The physical state of lipid nanoparticles influences their effect on in vitro cell viability

Although lipid nanoparticles represent potent drug carriers, for many formulations toxicity data are rare. Thus, in this study, the effect of different lipid nanoparticles on the cell viability of L929 mouse fibroblasts was systematically investigated using the MTT assay. The formulations were composed of trimyristin, tristearin or cholesteryl myristate stabilized with poloxamer 188, polysorbate 80, polyvinyl alcohol or a blend of soybean phospholipid and sodium glycocholate. Depending on lipid and storage conditions, the nanoparticles were prepared in different physical states or crystal modifications leading to different particle shapes. The cell viability was influenced considerably by the physical state of the particle matrix with crystalline nanoparticles causing a stronger decrease in viability than the corresponding liquid or liquid crystalline particles. Effects on the cell viability were also related to the type of matrix lipid, stabilizer and the particle shape. However, the effects of differently shaped particles of different polymorphic modifications of crystalline tristearin were comparable. The low viability caused by poloxamer 188-stabilized particles could be correlated with a strong cell uptake which was investigated by confocal laser scanning microscopy.     

PI3K/Akt信号通路对胃癌细胞SGC7901细胞化疗效果的影响

目的运用磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂(phosphatidylinositol 3-kinases,PI3-K)LY294002[2-(4-吗啉基)-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4-酮]作用于胃癌细胞系SGC7901,探讨抑制PI3K/Akt信号转导通路对胃癌细胞化疗敏感性的影响。方法采用MTT比色法,流式细胞术检测5-FU、DDP及ADM单独或联合PI3K抑制剂LY294002对人胃癌细胞SGC7901的抑制率、凋亡率。并分析单独及联合应用LY294002对SGC7901细胞周期的影响。Western-blot检测单独及联合化疗药后P-Akt蛋白在SGC7901细胞中的表达水平。结果单独使用化疗药5-FU、DDP及ADM均可抑制SGC7901细胞增殖、诱导其凋亡。当化疗药与抑制剂联合应用,对细胞的抑制作用明显增强,促凋亡作用增强,与对照组比较(P0.05)。细胞周期同步分析显示,单独用药均可将SGC7901细胞阻滞于G0/G1期。联合使用抑制剂使处于G0/G1期细胞增加。Western blot显示化疗药上调P-Akt蛋白的表达,联合使用抑制剂后SGC7901细胞P-Akt蛋白的表达与未使用抑制剂比较减弱,差异有统计学意义(P0.05)。结论阻断PI3K/Akt信号通路可提高化疗药5-FU、DDP及ADM对胃癌细胞株SGC7901的抑制率,凋亡率并使阻滞于G0/G1期细胞增多;LY294002通过阻断PI3K/Akt信号通路,抑制P-Akt蛋白表达,增强化疗药的敏感性;LY294002阻断PI3K/Akt信号通路对5-FU、DDP、ADM治疗胃癌有一定的协同或增强作用。     

三氧化二砷(As2O3)诱导人胃腺癌SGC7901细胞程序化死亡并降低c-myc基因的表达

目的：探讨As₂O₃对胃腺癌SGC7901细胞系的生物学效应及机制。方法：通过MTT还原法检测As₂O₃对该细胞系存活率的影响,从光学显微镜形态观察,流式细胞仪分析,DNA凝胶电泳,细胞凋亡原位检测(TUNEL)进行细胞凋亡的检测。半定量RT-PCR检测基因表达。结果：As₂O₃处理SGC7901细胞后,细胞的存活率明显降低,光学显微镜下可见到明显的凋亡细胞,流式细胞仪测定细胞周期的G1期前有亚2倍体的凋亡峰,DNA凝胶电泳显示出典型的凋亡特征:　DNA有规律断裂形成的梯状图谱,细胞凋亡原位检测发现DNA的断裂,并降低细胞c-myc基因的表达。结论：As₂O₃能诱导人胃腺癌SGC7901细胞程序化死亡并可能通过降低c-myc基因的表达。     

京尼平对胃癌SGC 7901细胞体外增殖、侵袭能力和凋亡的影响及其机制

目的：探讨京尼平（GP）对胃癌SGC 7901细胞的调控作用,并阐明其作用机制点。方法：取对数生长期的SGC 7901细胞,分为对照组和不同浓度（5、10、和20 mg·L^-1）GP组,采用MTT法检测不同时间点（24、48和72 h）SGC 7901细胞体外增殖抑制率,应用Transwell小室细胞侵袭实验检测SGC 7901细胞体外侵袭能力,应用Western blotting法检测SGC 7901细胞中Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白表达水平。结果：MTT法检测,与对照组比较,作用不同时间后不同浓度GP组SGC 7901细胞增殖抑制率明显升高（P<0.05）;Transwell小室细胞侵袭实验,与对照组比较,作用72h后,10和20 mg·L^-1GP组穿膜细胞数明显降低（P<0.01）;Western blotting法检测,与对照组比较,作用72 h后,20 mg·L^-1GP组SGC 7901细胞中Bcl-2蛋白表达水平降低（P<0.01）,caspase-3和Bax蛋白表达水平升高（P<0.05）。结论：GP能够抑制SGC 7901细胞的体外增殖和侵袭能力,且能够诱导细胞凋亡,其机制可能与调节Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白表达有关。     

Preparation of monoclonal antibody to sulfatoxygalactosylglycerolipid by in vitro immunization with a glycolipid-glass conjugate

A monoclonal antibody to the testicular sulfatoxygalactosylglycerolipid has been raised following in vitro stimulation of lymphocytes with glycolipid immobilized on glass beads by means of a photoactivatable heterobifunctional crosslinking agent. The antibody can distinguish between glycerol and sphingosine-based sulfoglycolipids.     

维胺酸对人胃癌细胞SGC─7901的分化诱导作用

应用图象分析、聚丙烯酰胺凝胶同工酶电泳、放免、伴刀豆球蛋白凝集反应等，观察了维胺酸对人胃癌细胞系ＳＧＣ－７９０１的分化诱导作用。结果发现，一定剂量的维胺酸对细胞的生长、增殖有抑制作用，使细胞内ＤＮＡ平均含量下降，核面积变小，ＬＤＨ同工酶谱发生变化，Ｈ型亚基升高，Ｍ型亚基降低，细胞ＣＥＡ分泌量和ＣｏｎＡ凝集反应均显著下降。光镜下，细胞铺展较好，排列较有序，叠堆生长少见，细胞质嗜碱性降低。以上结果说明，维胺酸对细胞形态以及生理、生化等方面均有影响，并产生一定的分化诱导作用     

乌骨藤总苷对SGC-7901、S_(180)、P_(388)肿瘤细胞的抑制作用研究

目的研究乌骨藤总苷对人胃癌细胞SGC-7901、肉瘤S180、淋巴白血病细胞P388的抑制作用。方法采用MTT比色法观察乌骨藤总苷对人胃癌细胞SGC-7901体外生长的影响;采用瘤体移植法将BALB/c裸鼠接种人胃癌细胞SGC-7901,通过计算肿瘤抑制率评价乌骨藤总苷对人胃癌细胞SGC-7901体内肿瘤生长抑制作用;采用腋窝皮下接种将昆明小鼠接种肉瘤S180,通过计算抑瘤率评价乌骨藤总苷对肉瘤S180体内肿瘤生长抑制作用;DBA/2小鼠腹腔接种淋巴白血病细胞P388,通过计算生命延长率评价乌骨藤总苷对淋巴白血病细胞P388体内生长抑制作用。结果乌骨藤总苷对人胃癌细胞SGC-7901有显著的体外抑制作用,并能显著抑制小鼠人胃癌细胞SGC-7901、小鼠移植S180、小鼠移植P388肿瘤生长。结论乌骨藤总苷具有一定抗癌活性,有望开发成抗癌的中药有效部位新药。     

生长抑素对胃癌SGC-7901细胞VEGF、NF_κB表达的影响

目的研究生长抑素对胃癌SGC-7901细胞血管内皮生长因子（VEGF）、核转录因子-κB（NFκB）表达的影响。方法不同浓度生长抑素处理SGC-7901。MTT法测量吸光度值,计算细胞生长抑制率;免疫细胞化学（SP）法检测VEGF、NFκB蛋白表达的变化;RT-PCR半定量检测VEGF、NFκB mRNA表达水平。结果实验组与对照组比较,细胞生长抑制率有明显差异（P〈0.05）,同一实验组不同时间点（24、48、72h）间比较,细胞生长抑制率也有明显差异（P〈0.05）,表明生长抑素对SGC-7901细胞生长抑制作用有剂量时间依赖性;不同浓度生长抑素处理48h后,SGC-7901细胞VEGF、NFκB蛋白表达下降,实验组与对照组比较有明显差异（P〈0.05）;mRNA的表达呈浓度依赖性降低,实验组与对照组比较有明显差异（P〈0.05）。结论生长抑素能下调胃癌SGC-7901细胞VEGF、NFκB表达,抑制胃癌细胞增殖。     

rAd-p53联合顺铂对胃癌细胞生长及 KAI1／CD82蛋白表达的影响

目的：观察rAd-p53、顺铂（ DDP）单独及联合作用于人胃癌SGC7901细胞后,对肿瘤细胞增殖凋亡情况、KAI1／CD82蛋白表达情况的影响。方法 rAd-p53、DDP单独及联合作用于胃癌SGC7901细胞株24、48、72 h后,CCK-8法测定SGC7901细胞体外增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫组化法检测KAI1／CD82蛋白表达情况。结果rAd-p53、DDP单独及联合作用于SGC7901细胞后,细胞增殖被抑制,并呈剂量和时间依赖性,且两药联合组细胞增殖抑制率明显高于单用组,与阴性对照组相比差异均有统计学意义（ P＜0．05）;rAd-p53、DDP单独及两药联合作用SGC7901细胞48h后,细胞凋亡率为36．94％±0．78％、28．79％±2．37％,69．26％±0．63％;rAd-p53、DDP单独及两药联合均可上调KAI1／CD82蛋白表达,且两药联合组更明显。结论 rAd-p53、DDP单独及两药联合均可抑制胃癌SGC7901细胞的生长,诱导其凋亡,二者联合对胃癌细胞的抑制作用增强,rAd-p53可能通过上调KAI1／CD82的表达诱导SGC7901细胞凋亡,同时增强DDP的抗肿瘤作用。     

苦参碱抑制胃癌细胞株SGC7901增殖的实验研究

目的探讨苦参碱作用人胃癌细胞株SGC7901后,对细胞增殖的影响。方法应用不同浓度苦参碱（1.5mg/ml、0.75mg/ml、0.375mg/ml、0.1875mg/ml）作用体外培养人胃癌细胞株SGC7901后,分别用倒置显微镜观察细胞形态学改变;MTT法检测苦参碱对SGC7901细胞的增殖抑制作用。结果不同浓度苦参碱作用人胃癌细胞株SGC7901后,与对照组比较细胞生长明显受到抑制（P〈0.05）,抑制率从18.7%到86.4%。随着苦参碱浓度的增加及时间的延长,SGC7901存活细胞显著减少,呈明显的时间-剂量依赖性。结论苦参碱能显著抑制人胃癌细胞株SGC7901细胞增殖。