二阶导数紫外分光光度法测定粉防己碱凝胶的含量

目的　建立粉防己碱外用凝胶制剂中粉防己碱的含量测定方法。方法　采用二阶导数紫外分光光度法 ,以 2 87nm波长处半振幅 (H)测定制剂中粉防己碱的含量。结果　粉防己碱在 10～ 5 0 μg·ml-1范围内 2 87波长处半振幅 (H)值呈良好线性关系 (r=0 .999) ,平均回收率 10 0 .0 5 % ,RSD 为 0 .132 %。结论　本法简单、准确、灵敏 ,能够排除凝胶辅料的干扰 ,可作为外用凝胶制剂质量控制方法     

汉防己碱滴眼液对慢性高眼压兔模型治疗作用的研究

【】目的：探讨汉防己碱滴眼液对慢性高眼压兔模型的治疗作用。方法：新西兰兔18只,随机分为空白组(6只)、模型组(6只)及给药组(6只),利用复方卡波姆溶液进行慢性高眼压造模,给药组家兔给予汉防己碱滴眼液(浓度0.1 mg/ml)滴眼,模型组及空白组则给予等量生理盐水滴眼。治疗7天后处死各组家兔,取视网膜,分为两份,并分别用Thy-1染色及制备匀浆。利用光镜观测Thy-1染色并对其RGCs进行计数;检测匀浆液中SOD,GSH-PX及MDA含量。结果：空白组,给药组与模型组RGCs计数分别为(21.2±1.7),(20.1±2.5)及(15.2±2.3)个/高倍视野,空白组与给药组分别与模型组相比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05);模型组中内丛状层变薄,外核层细胞排列紊乱、数目减少且间隙扩大;给药组及空白组家兔视网膜各层组织层次分明、结构清晰且细胞排列整齐。给药组及空白组家兔视网膜匀浆液中SOD,MDA及GSH-PX水平均明显优于模型组。结论：汉防己碱滴眼液对慢性高眼压兔模型具有较好的治疗作用,值得开展深入研究。     

汉防己甲素对人鼻咽癌细胞株的放射增敏作用及其机制

目的：探讨汉防己甲素（Tet）对人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的放射增敏作用及其机制。方法：MTT法检测细胞增殖抑制作用,克隆形成实验比较细胞放射敏感性,流式细胞术检测细胞周期分布。结果：Tet对CNE1和CNE2细胞的最大非细胞毒性剂量分别为1.5μmol/L和1.8μmol/L,该浓度的Tet联合放射线照射与单纯放射线照射相比,在培养至第4~6d能明显抑制细胞增殖（P<0.01）。CNE1和CNE2细胞单纯放射线照射组平均致死剂量（Do）分别为(1.26±0.02)Gy和(2.27±0.04)Gy,Tet联合放射线照射组Do分别为(0.73±0.05)Gy和(1.61±0.08)Gy,放射增敏比分别为1.73和1.40（P<0.05）。单纯放射线照射组CNE1和CNE2细胞周期分布以G2期为主,分别为(42.62±2.07)%和(34.82±2.74)%,Tet联合放射线照射组CNE1和CNE2G2期比例分别为(17.02±1.87)%和(19.64±4.82)%（P<0.01）。结论：Tet能增加人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2对放射线照射的敏感性,机制可能与去除放射线照射诱导的G2期阻滞有关。     

粉防己碱-阿霉素复合脂质体的制备及质量控制评价

目的:制备粉防己碱-阿霉素复合脂质体并对其工艺及质量进行研究与评价,为临床上逆转肿瘤的多药耐药提供新的思路。方法:采用3种不同脂质体制备方法,并以包封率为指标进行处方筛选和工艺优化。结果:确定了硫酸铵梯度法结合pH梯度法制备复合脂质体的最佳处方最佳处方为:药脂比1∶20,磷脂-胆固醇比例3∶1,外水相pH值为7.6,硫酸铵浓度为250mmol/L。以该处方制备的脂质体DOX的平均包封率为90.77%,TET的平均包封率为80.12%。结论:该处方制备的粉防己碱-阿霉素复合脂质体包封率及外观良好,在低温充氮条件下较稳定,为进一步实验奠定了基础。     

汉防己甲素治疗野百合碱诱发大鼠肺动脉高压的作用研究

以野百合碱复制Ｗｉｓｔａｒ大鼠肺动脉高压模型，观察汉防己甲素对其血流动力学的作用及对肺腺泡内动脉的影响。结果表明：汉防己甲素可使肺动脉收缩压、右心室收缩压及右心房收缩压分别降低２８．０％、２８．３％及３１．５％；并使肺腺泡内动脉内皮细胞空泡变减少，内皮下腔减少和缩小，中膜胶原纤维和平滑肌细胞亦减少，使其管壁变薄。     

汗防已甲素联合塞来昔布逆转白血病细胞耐药的体外研究

目的：通过汗防已甲素联合塞来昔布逆转白血病细胞耐药的实验研究,探讨有关多药联合逆转肿瘤细胞的耐药机制.方法： 噻唑蓝（MTT）比色法检测汗防已甲素联合塞来昔布对K562细胞的细胞毒试验;用流式细胞技术（FCM）检测各组K562细胞内的药物浓度;用FCM检测各组的早期凋亡（Annexin Ⅴ）;用RT-PCR检测各组COX-2/COX-1的表达.结果： 汗防已甲素联合塞来昔布对K562细胞的抑制作用与其他组相比有显著性差异（P〈0.05）;细胞内的药物浓度高于其他实验组;诱导凋亡率（17.67%）高于其他实验组;COX-2/COX-1的表达明显低于其他实验组.结论： 汗防已甲素联合塞来昔布逆转K562细胞的效果明显,能够增加K562细胞内药物浓度,诱导细胞凋亡,降低 COX-2/COX-1的表达.     

粉防己碱对实验性脑血管痉挛核因子-κB活性变化的影响

目的探讨粉防己碱(Tet)对实验性脑血管痉挛动脉核因子-κB(NFκ-B)活化的影响以及对血管痉挛的防治作用。方法对日本大耳白家兔采用枕大池二次自体动脉血注入法制做蛛网膜下腔出血(SAH)模型。动物随机分为4组:对照组(n=10)、单纯注血组(n=10)、Tet干预组(n=10)和生理盐水干预组(n=10,动物给予等量生理盐水腹腔注射),于第一次注血后第7天将动物处死,取基底动脉进行形态学观察,应用免疫组化及电泳迁移率改变分析等方法检测NFκ-B活性表达变化。结果单纯注血组较对照组基底动脉出现明显管腔狭窄、炎性浸润等改变,NFκ-B的活性也明显增高;Tet干预组较单纯注血组痉挛程度和炎性浸润明显减轻,同时NFκ-B活性明显下降,而生理盐水组较单纯注血组则无明显差异。结论Tet能够通过直接抑制炎性细胞浸润和NFκ-B的激活从而显著减轻脑血管痉挛的程度和血管壁炎性浸润程度。     

半乳糖化白蛋白汉防己甲素纳米粒的合成

目的制备半乳糖化白蛋白汉防己甲素纳米粒（Galn-BSA-Tet-NPs）,并考察合成半乳糖化白蛋白的最佳条件。方法以乳糖和牛血清白蛋白为原料,采用还原胺化法制备半乳糖化白蛋白（Gain-BSA）。采用苯酚-硫酸比色法测定糖化比率,以糖化比率作为指标考察反应的pH、时间、催化物剂量的多个水平,从中选出最优化组合。并采用去溶剂化法制备半乳糖化白蛋白汉防己甲素纳米粒（Galn-BSA-Tet-NPs）。结果制备半乳糖化白蛋白的最佳条件是磷酸缓冲液的pH值为7.4,反应时间为80h,氰基硼氢化钠的催化量为0.8mmol／L;成功合成了半乳糖化白蛋白汉防己甲素纳米粒（Gain-BSA-Tet-NPs）。结论汉防己甲素可以采用去溶剂化法制备成半乳糖化白蛋白纳米粒,此方法可提高汉防己甲素在水相中的浓度,并靶向肝细胞,从而增强汉防己甲素的抗肝纤维化药效。     

汉防己甲素对肾小球硬化大鼠肾单位的影响

目的 :探讨中药汉防己甲素 (Tetrandrine)对单侧肾切除加两次注射阿霉素肾小球硬化大鼠肾单位的作用。方法 :将实验动物分为 :正常对照组、汉防己甲素治疗组、氨氯地平治疗对照组和模型组 ,于第 12周留取尿标本。肾组织病理学检查、图像分析肾单位变化 ,用Northernblot杂交检测TGF - βmRNA表达。 结果 :汉防己甲素治疗组和氨氯地平治疗对照组肾小球ECM明显减少 (肾小球ECM /GA为 0 .2 4± 0 .0 2、0 .2 9± 0 .0 1,比模型组 0 .39± 0 .0 2 ,(P <0 0 5 ) ,肾病理损伤减轻 ,肾皮质TGF - βmRNA表达下调 ,汉防己甲组和模型组肾小管上皮细胞高度无明显差异 (P <0 0 5 )。结论 :汉防己甲素治疗机理为通过下调肾皮质TGF - βmRNA表达参与了延缓肾小球硬化的机理。     

响应曲面法优化防己中汉防己甲素及汉防己乙素的提取工艺

目的:以汉防己甲素和汉防己乙素的提取率作为考察指标,优化防己中汉防己甲素和汉防己乙素的提取工艺。方法:利用高效液相色谱法测定汉防己甲素和汉防己乙素的含量,采用响应曲面法考察乙醇体积分数、料液比及超声时间对提取效果的影响。结果:Design expert 10预测得到汉防己甲素最佳提取工艺为乙醇浓度为60%,料液比为1∶36.07,超声时间为57.12 min,提取率为13.53 mg/g;最佳提取汉防己乙素的提取工艺为乙醇浓度62.49%,料液比为1∶37.71,超声时间为59.38 min,提取率为8.71 mg/g。结论:该研究为防己中防己甲素和汉防己乙素的提取工艺提供实验依据。