检测凋亡细胞的形态学改变。结果幽门螺旋杆菌感染GES-1细胞后,感染复数越大,侵染时间越长,抑制细胞生长和促进细胞凋亡的作用越强,幽门螺旋杆菌以100∶1的感染复数作用人GES-1细胞12、24、48 h后,细胞存活率分别降低到(80.57±1.21)%、(70.04±3.21)%、(67.74±2.91)%,细胞的凋亡率分别增加到(23.74±1.71)%、(53.60±1.87)%、(70.67±2.87)%;与1.0μg/m L左金方共培养24 h后,细胞存活率上升到(97.67±1.04)%,细胞凋亡率降低到(31.04±1.02)%,与相应模型组对比,差异显著(P0.01);Westernblotting结果表明,左金方各处理组细胞Caspase-3蛋白水平表达均明显降低;Hochest荧光染色,从形态学的角度进一步验证了这一结果。结论幽门螺旋杆菌感染人GES-1细胞后,可以抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,左金方可以降低幽门螺旋杆菌引起的细胞损伤,保护GES-1细胞。     

基于网络药理学的疏风解毒胶囊抗炎和免疫调节作用机制研究

目的探索疏风解毒胶囊抗炎和免疫调节的网络调控机制。方法选取疏风解毒胶囊中的28个化合物为研究对象,依据反向药效团匹配方法预测化合物的作用靶点,借助MAS 3.0生物分子功能软件及京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库对获得靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析、信号通路分析,利用Cytoscape软件构建网络药理图。结果 28个化合物可通过127个靶点作用于112条通路,其中41个蛋白靶点和22条通路与抗炎和免疫调节相关,得到疏风解毒胶囊化合物-靶点-通路-病理过程网络图。结论疏风解毒胶囊通过作用于HRAS、MAP2K1、AKT1、MME和PTPN1等关键蛋白,干预了多个与抗炎和免疫调节相关的生物过程,初步揭示了其作用机制。     

疏风解毒胶囊二次开发的系统研究

中药大品种二次开发研究是中药创新研究的重要内容,是继承和发展中医药理论,突破制约中医药理论和中药产业发展瓶颈的重要路径。以疏风解毒胶囊为研究对象,进行了系统的二次开发研究,通过药材、成品以及口服入血成分的辨识和表征,阐释了疏风解毒胶囊的化学物质组,进一步通过UPLC-Q/TOF-MS整合核转录因子-κB(NF-κB)双荧光素酶报告基因系统、G-蛋白偶联受体结合实验以及网络药理学分析和谱-效筛选方法,筛选和明确了主要药效物质基础;基于传统功效,以整体动物模型、基因组学等方法,从抗炎免疫、解热等方面阐释其作用机制,并阐明主要成分的药动学及组织分布规律,阐释了疏风解毒胶囊的作用机制;通过拆方研究并与同类中药以及化学药比较,阐释了该药的组方特点和配伍规律,提炼和发现了其作用特点、比较优势和临床核心价值;通过多批样品、多指标成分的含量测定以及指纹图谱共有模式的建立等方面进行系统研究,建立疏风解毒胶囊的药材与成品的质量控制体系,对原有的质量标准进行了全面提升,保证了产品的质量均一、稳定、可控。为该品种的临床推广应用和指导临床实践提供了重要的理论和实验依据,并为其他中药大品种的二次开发研究提供了可参考的思路与模式。     

注射用益气复脉(冻干)的质量标志物研究

注射用益气复脉(冻干)是由红参、麦冬和五味子3味药材精制而成,临床上主要用于治疗冠心病劳累型心绞痛气阴两虚证及冠心病所致慢性左心功能不全II、III级气阴两虚证。根据质量标志物概念,从物质基础、药效、网络药理、药动学及药性等方面对注射用益气复脉(冻干)质量标志物进行预测分析,初步确定人参皂苷Rb1、Rg1、Rf、Rh1、Rc、Rb2、Ro、Rg3及麦冬皂苷C、麦冬苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃木糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷、果糖、五味子醇甲13个成分为质量标志物,并以此为核心建立全程质量控制体系。基于质量标志物对注射用益气复脉(冻干)进行质控方法研究,可以为中药注射剂质量评价提供新的研究思路。     

基于正交试验设计与BP神经网络优化益气活血方水提工艺研究

目的优化筛选益气活血方的水提工艺参数。方法在单因素实验基础上,采用正交试验设计,以加水量、提取时间、浸泡时间为考察因素,丹酚酸B和羟基红花黄色素A的转移率及浸膏得率为评价指标,采用G1-熵权法赋权得到综合评分。通过正交试验设计进行分析得到最佳水提工艺,再通过BP神经网络建模进行网络模型优化和目标寻优。验证试验对比2种分析方法,寻找益气活血方的最佳水提工艺参数。结果基于2种分析方法对比发现,正交试验分析得到最佳水提工艺的综合评分略高于BP神经网络建模结果,故最终确定该益气活血方最佳水提工艺参数为水提3次、浸泡0.5h、加水量20倍、提取时间3.5 h。结论优选出的益气活血方水提最佳工艺稳定可行,为复方中药的新药开发和现代化研究提供了新的思路和参考。     

HPLC法同时测定乙肝益气解郁颗粒中的11种成分

目的建立HPLC法同时测定乙肝益气解郁颗粒中柴胡皂苷a、柚皮苷、芍药苷、毛蕊异黄酮苷、丹参酮IIA、桂皮醛、五味子醇甲、紫丁香苷、盐酸小檗碱、大黄酚和橙皮苷的含量,并采用主成分分析(PCA)法对其质量进行综合评价。方法采用HPLC法,色谱柱为Caprisil C18-AQ(250 mm×4.6 mm,5.0μm);流动相为0.1%磷酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,体积流量0.8mL/min;柱温45℃。最后将定量结果与PCA法相结合对不同批次药物进行科学的质量评价分析。结果乙肝益气解郁颗粒中柴胡皂苷a、柚皮苷、芍药苷、毛蕊异黄酮苷、丹参酮IIA、桂皮醛、五味子醇甲、紫丁香苷、盐酸小檗碱、大黄酚和橙皮苷11种成分分别在1.6～80.0、14～700、10～500、1.6～80.0、1.6～80.0、2.4～120.0、1.2～60.0、1.2～60.0、8.0～400.0、2.0～100.0、2.0～100.0μg/m L线性关系良好;平均加样回收率分别为98.3%、99.2%、98.8%、99.3%、101.9%、97.5%、99.8%、101.7%、101.1%、102.5%、100.9%,RSD均2.0%;16批样品中11种有效成分的质量分数分别为0.233～0.322、3.007～3.142、2.201～2.273、0.320～0.355、0.317～0.399、0.451～0.523、0.265～0.297、0.209～0.226、1.848～1.873、0.380～0.425、0.615～0.647mg/g。结论实验建立的方法简便准确、重复性好,可用于乙肝益气解郁颗粒的质量控制,为乙肝益气解郁颗粒后续质量提高提供参考。     

益气活血通络方通过抑制P2X7介导的脊髓小胶质细胞活化改善糖尿病大鼠神经病理性疼痛

目的 探讨益气活血通络方对糖尿病神经病理性疼痛（diabetic neuropathic pain,DNP）的影响及其作用机制。方法 高脂喂养大鼠4周后,35 mg/kg链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）腹腔注射复制2型糖尿病大鼠模型,通过观测大鼠机械痛阈和热缩足反应时间作为判定DNP模型复制成功的标准。将DNP大鼠随机分为模型组,益气活血通络方高、中、低剂量组和阳性对照组（甲钴胺）,另设空白对照组。Western blot法和免疫荧光双标检测脊髓中补体受体- 3的单克隆抗体（monoclonal antibody of complement receptor type 3,OX42）和P2X7（purinergic 2X7）的表达水平;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子- α（tumor necrosis factor- α,TNF- α）、白细胞介素- 1β（interleukin- 1β,IL- 1β）和趋化因子配体3（CC- chemokine ligand 3,CCL3）水平。结果 益气活血通络方干预后,DNP大鼠的机械痛阈和热缩足反应时间均得到显著的改善;大鼠血清TNF- α、IL- 1β和CCL3水平显著降低（P<0.05）;脊髓组织中OX42和P2X7表达水平均显著降低（P<0.05）。结论 益气活血通络方对DNP大鼠具有显著的治疗作用,其作用机制可能是通过抑制脊髓小胶质细胞活性,调节P2X7的表达,从而减轻神经炎症反应。     

解毒消癥饮治疗胃癌机制的计算机筛选研究

目的 采用计算机虚拟筛选技术探讨解毒消癥饮治疗胃癌的作用机制。方法 先采用分子描述符计算和主成分分析法研究解毒消癥饮中148个化合物与32个抗肿瘤药物的化学空间信息分布,探讨其类药性质;再通过分子对接方法研究解毒消癥饮和肿瘤相关受体靶标如人表皮生长因子受体家族（epidermal growth factor receptor,EGFR;human epidermal growth factor receptor-2,HER-2）和环氧化酶-2（cyclooxygenase-2, COX-2）的相互作用情况,以探讨其治疗胃癌的分子机制。结果 解毒消癥饮所含分子与抗肿瘤药物有类药性,且更具多样性;解毒消癥饮中91个化合物与EGFR、HER-2和COX-2有着显著的活性抑制作用。结论 解毒消癥饮治疗胃癌的作用机制可能涉及到抑制肿瘤细胞增殖、侵袭转移及促细胞凋亡等方面,与胃癌发病机制相符合。     

通腑解毒汤联合血液滤过对重症急性胰腺炎患者炎症介质及疗效的影响

目的  探讨通腑解毒汤联合连续性静-静脉血液滤过（CVVH）对急性重症胰腺炎（SAP）患者肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）的影响及临床疗效。方法  选择发病72 h的SAP患者40例,随机分为对照组和治疗组,每组20例。对照组予以西医常规治疗,治疗组在对照组的基础上加用中药通腑解毒汤联合CVVH治疗。比较两组治疗前及治疗72 h后IL-6和TNF-α的浓度;观察两组治疗前后生命体征、血气、生化指标、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ（APACHE Ⅱ）评分、Ranson评分等指标,判断患者整体病情。结果  治疗72 h后,治疗组IL-6、TNF-α浓度较对照组降低（P <0.01）,治疗组较对照组患者发热、呼吸窘迫等症状有不同程度的缓解,血清淀粉酶（AMY）、丙氨酸转氨酶（ALT）、总胆红素（TBIL）、血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）下降（P <0.05）,平均动血压（MAP）逐渐上升,氧分压（PaO2）和氧合指数提高,肠麻痹时间、多器官功能障碍综合征发生率下降,平均住院日缩短（P <0.05）。治疗7 d后,治疗组较对照组APACHE Ⅱ评分、Ranson评分降低（P <0.01）,住院费用比较差异无统计学意义（P >0.05）。结论  通腑解毒汤联合CVVH治疗SAP能清除部分促炎因子,减轻炎症反应,提高临床疗效,可作为SAP重要的辅助治疗措施之一。