利用浸苗法将野生天麻总DNA导入马铃薯的研究

目的研究野生天麻总DNA对马铃薯的转化,分析马铃薯转化植株中野生天麻的药用成分天麻素。方法采用浸苗法将野生天麻总DNA导入马铃薯试管苗,通过紫外扫描法、PCR扩增筛选转化植株,对转化植株进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)蛋白分析,通过TLC法检测天麻素。结果(1)在200株转化的马铃薯中有21株的紫外扫描图谱与正常对照组有显著差异,且在220 nm有明显吸收峰。(2)5株经PCR扩增出野生天麻抗真菌蛋白(GAFP)基因。(3)转基因马铃薯与正常马铃薯的蛋白表达有明显差异,并且在转基因马铃薯中有一条与GAFP相同的条带。而正常马铃薯中无此条带。(4)通过薄层色谱法检测出3株转基因马铃薯表达野生天麻的有效药用成分天麻素。结论采用浸苗法进行外源总DNA导入是可行的。     

天麻降压胶囊的薄层鉴别

目的建立天麻降压胶囊的鉴别方法。方法采用薄层色谱鉴别。结果利用薄层色谱鉴别可检测出其中天麻、钩藤、牛膝、黄芩、罗布麻。结论方法简便、准确，可作为天麻降压胶囊的鉴别方法。     

RP-HPLC测定天麻中天麻素的含量

目的 建立RP-HPLC测定天麻中天麻素含量的分析方法。方法 优化药材的提取及色谱的分析方法得分离良好的色谱图,外标法定量。色谱柱:Hypersil ODS色谱柱(4.6×250 mm);流动相:甲醇-0.1％冰醋酸水溶液(5:95);检测波长:270 nm。结果 色谱图中12个峰均可用其进行准确定量,其中天麻素含量测定的线性范围为0.60~2.41μg(r=0.999 9),平均加样回收率为97.85％,RSD=1.17％(n=5)。结论 本方法简便,准确,重现性好,可用于天麻中天麻素的含量测定,同时也可用于其它水溶性成分的定量。     

天麻道地产区的形成与变迁

天麻在我国已有2 000多年应用历史,为名贵中药材。天麻产地最早的记载为魏晋时期《吴普本草》所述的山东泰山和河南嵩山,并一直以山东泰安及其周边地区为道地产区,但从民国开始天麻产地发生了较大变化,道地产区向西迁移到西南地区。因此该文通过文献考证和实地走访调查,探讨分析了天麻道地产区的形成过程与产地变迁情况,介绍了天麻人工栽培历史和当前主流产地,并从自然、社会、交通、人文和种质资源方面分析了天麻道地产区形成和产地变迁的原因,从而为天麻质量评价和栽培生产研究提供参考。     

天麻提取物对血管性痴呆大鼠学习记忆及海马氧化损伤的作用

目的 观察天麻提取物对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠模型学习记忆能力及海马氧化损伤的影响.方法 采用双侧颈总动脉永久性结扎法,造成慢性脑灌注不足所致SD大鼠VD模型.术后分别灌胃给予天麻提取物高剂量7.29g/(kg·d)、低剂量0.81g/(kg·d)、尼莫地平30 mg/(kg·d),假手术组与模型组给予等体积的生理盐水,给药3周后,用Morris水迷宫检测各组大鼠逃避潜伏期和搜索距离;同时检测海马组织内丙二醛(MDA)量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性.结果 与模型组相比,天麻提取物高剂量能明显缩短逃避潜伏期和搜索距离(P＜0.05),使大鼠海马组织内MDA量降低、SOD和GSH-PX活性及SOD/MDA比值升高(P＜0.05).结论 天麻提取物具有改善血管性痴呆模型大鼠的学习记忆能力,其机制可能与清除自由基、减轻海马区的氧化损伤有关.     

乌天麻和红天麻及其杂种的同工酶分析

利用过氧化物酶同工酶分析红天麻、乌天麻及其杂种,结果表明：天麻的根状茎茎尖分生组织可用于过氧化物酶同工酶分析和杂种鉴定,带谱清晰,稳定性好。以红天麻为母本,乌天麻为父本所得的杂种,其谱带表现出明显的亲本互补关系。本试验说明,过氧化物酶可用于天麻杂种的鉴定。     

天麻钩藤饮联合美多巴治疗帕金森临床疗效观察

目的：观察天麻钩藤饮联合关多巴治疗帕金森的临床效果。方法：选择60例帕金森患者为研究对象,随机分成观察组和对照组两组,对照组患者采用美多巴治疗,观察组患者采用天麻钩藤饮联合美多巴治疗,比较两组的治疗效果。结果：观察组患者接受治疗2个月、4个月后,与治疗前相比,其UP—DRS评分、PDQ-39评分均显著降低（P〈0．05）,且观察组患者UPDRS评分、PDQ-39评分均显著低于对照组（P〈0．05）;两组患者睡眠质量评分无统计学差异（P〉0．05）;观察组临床总有效率为86．7％,对照组总有效率为66．7％,观察组临床效果显著优于对照组（P〈0．05）,差异具有统计学意义。结论：天麻钩藤饮联合美多巴治疗帕金森临床疗效显著,可明显改善患者睡眠质量,值得临床推广应用。     

天麻糖复合物对大鼠缺血/再灌注模型视网膜的影响

目的观察天麻糖复合物(polysaccharides from Gastro-d ia elata B lum e,GEP)对大鼠视网膜缺血/再灌注(retinal is-chem ia reperfusion,R IR)后视网膜超氧化物歧化酶(superox-ide d ismutase,SOD)、丙二醛(m alond ialdehyde,MDA)、一氧化氮(n itric oxide,NO)含量及视网膜形态的影响。方法采用前房灌注液体形成16 kPa高眼压而建立R IR模型。SD大鼠随机分为:GEP小剂量组、中剂量组、大剂量组、维生素E组、阴性对照组,缺血60 m in后恢复血流,分别于再灌注60 m in,24 h和72 h检测视网膜组织中MDA(比色法),SOD(比色法)、NO(硝酸还原酶法)含量及视网膜光学显微镜的组织学观察。结果GEP干预后,再灌注60 m in,24 h和72h后中、大剂量干预组视网膜中MDA含量均明显低于阴性对照组(P<0.05);SOD含量均明显高于阴性对照组(P<0.05);NO含量在再灌注24~72 h时间段内明显低于阴性对照组(P<0.05),GEP干预组视网膜组织形态学损害较阴性对照组明显减轻。结论GEP对缺血/再灌注的视网膜具有保护作用。     

天麻3个不同变型遗传关系的SRAP分析

目的 从分子水平上分析对比天麻的3个不同变型,探索其种内变异,为资源保护和良种选育奠定基础.方法 采用SRAP分子标记分析天麻3个不同变型的遗传关系.结果 筛选出7对SRAP引物,用PCR扩增11批天麻样品,得到145条清晰的带,其中110条具有多态性,多态百分率为75.86％;通过Nei&Li遗传相似系数(GS)计算,11批天麻的种质两两间的相似系数分布在0.36 ～ 0.93;UPGMA聚类分析将乌天麻聚为一类,红天麻与绿天麻聚为一类.结论 天麻的3个不同变型中,绿天麻和红天麻的亲缘关系较近,而乌天麻与前两者的遗传差异较大,亲缘关系较远.     

天麻粉水浸出物抑制油酸诱导的HL-7702细胞三酰甘油蓄积的实验研究

目的：研究天麻粉水浸出物抑制油酸(OA)诱导的HL-7702细胞三酰甘油(TG)蓄积的作用及相关细胞信号通路。方法以1 mmol/L的OA诱导细胞脂肪变性,同时加入不同浓度的天麻粉水浸出物共同孵育24 h后测定细胞内TG含量。在Western blot实验中,细胞以天麻粉水浸出物做相应处理后检测AMP活化蛋白激酶α(AMPKα)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的磷酸化水平。在使用compound C的实验中,细胞以10μmol/L的compound C预处理30 min,然后加入天麻粉水浸出物,共同孵育8 h后进行Western blot实验;或加入OA+天麻粉水浸出物,共同孵育24 h后测定细胞内TG含量。结果 OA孵育24 h后,HL-7702细胞内TG含量较对照细胞升高<(4.0±0.5)倍(P<0.01),天麻粉水浸出物使细胞内TG呈剂量依赖性降低。天麻粉水浸出物处理后能剂量和时间依赖性地激活HL-7702细胞的AMPK信号通路,表现为磷酸化AMPKα(p-AMPKα)和磷酸化ACC(p-ACC)的水平显著增加。 compound C预处理并与天麻粉水浸出物共同孵育后能完全阻断后者对AMPK通路的激活作用以及减少细胞内TG的药效。结论天麻粉水浸出物能显著抑制OA诱导的HL-7702细胞三酰甘油蓄积,此作用依赖于细胞内AMPK通路的激活。