兔蜗神经相关听觉诱发电位的实验研究

目的通过听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)、脑膜ABR和蜗神经动作电位(cochlear nerve action potential,CNAP)3种听觉监测技术在动物模型上的应用,比较各方法之间的优劣,选择一种较好的听觉监护方法.方法选择纯种新西兰大白兔,20健康耳,ABR测试反应阈在80 dB peSPL以下,无中耳病变.从枕骨进路,解剖暴露神经颅内段,进行常规ABR、脑膜ABR、CNAP的记录.结果3种记录ABR和CNAP的方法都能获得良好的波形,ABR的Ⅰ波、Ⅱ波、Ⅲ波和CNAP的N1、N2、N3潜伏期及波间期差异均无统计学意义.CNAP的波幅最大,脑膜上记录ABR的波幅比常规ABR大,脑膜ABR的电极固定相对方便,可靠.结论提示可以在脑膜上记录ABR进行术中听觉监测.     

诱导兔骨髓基质细胞向神经干细胞分化的初步实验研究

目的：观察兔骨髓基质细胞体外培养的生长行为及增殖、分化情况，探讨由骨髓分离培养神经干细胞的可行性和有效性。方法：无菌条件下行骨穿术，密度梯度离心分离获取骨髓基质细胞，利用多种增殖、分化诱导因子和神经干细胞培养液进行培养、分化诱导，用免疫细胞化学方法进行鉴定。结朵：骨髓基质细胞在体外培养中能形成NESTIN抗原阳性的细胞克隆团，进一步分化，部分细胞胞体增大并出芽，逐渐发育成为较成熟的长突起细胞，长突起相互连接、交织成网并建立纤维联系。结论：骨髓基质细胞具有较强的自我更新能力和多向分化潜能，易于取材、体外培养和增殖，在一定诱导条件下可以生成神经干细胞。     

t-PA多次小剂量注射辅助兔滤过手术

目的 :探讨组织型纤溶酶原激活剂 (t PA)在兔眼滤过术后多次小剂量注射的有效性和毒副作用 .方法 :4 0只兔眼行全厚巩膜咬切滤过手术 ,治疗组术后前房注射t PA及术后 1d和 3d经滤泡旁结膜注射于滤泡结膜下 ,每次 2 5 μg .对照组注射等量生理盐水 .术后临床观察结合光镜及免疫组化检查 .结果 :对照组术后 3d滤过道及滤泡腔内有纤维蛋白凝块及红细胞栓子阻塞 ,而t PA治疗组滤过道完全开放 ,炎性细胞及成纤维细胞的数量明显减少 ;术后 7d和 1 4d治疗组手术区肉芽组织和瘢痕组织的量亦明显少于对照组 .免疫组化结果显示 ,治疗组手术区纤维连结蛋白 (fibronectin ,FN)和Ⅲ型胶原的沉积量较对照组少 ,出现时间晚 .与组织学检查相一致 ,术后 1wk内治疗组滤过泡比对照组明显增大 ,术后 1 3d内眼压明显低于对照组 (P <0 .0 5 ) .结论 :小剂量t PA多次注射能有效溶解滤过道及滤泡腔内的纤维蛋白凝块 ,提高滤过手术的成功率 .t PA经滤泡旁结膜注射于滤泡结膜下 ,是一种简便、安全、有效的给药途径     

家兔化学裸露心肌标本制备及其张力-pCa关系

家兔右室乳头肌在含3mM EDTA、5mM Na_2ATP、10mM Tris、140 mM KCl的溶液中浸浴150min,其Ca~(2+)通透性显著增高。Ca~(2+)浓度为10~(-7)M时,便可产生张力,10~(-4.6)M时,张力达到最大。相对张力-pCa(Ca~(2+)浓度的负对数)关系近似一S形曲线,产生50％最大张力的Ca~(2+)(pCa_(50))约为10~(-6.6)M。同法制备的大鼠乳头肌Ca~(2+)通透性未见增高。     

动脉粥样硬化兔胸主动脉环iNOS的活性表达

采用高脂饮食喂养兔制备动脉粥样硬化（ＡＳ）动物模型，测定血管环对去甲肾上腺素（ＮＥ）的收缩反应性，血管环ＣＧＭＰ浓度变化及其诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）活性的变化。结果表明：ＡＳ兔血管环对ＮＥ的反应性减弱（Ｐ＜０．０５），ＣＧＭＰ浓度减低（Ｐ＜０．０５），ｉＮＯＳ活性明显增强（Ｐ＜０．０５）；加入左旋精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）和硝普钠（ＳＮＰ）后ＡＳ兔血管环对ＮＥ的反应进一步降低（Ｐ＜０．０１），ＣＧＭＰ浓度增加（Ｐ＜０．０１）。一氧化氮合酶（ＮＯＳ）阻滞剂Ｌ－硝基精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ）的作用则与上述相反（Ｐ＜０．０１）。提示Ｌ－Ａｒｇ／ＮＯ途径的改变可能是ＡＳ形成的机制之一     

重组人碱性成纤维细胞生长因子促冠状动脉血管新生的实验研究

目的:探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)促冠状动脉血管新生的效果.方法:无菌条件下开胸结扎兔冠状动脉左前降支(LAD),建立急性心肌梗塞动物模型;将bFGF基因克隆于原核系统表达载体并转染大肠杆菌pBV220-bFGF)/DH5α,经诱导表达后超声破碎,上清液经过CM-Sepharose阳离子交换程序及Heparin-Sepharose亲和程序两步纯化,得到纯度高达99%的rhbFGF,透析出盐、滤菌后备用.将自制的rhbFGF蛋白,直接四点注入兔缺血心肌内,通过病理切片光镜观察、图像分析、电镜及冠脉造影观察缺血心肌内血管新生情况.结果:(1)术后不同时间描记的ECG变化及术后24 h,48 h心肌酶的改变均证实兔急性心肌梗塞(AMI)模型制作成功.(2)结扎LAD后6周(短期)及12周以上(长期),rhbFGF组与生理盐水(NS)对照组病理切片,随机观察10个高倍视野无平滑肌小血管计数分别为6周:41.13±10.04,30.33±3.21,P<0.01;12周以上:50.50±9.20,32.63±7.25,P<0.01;20周:52.44±6.59,32.00±3.06,P<0.01;有平滑肌血管计数分别为6周:16.25±5.23,10.75±4.25,P<0.01;12周以上:16.88±4.87,11.25±5.09,P<0.01;20周:16.25±2.22,11.00±3.35,P<0.01.(3)图像分析计算较大血管(管径≥100 μm)平均管壁厚度,rhbFGF组与NS对照组术后6周分别为:(19.70±9.94)μm,(18.88±9.65)μm,P>0.05;12周以上分别为:(29.87±12.96)μm,(24.13±11.33)μm,P<0.01;20周分别为:(28.48±12.13)μm,(23.25±10.02)μm,P<0.01;平均管壁厚度与管腔大小的比值rhbFGF组与NS对照组6周分别为:0.32±0.18,0.24±0.12,P<0.01;12周以上分别为:0.33±0.14,0.25±0.09,P<0.01.20周分别为:0.32±0.11,0.25±0.16,P<0.01;(4)电镜观察:与NS对照组相比rhbFGF组心肌细胞间可见大量毛细血管生长;(5)结扎LAD6周rhbFGF组冠脉造影可见侧枝血管形成.结论:rhbFGF有急性扩张冠脉及限制心肌梗塞面积的作用,缺血心肌内注射rhbFGF能促进冠状动脉血管新生,其有可能成为一种新的冠心病治疗方法.     

兔食管对硅胶导管压迫缺血的耐受性实验

目的：探讨兔食管对硅胶导管压迫缺血的时限，局部病理变化，为进一步临床应用提供实验基础。方法：随机选用2．5kg左右的16只新西兰大白兔，经颈段食管置入外径5．5mm，长10mm硅胶导管，颈段食管外置，经腹行胃蘑菇造瘘，术后经蘑菇管给予流质，半流质，饲养1，2周后分别处死，进行受压食管大体解剖观察及组织病理切片检查。结果：受压食管壁变薄，黏膜角化层形成，肌细胞萎缩，少量炎性细胞浸润，死亡1只，无一例食管胸膜瘘发生，结论：兔食管硅胶导管有一定的耐受性，使用低张力气囊导管效果可能会更好，有望在临床上进一步使用。     

兔急性颅内高压模型的经颅多普勒（TCD）波形改变

目的：探讨颅内高压状态下经颅多普勒（transcranial Doppler,TCD)频谱波形的动态变化规律。探索颅内压（intracranial pressure,ICP)与TCD频谱形态变化的关系。方法：采用硬膜外球囊注水法制作急性颅内高压动物模型。20只新西兰白兔随机分为对照组（8只，硬膜球囊不注水）。实验组（12只，硬膜外球囊分次注水），持续监测ICP及TCD，结果；急性局灶性颅内压升高时，TCD频谱出现相应变化，并存在“S2峰状波”及“双尖塔状波”两种典型波形，两种波形变化对应相对固定的ICP段。结论：TCD频谱的变化能较早地反映ICP的变化及颅内高压（intracranial hypretension,ICH)的严重程度。