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71.
Beeri Rachel; Gnatt Averell; Lapidot-Lifson Yaron; Ginzberg Dalia; Shani Moshe; Soreq Hermona; Zakut Haim 《Human reproduction (Oxford, England)》1994,9(2):284-292
Gene amplification occurs frequently in tumour tissues yet is,in general, non-inheritable. To study the molecular mechanismsconferring this restraint, we created transgenic mice carryinga human butyrylcholinesterase (BCHE) coding sequence, previouslyfound to be amplified in a father and son. Blot hybridizationof tail DNA samples revealed somatic transgene amplificationswith variable restriction patterns and intensities, suggestingthe occurrence of independent amplification events, in 31% (11/35)of mice from the FII generation but in only 3.5% (2/58) of theFII and FIV generations. In contrast, >10-fold amplificationsof the BCHE transgene and the endogenous acetylcholinesteraseand c-raf genes appeared in both testis and epididymis DNA from>80% of FIII mice. Drastic, selective reductions in testisBCHEmRNA but not in actin mRNA were detected by the PCR amplificationof testis cDNA from the transgenic mice, and apparently resultedin the limited transmission of amplified genes. The testicularamplification of the BCHE transgene may potentially representa general phenomenon with clinical implications in human infertility. 相似文献
72.
人抗HBsAg噬菌体抗体Fab段基因的序列分析及表达 总被引:3,自引:0,他引:3
对已建的噬菌体抗体库分离出来的人抗-HBs克隆进行了序列分析和表达研究,发现4个克隆中3个克隆的重链和轻链完全相同,DNA序列分析表明VH分别属于VH1亚群和Ⅱ亚群,其轻链VL分别属于VλⅡ亚群和VλⅠ亚群。构建了可溶性Fab段表达载体,显示出在细菌中表达的Fab段抗体与HBsAg特异性结合,这说明所筛选出来的噬菌体抗体具有HBdisplay status 相似文献
73.
慢性乙型肝炎表面抗原携带者前S1基因的高度异质性 总被引:1,自引:0,他引:1
应用半巢式聚合酶链式反应(PCR)从一例慢性HBsAg携带者血清中扩增出HBV前S1基因,将其克隆于噬菌体M13mp19中进行序列分析。结果发现:与同源性最好的HBVadr野生林相比,所测的10个克隆均有替代和插入突变,9个克隆有缺失突变,10个克隆的核苷酸变异率为5.0%-17.0%,氨基酸的变异率为13.0-60.0%;10个克隆之间的核苷酸变异率为2.3%-24.3%,氨基酸的变异率为14. 相似文献
74.
SM6是我国检测E1Tor霍乱弧菌是否带有溶源性噬菌体的指示菌株。江苏的6株E1Tor霍乱弧菌和SM6都属于噬菌体-生物分型的1d型,而在噬菌体分型中SM6为1/2型,江苏的6株菌株则为1/2/3型;霍乱毒素(CT)基因测定也表明两者的不同,SM6不含CT基因,江苏的6株都含有CT基因,显示噬菌体分型可将噬菌体-生物分型的型别进一步划分,SM6的特性也为霍乱的进一步研究提供了资料。 相似文献
75.
应用对应于Dystrophin基因缺失热区的二对PCR引物和一对内对照无关引物,在同一反应体系中扩增,检测66例DMD/BMD患者。发现其中25例存在17号或49号外显子缺失,与同时采用cDNA探针杂交检测出的35例基因缺失相比.检出率达71.4%。说明该扩增系统能够作为快速筛查缺失型DMD/BMD患者的有效手段。这对指导合理选用探针,尤其在产前诊断方面,具有重要意义。 相似文献
76.
Multiplex PCR analysis of in vivo-arising deletion mutations in the hprt gene of human T-lymphocytes
James C. Fuscoe Lisa J. Zimmerman Karen Harrington-Brock Martha M. Moore 《Environmental and molecular mutagenesis》1994,23(2):89-95
A multiplex polymerase chain reaction (PCR) procedure was adapted for the rapid and efficient evaluation of deletions of the hypoxanthine guanine phosphoribosyltransferase (hprt) gene in human T-lymphocytes. The hprt clonal assay was used to isolate in vivo-arising hprt-deficient T-cells from six healthy males. Mutant frequencies ranged from 9-27 × 10?6. Simple crude cellular extracts from 223 mutants were analyzed for hprt gene deletion. Sixteen (7.2%) were found to be due to total gene deletion and 22 (9.9%) were due to partial gene deletion. The relatively high frequency of total gene deletions was caused by replicate isolates of a single mutational event as shown by single-strand conformation polymorphism (SSCP) analysis of rearranged T-cell receptor (TCR)-γ genes. Eighteen of the 22 partial hprt gene deletion mutants were determined to be of independent origin based on a unique hprt mutation or SSCP-TCR-γ pattern. One-half (9/18) of the partial deletion mutants involved all or part of exon 4 alone, suggesting that this region of the hprt gene is prone to deletion. The small deletions effecting exon 1 (1 mutant), exon 2 (2 mutants), and exon 4 (6 mutants) would not have been detected by conventional Southern blot analysis and may represent a new, previously unrecognized class of mutations. The ready isolation of such intragenic deletions will allow the characterization of breakpoint junctions and may provide insights into the important processes of DNA breakage and rejoining. © 1994 Wiley-Liss, Inc. 相似文献
77.
目的:获得SENV-D亚型ORF1-C端蛋白基因序列,并进行表达,为进一步研究及诊断、治疗应用奠定基础.方法:用PCR法从SENV阳性血清中获得SENV-DORF1C端基因,测序验证后,构建了pQE30-SENV-D重组表达质粒,并经过转化E.coli M15,IPTG诱导表达,Western blot分析表达结果.结果:获得了正确序列的SENV-D亚型ORF1-C端蛋白基因序列,表达出Mr约为38×103的蛋白.表达蛋白能与患者血清中相应的抗体结合,发生抗原抗体反应.结论:成功获得并表达了SENV-D-ORF1-C端蛋白,并经Western blot印迹法证实能与阳性血清中的抗体发生抗原抗体反应,有可能用于检测SENV-D抗体.为今后进一步研究有助于疫情监测及早期发现感染者的抗体奠定了坚实的基础. 相似文献
78.
目的观察耐药乳腺癌细胞c-myc表达及其反义寡核苷酸对耐药的逆转效应,探讨c-myc在耐药调控中的作用。方法运用流式细胞仪检测乳腺癌耐药细胞MCF-7/Adr和其药敏亲本系MCF-7的c-myc表达水平。MTT法测定阿霉素作用于上述细胞的药物半数抑制浓度(IC50)。结果MCF-7/Adr耐药细胞c-myc的表达率为70.48%,其亲本药敏细胞系MCF-7c-myc表达率仅46.02%,前者显著高于后者(P<0.05)。阿霉素单独作用于MCF-7/Adr,IC50值为(22.00±1.92)μmol/L,但与4μmol/Lc-myc反义寡核苷酸共孵育后,阿霉素的IC50值则显著下降为(9.60±1.04)μmol/L。结论与其亲本药敏细胞相比较,MCF-7/Adr的c-myc表达显著上调,抑制c-myc的过表达可部分逆转MCF-7/Adr的阿霉素抵抗,提示c-myc参与肿瘤耐药的发生。 相似文献
79.
C_3基因在BXSB小鼠主要脏器中的表达 总被引:1,自引:1,他引:0
用同位素标记cDNA探针的分子杂交方法检测了BXSB小鼠肝、肾、脾、胸腺各脏器中补体C_3mRNA的表达情况,结果表明3~4月龄雄性BXSB小鼠肝、肾、脾各脏器C_3mRNA的表达量较正常对照鼠显著增加。C_3基因的过度表达可能参与BXSB小鼠SLE多脏器非感染性炎症的发生,同时提示该鼠存在M系统的大量扩增及活化。 相似文献
80.
Transformation of a Drosophila virilis white mutant host strain was attempted using a hobo vector containing the D. melanogaster mini-white+ cassette (H[w+, hawN]) and an unmodified or heat shock regulated hobo transposase helper. Two transformant lines were recovered with the unmodified helper (HFL1), one containing only the white+ marked vector, and a sibling line containing the vector as well as an HFL1 helper integration. An approximate total transformation frequency of 1% is deduced. A high frequency of wing and eye morphology mutants were also observed, suggesting that hobo may have mobilized a related element in D. virilis. The data reaffirms a relatively low transformation vector activity for the hobo transposon in D. virilis; however, nearly full interspecific expression of the white+ marker supports its possible function in other species as well. 相似文献