全文获取类型
收费全文 | 1010篇 |
免费 | 86篇 |
国内免费 | 55篇 |
专业分类
耳鼻咽喉 | 4篇 |
儿科学 | 6篇 |
妇产科学 | 22篇 |
基础医学 | 169篇 |
口腔科学 | 4篇 |
临床医学 | 53篇 |
内科学 | 90篇 |
皮肤病学 | 7篇 |
神经病学 | 26篇 |
特种医学 | 12篇 |
外科学 | 64篇 |
综合类 | 156篇 |
预防医学 | 15篇 |
眼科学 | 4篇 |
药学 | 137篇 |
中国医学 | 10篇 |
肿瘤学 | 372篇 |
出版年
2024年 | 1篇 |
2023年 | 6篇 |
2022年 | 5篇 |
2021年 | 14篇 |
2020年 | 5篇 |
2019年 | 12篇 |
2018年 | 16篇 |
2017年 | 15篇 |
2016年 | 24篇 |
2015年 | 34篇 |
2014年 | 57篇 |
2013年 | 85篇 |
2012年 | 61篇 |
2011年 | 103篇 |
2010年 | 94篇 |
2009年 | 93篇 |
2008年 | 96篇 |
2007年 | 84篇 |
2006年 | 94篇 |
2005年 | 84篇 |
2004年 | 46篇 |
2003年 | 63篇 |
2002年 | 25篇 |
2001年 | 17篇 |
2000年 | 9篇 |
1999年 | 2篇 |
1998年 | 4篇 |
1997年 | 1篇 |
1996年 | 1篇 |
排序方式: 共有1151条查询结果,搜索用时 15 毫秒
941.
目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对膀胱癌细胞的抑制作用。方法构建TRAIL融合增强绿色荧光蛋白(EGFP)真核表达载体,脂质体法转染膀胱癌细胞株玎细胞。荧光显微镜下计算转染率。分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测TRAIL的表达。采用流式细胞仪检测细胞凋亡,噻唑蓝(MTT)法、细胞倍增时间和集落形成率观察TRAIL的抑制作用。结果48h观察重组载体转染率为38.4%,空载体转染率为35.3%(P〉0.05).RT-PCR和Western blot证实转染后EJ细胞中TRAIL的表达明显增加;凋亡率明显高于转染空白载体和未转染组(P〈0.01);EJ细胞增殖受到明显抑制(P〈0.01)。结论TRAIL具有诱导膀胱癌细胞凋亡、抑制增殖的作用,有望成为治疗膀胱癌的新方法。 相似文献
942.
目的:构建重组质粒pDsRed1-C1-TRAIL并鉴定,为下一步利用纳米载体介导FL基因移植作用于结肠癌细胞的体内实验奠定基础。方法:应用基因合成和克隆技术构建重组质粒pDsRed1-C1-TRAIL,并进行酶切鉴定及序列测定,以检测其核苷酸序列与设计是否完全一致。结果:重组质粒pDsRed1-C1-TRAIL经酶切鉴定分析,琼脂糖凝胶电泳鉴定可见清晰地切出与TRAIL基因大小相符的片段并与DNA marker相符,同时进行序列测定,证实其核苷酸序列与设计完全一致。结论:成功构建重组质粒pDsRed1-C1-TRAIL并得到正确鉴定,为下一步结肠癌的基因治疗打下实验基础。 相似文献
943.
Amriti R Lulla Yan Zhou Marie D Ralff Avital Lev David T Dicker Wafik S El-Deiry 《American journal of cancer research》2022,12(1):315
TRAIL-based therapies are of significant clinical interest because of its unique ability to induce apoptosis in cancer cells while sparing normal and untransformed cells. This selective antitumor potential of the TRAIL pathway has been harnessed by development of therapeutics including recombinant (rh)TRAIL and TRAIL-receptor agonist antibodies such as mapatumumab and lexatumumab. While these TRAIL-based therapies have proven successful in preclinical studies and safe in early phase clinical trials, the limited serum half-life has been a hurdle for further clinical development. Here we characterize miR-3132, a novel and first-in class TRAIL-inducing miRNA with potent anti-proliferative and pro-apoptotic effects in cancer cell lines. Initial mechanistic studies indicate that miR-3132 engages the interferon signaling pathway to induce TRAIL and subsequent TRAIL-dependent apoptosis in cancer cell lines. Our data further suggests that the binding of miR-3132 to toll-like receptors could be the upstream pathway for the interferon response. The current study the first report to demonstrate miR-3132’s in vitro efficacy and preliminary mechanism of action in cancer cell lines. 相似文献
944.
泛肽-蛋白酶体对TRAIL诱导凋亡作用的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
杨新文 《中南大学学报(医学版)》2004,29(1):54-57
目的:探讨泛肽-蛋白酶体对TRAIL诱导细胞凋亡作用的影响。方法:对四种不同处理组(PBS;anti-DR5;lactacystin和anti-DR5加lactacystin)的RSAF细胞及SCID小鼠滑囊细胞分别用Hoechst 33342染色和TUNEL染色后,检测其细胞凋亡率。用Hoechst染色和Luminescent ATP Lite法定量分析Caspase抑制剂对细胞凋亡的影响。结果:Lactacystin阻断泛肽-蛋白酶体通路后,Anti-DR5与TRAILR2 结合后能诱导95%以上的RASF细胞出现凋亡。而分别用anti-DR5抗体和lactacystin单独处理的细胞却没有观察到这种现象。结论:泛肽-蛋白酶体通路参与了对TRAIL 诱导的细胞凋亡的调节。而Caspase 8 和Caspase 4的激活在泛肽-蛋白酶体参与TRAIL的凋亡信号传导调节中是必需的。 相似文献
945.
目的:为实现高表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)治疗前列腺癌,通过分子生物学技术构建TRAIL基因的真核表达质粒。方法:采用RT-PCR技术,从HL-60、Jurkat细胞mRNA中扩增出人类TRAIL基因序列,利用基因工程技术将其插入到真核表达载体pLXIN中获得重组质粒pLXIN-TRAIL,并进行酶切鉴定和DNA序列分析。结果:RT-PCR获得预期的扩增产物TRAIL884bp基因片段,成功构建pLXIN-TRAIL重组质粒,酶切鉴定及测序结果与预期相符。结论:重组克隆载体pLXIN-TRAIL构建成功。 相似文献
946.
目的 研究NCTD和IFN-γ对T细胞Jurkat TRAIL 表达的影响.方法 培养Jurkat,用不同浓度的IFN-γ和NCTD处理细胞,流式细胞术分析细胞表面TRAIL表达和细胞内活性氧水平.结果 IFN-γ以浓度依赖的方式上调Jurkat细胞TRAIL表达,而NCTD可增强IFN-γ对TRAIL的上调效应;NCTD可增加细胞内活性氧的表达.结论 NCTD可能通过活性氧调节的信号途径协同IFN-γ增强TRAIL的表达. 相似文献
947.
目的:探讨RNAi靶向沉默NF-κB基因对TRAIL诱导肺癌细胞凋亡的影响.方法:使用NF-κB p65 siRNA转染肺癌A549细胞48 h,实验分为空白对照、脂质体对照以及干扰实验3组.采用RT-PCR法测定肺癌A549细胞内NF-κB p65 mRNA的表达,MTT法检测siRNA转染前后TRAIL对A549细胞生长抑制作用的变化.结果:与空白对照和脂质体对照组相比,siRNA组具有明显抑制肺癌A549细胞NF-κB p65mRNA表达的作用(P<0.01).MTT实验表明,转染siRNA后TRAIL对A549细胞的生长抑制作用明显增强,但在同一浓度,转染NF-κB p65 siRNA的细胞与未转染组相比,细胞增殖活性明显下降(P<0.05).结论:应用RNAi技术可有效干扰NF-κB p65的表达,抑制肺癌A549细胞的增殖,并可增加肺癌细胞对TRAIL的敏感性. 相似文献
948.
目的研究建立实时荧光定量(RFQ)-PCR法测定TRAIL mRNA含量的方法,探讨其在隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中表达的检测价值,并分析隐球菌性脑膜炎患者免疫指标与TRAIL的相关性。方法设计特异性的引物和探针,以人基因GAPDH为内参照,用实时定量PCR的方法检测35例健康人和35例隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中TRAIL mRNA的表达水平,采用特定蛋白分析仪测定IgG、IgA、IgM、C3、C4。结果与健康人比较,隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中TRAIL mRNA的表达明显下降(P〈0.01)。隐脑患者血清中的C3和IgG显著下降(P〈0.01),且与TRAIL的变化成正相关。结论隐球菌性脑膜炎患者TRAIL下降,提示TRAIL可能参与隐球菌性脑膜炎的疾病进程,这为有效治疗隐球菌性脑膜炎提供了新的线索。 相似文献
949.
抗人DR5单克隆抗体(mDRA-6)对Jurkat细胞作用研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:观察抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的死亡受体5(DR5)单克隆抗体—mDRA-6对Jurkat细胞的凋亡作用。方法:制备抗人DR5单抗-mDRA-6;检测Jurkat细胞表面DR5表达率;荧光显微镜下观察mDRA-6作用下Jurkat细胞形态变化;MTT法计算mDRA-6对Jurkat细胞存活的影响;FITC-AnnexinⅤ及PI双染流式细胞仪检测mDRA-6对Jurkat细胞凋亡率影响;琼脂糖凝胶电泳检测mDRA-6对Jurkat细胞DNA片段化的作用。结果:Jurkat细胞表面DR5表达率为94.8%;mDRA-6使Jurkat细胞染色质边集、断裂,细胞出芽,凋亡小体形成;MTT法显示mDRA-6具有明显的Jurkat细胞杀伤作用,1.563 mg/L的mDRA-6可使Jurkat细胞死亡60.50%;AnnexinⅤ及PI双染显示0.3mg/L的mDRA-6作用10 h,Jurkat细胞凋亡率达43.22%;10 mg/L mDRA-6作用HL-60细胞3h,DNA琼脂糖凝胶电泳显示明显的“梯形”条带。结论:抗DR5单抗-mDRA-6能够诱导Jurkat细胞凋亡。 相似文献
950.