抑癌基因WWOX在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的 探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中WWOX mRNA和蛋白的表达及其意义.方法 应用RT-PCR和免疫组化SP法检测50例ESCC组织、19例癌旁不典型增生组织及50例正常食管黏膜组织中WWOXmRNA和蛋白的表达.结果 WWOX在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中mRNA的相对表达量分别为0.81±0.08、0.84±0.05和0.90±0.05,组间比较差异有统计学意义(F=45.736,P<0.05);不同分化程度、TNM分期、浸润深度及有无淋巴结转移的ESCC组织之间WWOX mRNA相对表达量差异均有统计学意义(P均<0.05).ESCC组织及癌旁不典型增生组织中WWOX蛋白表达均低于正常黏膜组织,蛋白阳性表达率分别为42.0%(21/50)、64.8%(13/19)和84.0%(42/50),组间比较差异有统计学意义(x2=20.002,P<0.01);ESCC组织中WWOX蛋白表达与癌组织的分化程度、TNM分期、浸润深度及有无淋巴结转移密切相关(P<0.05).结论 ESCC组织中WWOX mRNA和蛋白表达均降低,其低表达可能与ESCC发生发展有关.检测WWOX mRNA及蛋白的表达可望成为食管鳞癌早期诊断和预后的分子指标之一. Abstract： Objective To explore the expression of WWOX mRNA and protein inesophageal squamous cell carcinoma (ESCC) tisuss. Methods The expression of WWOX was detected by RTPCR and SP immunohistochemical methods in 50 cases of ESCC tissue, 19 cases of mucosa adjacent to cancer, and 50 cases of normal esophageal mucosa. Results The relative content of WWOX mRNA depressed by turns in cancer tissue, mucosa adjacent to cancer and normal mucosa tissue which were 0.81 ± 0.08,0.84 ± 0.05,0.90 ± 0.05, respectively. And there was significant difference in group comparison (F = 45. 736, P < 0.05). The expression of WWOX mRNA was closely correlated with the tumor grade, TNM grade, infiltrative depth and lymphatic metastasis in ESCC tissue (P < 0.05). The positive rate of WWOX protein expression in cancer tissue and mucosa adjacent to cancer were lower than that of normal mucosa tissue which were 42.0% (21/50), 64.8 % (13/19), 84.0% (42/50) respectively. And there was a significant difference in group comparison(P < 0.05). The expression of WWOX protein was closely correlated with the tumor grade, TNM grade,infiltrative depth and lymphatic metastasis in ESCC tiissue (P <0.05). Conclusions The expression of WWOX mRNA and protein decreased in ESCC tissue, which suggest the WWOX gene may be related to oncogenesis of ESCC tissue. Combined detection of the expression of WWOX mRNA and protein may be used in early diagnosis and prognosis judgement of ESCC tissue.     

WWOX抑癌基因和Nrf2转录因子在胆囊癌组织中的表达及相关性研究

[目的]研究WWOX抑癌基因和Nrf2转录因子在原发性胆囊癌(PGC)组织中的表达及其与临床病理的关系,以及WWOX和Nrf2表达的相关性.[方法]收集胆囊癌标本54例、胆囊腺瘤标本20例、慢性胆囊炎标本20例.应用免疫组织化学方法检测WWOX蛋白和Nrf2蛋白的表达情况,同时收集胆囊癌患者的临床病理资料,并将结果进行分析.[结果](1)WWOX蛋白在胆囊癌、胆囊腺瘤及慢性胆囊炎组织中阳性表达率分别为48.1％ (26/54)、75.0％ (15/20)和85.0％(17/20),差异有统计学意义(P＜0.01).WWOX蛋白阳性表达与病理学分级(P＜0.01)、Nevin分期(P＜0.05)、淋巴结转移(P＜0.01)有关.(2)Nrf2蛋白在胆囊癌、胆囊腺瘤及慢性胆囊炎组的阳性表达率分别为66.7％ (36/54)、20.0％ (4/20)及5.0％(1/20),差异有统计学意义(P＜0.01).Nrf2蛋白阳性表达水平与病理学分级(P＜0.05)、Nevin分期(P＜0.01)、淋巴结 转移(P＜0.01)有关.(3)WWOX阳性表达与Nrf2阳性表达均与患者的性别、年龄、病理类型及是否伴有结石无显著关系(P＞0.05).(4) WWOX阳性表达与Nrf2阳性表达呈负相关(r=-0.420,p＜0.01).[结论]WWOX和Nrf2表达可能是反映胆囊癌发生、进展、生物学行为和预后的重要生物学标记物;WWOX和Nrf2蛋白在胆囊癌中的表达呈明显的相关性,可能在胆囊癌的发生中起协同作用.     

肺泡Ⅱ型上皮细胞染色体脆性位点基因WWOX与特发性肺间质纤维化的关系

目的研究肺间质纤维化模型大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞染色体脆性位点基因WWOX表达的改变。方法 SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组及川芎嗪预防用药组,每组6只,分别于给药7、14、28 d后提取肺泡Ⅱ型上皮细胞体外培养,免疫组织化学法检测WWOX蛋白表达。结果与假手术组比较,注射博莱霉素7 d后模型组大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞染色体脆性位点基因WWOX蛋白表达无显著变化。用药14、28 d后,WWOX蛋白表达则明显下降。而川芎嗪预防用药组WWOX蛋白表达比模型组有显著上调。结论肺间质纤维化过程中可能存在染色体脆性位点基因WWOX的改变,川芎嗪可以在一定程度上抑制这种改变而发挥防治作用。     

STAT3与WWOX在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的：研究STAT3与WWOX在非小细胞肺癌及肺正常组织中的表达及两者之间的关系。方法：应用免疫组织化学S-P法,检测STAT3、WWOX在40例非小细胞肺癌组织、20例正常肺组织中的表达情况,并分析其与各临床病理指标之间的关系。结果：①STAT3在非小细胞肺癌组织中的表达明显高于肺正常组织（P〈0.01）,WWOX在非小细胞肺癌组织中的表达明显低于肺正常组织（P〈0.01）。②STAT3在腺癌组织中的表达明显高于鳞癌（P〈0.01）,WWOX基因的表达与淋巴结转移相关（P〈0.01）,在有淋巴结转移的肺癌组织,其表达更少或缺失。③STAT3蛋白与WWOX在非小细胞肺癌中的表达呈负相关（P〈0.01）。结论：①非小细胞肺癌中有组成性激活的STAT3信号通路,提示STAT3信号通路在非小细胞肺癌发生、发展中发挥重要作用;②STAT3与WWOX在非小细胞肺癌中的表达呈负相关。     

抑癌基因WWOX与相关基因p73、Bax在结直肠癌中的表达及意义

目的探讨含有WW结构域的氧化还原酶基因（WW domain containing oxidoreductase,WWOX）的表达与结直肠癌生物学行为及p73、Bax表达的相关性。方法应用免疫组化Envision二步法检测58例结直肠癌中WWOX、p73及Bax的表达,并以20例结直肠黏膜炎症为对照。结果①WWOX、Bax在结直肠癌组织中的阳性率分别为25.86%、58.62%,显著低于结直肠黏膜炎症的65%、85%（P〈0.01,P〈0.05）;二者在结直肠癌中的表达与患者的预后相关（P〈0.01,P〈0.05）,且WWOX的表达在癌组织与浸润深度相关（P〈0.05）;②p73在癌组织中的阳性率显著高于炎症组（63.79%vs 30%,P〈0.01）,在结直肠癌中的表达与淋巴结转移及浸润深度有关（P〈0.05）;③WWOX与p73的表达无关（χ2=0.072,P〉0.05）,而与Bax的表达有关（χ2=6.561,P〈0.05）。结论 WWOX、p73及Bax参与调控结直肠癌的发生、发展,且WWOX与Bax协同作用,在结直肠癌的预后中扮演了重要角色。     

胆囊癌WWOX、Survivin表达及相关性研究

目的观察WWOX、Survivin在胆囊癌中的表达,探讨WWOX和Survivin与胆囊癌的相关性。方法采用免疫组化法检测48例胆囊癌组织、20例癌旁正常胆囊粘膜组织WWOX和Survivin的表达。结果胆囊癌组织中WWOX的阳性表达率显著低于正常胆囊粘膜组织（P〈0.01）,胆囊癌组织中Survivin的阳性表达率显著高于正常胆囊粘膜组织（P〈0.01）,胆囊癌中WWOX和Survivin阳性表达率与病理分级、临床分期和淋巴结转移情况相关（P〈0.05）,WWOX和Survivin在胆囊癌组织中的表达明显负相关（P〈0.05）。结论 WWOX和Survivin蛋白异常表达在胆囊癌发生过程中具有重要意义。     

WWOX基因真核表达载体的构建及其在SMMC-7721中的表达

Objective:To construct eukaryotic expression plasmid pEGFP-N1-WWOX and transiently express it in SMMC-7721 cells.Methods:Total mRNA was extracted from normal human liver tissue.RT-PCR was used to amplify the aimed segments WWOX cONA which was then digested with Hindlll and BamHl and inserted into a eukaryotic expression plasmid pEGFP-N1 to construct pEGFP-N1-WWOX.The constructed plasmid was transfected into SMMC-7721 cells by lipofectamine 2000-mediated transfer method.The expression of WWOX in transfected SMMC-7721 cells was detected 24.36 and 48 h post-transfection with fluorescence microscope and the expression level of WWOX mRNA in transfected SMMC-7721 cells was assay by using RT-PCR.The change of WWOX expression and cell proliferation rates were detected by immunocyto-chemistry and MTT methods respectively.Results:The results showed pEGFP-N1-WWOX was successfully constructed and expressed transiently in SMMC-7721 cells.At 48th hour post-transfection.the number of positive cells was jncreased significantly and much brighter green fluorescence could be detected,while no green fluorescence was detected in the control group.In SMMC-7721 cells transfected with pEGFP-NI-WWOX a high level of porcine WWOX was detected.WWOX ex-pressed by transfected cells could significantly inhibit che proliferation of SMMC.7721 cells.Conclusion:pEGFP-N1-WWOX was expressed successfully in SMMC-7721 cells,which suggested that might be used as a new therapeutic method for liver cancer.     

VEGF与WWOX蛋白在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨VEGF和WWOX蛋白在结直肠癌组织及其癌旁组织中的表达、与临床病理参数的关系及两者表达的相关性。方法应用免疫组化SP法检测70例原发性结直肠癌患者术后癌组织及其癌旁组织标本中VEGF和WWOX蛋白的表达。结果结直肠癌组织中VEGF的表达率68．6％（48/70）高于癌旁组织的40％（28/70）（P〈0．05）,结直肠癌组织中WWOX蛋白的表达率25．7％（18/70）明显低于癌旁组织的70％（49/70）（P〈0．05）;VEGF与WWOX蛋白表达的高低与结直肠癌的浸润程度、分化程度、Dukes分期以及有无淋巴转移均有关（P〈0．05）,与患者性别、年龄、肿瘤大小等病理参数无关（P〉0．05）,且在结直肠癌组织中VEGF和WWOX蛋白的表达存在关联（x^213．961,P〈0．001,r=-0．477）。结论VEGF和WWOX蛋白在结直肠癌及癌旁组织的表达有显著差异,且VEGF和WWOX可能存在负相关关系。VEGF在结直肠癌发生及发展中发挥着至关重要的角色,联合检测VEGF和WWOX蛋白的表达对结直肠癌的早期诊断、治疗及预后具有重要的临床指导意义。