植物抗体及其应用

20世纪80年代末科学家将抗体基因转入烟草表达,标志着植物抗体的诞生.人类既可以以植物为生物反应器异源表达和生产具有药用及商业价值的蛋白质;也可用抗体在植物体中进行免疫调节,以研究植物生理代谢机制,或增加植物抵抗病虫害的能力.本文旨对植物抗体的优越性、表达生产及其在医药学、植物抗病及代谢等领域的进展进行综述和讨论.     

一种高效逆转录病毒载体pSIV-1的构建及其功能的初步鉴定

构建高效的逆转录病毒载体pSIV-1,并对其功能进行初步鉴定。对pEGZ-Term、pLXSN、pGEX-5X-3等各类表达载体的调控元件进行分析后,运用分子生物学手段去除表达载体pEGZ-Term中的部分元件,定向插入启动子SV40、选择性标志G418、多克隆酶切位点等,从而获得一种新型逆转录病毒载体pSIV-1。运用新载体构建含人PD-L1基因片段的重组载体,并用脂质体转染法,将其转染至包装细胞系293T。收集含重组病毒的上清转染L929细胞,用含G418的培养液筛选,成活细胞经流式细胞仪检测到目的蛋白后,扩大培养,从而获得L929/PD-L1基因转染细胞。L929/PD-L1基因转染细胞与活化T细胞体外混合培养,观察PD-L1信号对T细胞活化后表达CD25、CD69的影响。结果,成功构建了pSIV-1逆转录病毒载体;酶切图谱分析与理论值一致;基因转染细胞能持续稳定高表达PD-L1,筛选时间较短,感染效率较高;PD-L1基因转染细胞能显著抑制T细胞的进一步活化。因此构建成一种新型高效逆转录病毒载体pSIV-1,为构建基因转染,并开展相关功能学研究奠定了良好的物质基础。     

先天性心脏病伴肺动脉高压肺组织中腺泡内动脉转化生长因子-β1 mRNA和内皮素-1 mRNA的表达及意义

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)和内皮素-1(ET-1)在先天性心脏病(先心病)伴肺动脉高压(PH)的肺组织腺泡内肺动脉中的表达及意义.方法收集51例肺组织,其中41例为左向右分流型先心病患儿[伴PH 25例(A组),无PH 16例(B组)],对照组10例(C组),应用原位杂交、图像分析检测51例腺泡内肺动脉(IAPA)TGF-β1 mRNA和ET-1 mRNA的表达及平均吸光度值(A值);透射电镜观察肺组织超微结构;弹力纤维(VG)染色显示腺泡内肺动脉并计算其数量的变化.结果 (1)肺腺泡内部分肌型及环肌型动脉的数量,A、B两组分别与C组比较, F值分别为149.96、142.01,P<0.01;(2)电镜观察,有的肺小动脉内皮细胞增生;中膜平滑肌增厚,平滑肌细胞面积增大;外膜胶原纤维密集;毛细血管基膜增厚;(3)原位杂交发现,TGF-β1 mRNA在A、B两组腺泡内肺动脉均有阳性表达,A值分别为(0.1988±0.0498)、(0.1098±0.0428),C组表达微弱(A值=0.0578±0.0096),A、B、C三组间比较差异有统计学意义(P<0.05);ET-1 mRNA 在A、B两组肺腺泡内肺动脉内皮细胞表达明显增强,A值分别为(0.1692±0.0205)、(0.1004±0.0140),C组仅有微弱表达(A值=0.0746±0.0119),A、B、C三组间比较差异有统计学意义(P<0.01).结论左向右分流型先心病患儿肺组织腺泡内部分肌型及肌型动脉数量明显增加,肺血管结构重组,TGF-β1 mRNA、ET-1 mRNA表达增高与先心病伴PH的发生有关系.     

Oct2蛋白在淋巴瘤中的表达及意义

目的通过检测淋巴瘤中Oct2蛋白的表达,观察其特异性和敏感性,探讨Oct2在淋巴瘤诊断和分类中的意义. 方法应用免疫组织化学EnVision法检测并观察129例不同类型淋巴瘤和10例淋巴结反应性增生(RLH)中的Oct2蛋白表达.结果 RLH中Oct2主要表达在生发中心细胞,而B细胞淋巴瘤则为弥漫阳性表达.Oct2阳性率在B细胞淋巴瘤为97.7%(85/87),与CD20阳性率90.8%(79/87)相比差异无统计学意义(P>0.05);与CD79α阳性率84.7%(61/72)相比差异有统计学意义(P<0.05).Oct2阳性率在T细胞淋巴瘤为3.8%(1/26);在结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤(NLPHL)和经典型霍奇金淋巴瘤(CHL)分别为3例均阳性和46.2%(6/13),后两组间比较P>0.05.结论作为B细胞淋巴瘤一种新的相对特异而敏感的标记物,Oct2抗体可能有助于淋巴瘤的诊断和分类,可作为诊断B细胞淋巴瘤的首选标记物之一.     

人鼻型NK/T细胞淋巴瘤表达谱基因芯片的筛查研究

Ko等对7例鼻型NK／T细胞淋巴瘤进行了比较基因组杂交和杂合性缺失分析,发现在染色体2q、3q、5q、10q、13q、17q和21q等处有：DNA拷贝数增加;而在1p、17p、6q、12q和13q有基因缺失。0ka等对NK／T细胞淋巴瘤细胞系NK-YS作了初步的基因芯片检测,发现蛋白酪氨酸蛋白磷酸酶SHP-1基因表达下调。本研究旨在初步筛选和观察部分肿瘤相关基因差异性表达的情况。     

转化生长因子β1在吸烟所致病理变化中的作用

转化生长因子β1(TGF-β1)是一类重要的细胞因子,作用的细胞谱型较广。吸烟及香烟烟雾提取物(CSE)均能使细支气管上皮细胞TGF-β1表达增加,从而促进上皮的修复与再生,同时又引起炎性细胞聚集,与小气道中气道重塑和导致阻塞改变有关;在吸烟所引起的肺气肿中,TGF-β1可能在抑制成纤维细胞增殖的过程中起关键作用。另外,TGF-β1与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在尼古丁诱导的动脉粥样硬化的发生发展中起关键作用,TGF-β1在CSE导致的骨质疏松症、烟草烟雾提取物(TSE)诱导的皮肤年龄相关性变化的过程中也起一定的作用。     

Bcl-2和Bax蛋白在Wistar大鼠胃粘膜的表达及其意义

Bcl-2是日前已知的抑制细胞凋亡的重要基因。Bax基因不但拮抗Bcl-2的抑制凋亡作用,而且有直接促进细胞凋亡的功能。Bax和Bcl-2是一对正负凋亡调节基因,研究其在大鼠胃粘膜的表达和分布,对研究胃粘膜的更新和发病机理有重要的意义。     

乳腺大汗腺癌的形态学与免疫表型特征

目的 观察乳腺大汗腺癌(apocrine carcinoma，AC)的形态学和免疫表型特征，并探讨其诊断标准。方法 对HE染色片中显示有大汗腺细胞学特点的30例乳腺癌标本进行组织学观察和免疫组化S—P法检测，并选取5例大汗腺化生(apocrine metaplasia，AM)及2例大汗腺腺病(apocrine adenosis，AA)和AA伴导管原位癌(DCIS)1例标本作对照组。使用的-抗包括GCDFP—15、Mucin—1、AR、ER、C—erbB-2、Ki-67。结果 ①8例被确定为AC，均为高核级，其中大汗腺导管原位癌(ADCIS)1例、ADCIS伴浸润性大汗腺癌(IAC)5例，IAC伴导管原位癌(DCIS)2例。镜下AC细胞的共同特征为：细胞大，胞界清，胞质丰富，深嗜伊红染，颗粒状；核大、圆，核仁常大而突出。依据胞质形态可分为：A型，胞质深伊红染，有数量不等的清晰颗粒；B型，胞质内大量细空虚的小泡，可聚呈泡沫状，类似组织细胞或皮脂腺细胞；C型，胞质浅染、均质，如细磨砂玻璃样；②8例AC与5例AM及2例AA均共同表达GCDFP—15、AR、Mucin—1及Ki-67；除1例外，ER均不表达；③AC的GCDFP—15的表达与大汗腺化生不同：前者呈胞质内弥漫颗粒或空泡状，表达有异质性；后者阳性颗粒聚成小球状团簇，位于细胞质的核上区。④AR平均阳性细胞数在Ac及AM分别为33．4％及93．8%；Ki-67平均阳性细胞数在AC及AM分别为52．4％及40％。结论 AC的诊断须具备3项标准：①HE细胞形态成分90％以上符合Ac型细胞；②GCDFP—15阳性，阳性细胞数占癌细胞总数50％以上；⑧AR阳性，阳性细胞数大于癌细胞总数20％。     

生物物理学

0500623 心肌短暂缺血后血管内皮生长因子表达的时间规律,0500624 电针联合经颅磁刺激对急性脑缺血大鼠VEGF及其受体Fik-1表达的影响,0500625 电针刺激神经干对脑缺血再灌注后不同时期皮层BDNF mRNA表达的影响,0500626 脑缺血再灌注损伤后神经细胞巢蛋白和干细胞因子基因表达,0500627 毫米波对周围神经损伤修复的影响。     

Pleiotrophin研究进展

原癌基因Pleiotrophin在肿瘤的发生、发展过程中起着重要作用，表达产物是生长因子，具有多种功能。现对Pleiotrophin发现、结构、功能、与肿瘤的关系及意义分别作了概述。