黄芩素对人胆囊癌细胞系SGC996细胞活力及ZFX蛋白表达的干预作用

目的：探讨中药黄芩提取物黄芩素对人胆囊癌的生物效应及机制。方法：将人胆囊癌细胞系SGC996用黄芩素处理48小时,采用MTT法检测治疗后SGC996的细胞活力;通过对透过transwell膜的SGC996细胞进行计数评估黄芩素对胆囊癌侵袭转移能力的影响;通过流式细胞术检测黄芩素处理后,SGC996细胞的凋亡情况并用western blot方法检测细胞锌指X染色体蛋白(zinc finger X-chromosomal protein,ZFX)的表达;结果：对照组,10μmol/L黄芩素组,20μmol/L黄芩素组,40μmol/L黄芩素组,80μmol/L黄芩素组,160μmol/L黄芩素组,320μmol/L黄芩素组对SGC996细胞活力的抑制率分别为0,0.4±0.9,4.2±1.5,19.3±3.8,37.9±5.8,61.6±7.8,84.2±10.2 (p<0.05)。对照组,40μmol/L黄芩素组,80μmol/L黄芩素组,160μmol/L黄芩素组对SGC996细胞的凋亡诱导率分别为0.5±0.5,7.5±1.2,16.3±1.9,31.2±2.8 (p<0.05);对SGC996细胞转移抑制率分别为0,25.6±6.6,57.3±7.9,84.1±11.9 (p<0.05)。Western blot结果显示黄芩素对ZFX有显著的抑制作用。结论： 黄芩素有良好的抗神经胆囊癌的生物活性,其抗肿瘤效应的机制可能和下调ZFX蛋白有关。     

绒毛膜促性腺激素对人胃腺癌细胞胞浆信号传递的影响

目的　胃癌可异位分泌绒毛膜促性腺激素 (hCG) ,且与胃癌的恶性程度及转移有关。探讨hCG对人胃腺癌细胞胞浆信号传递的影响。方法　分别用非同位素检测试剂盒、蛇毒磷酸二酯酶法、3 H cAMP放射免疫法 ,观察hCG对胃腺癌SGC 790 1细胞胞浆内蛋白激酶 (PKC)、钙调素 (CaM )活性及cAMP含量的影响情况。结果　hCG对胞浆PKC活性仅有轻微的刺激作用 ,即当hCG的浓度达10 -6mol/L时 ,细胞内PKC活性与对照相比仅增加了 2倍左右 ;hCG可明显使胞浆内cAMP含量及CaM活性增加 ,当hCG的浓度从 10 -11mol/L增加到 10 -6mol/L时 ,胞内cAMP的水平从 (2 .1± 0 .2 5 )pmol/mg蛋白增至 (9.5 2± 0 .6 4 ) pmol/mg蛋白 (P <0 .0 1) ,而CaM含量由 (11.2± 2 .7)μg/mg蛋白增加到 (2 9.3± 3.4 2 ) μg/mg蛋白 (P <0 .0 1) ,与对照组比较差异均有显著性 (P <0 .0 1)。 结论　hCG作用于胃腺癌细胞后可能主要通过激活腺苷酸环化酶 (AC) /cAMP信号传递途径而起作用 ,同时Ca2 + /CaM可能亦参与了其信号传递机制。     

RASSF1A基因对胃癌SGC7901细胞蛋白表达谱的影响

目的探讨RASSF1A基因对胃癌SGC7901细胞蛋白表达谱的影响。方法建立SGC7901和RASSF1A-SGC7901细胞双向凝胶电泳图谱,筛选和鉴定部分分离较好的差异蛋白质点。RT-PCR验证差异基因mRNA的表达。结果建立了分辨率较高、重复性较好的RASSF1A-SGC7901细胞和SGC7901细胞的二维凝胶电泳图谱。筛选出8个差异蛋白质点,包括galectin-1,TRP-14,ACBP,PSMB5,PSMB4,TIM,vimentin及CD79α。RASSF1A过表达诱导了胃癌细胞SGC7901的galectin-1、TRP-14、ABCP的mRNA表达上调。结论 galectin-1,TRP-14及ABCP可能参与了RASSF1A抑制胃癌细胞SGC7901的生长。     

Satellite glial cells in sympathetic and parasympathetic ganglia: In search of function

Glial cells are established as essential for many functions of the central nervous system, and this seems to hold also for glial cells in the peripheral nervous system. The main type of glial cells in most types of peripheral ganglia - sensory, sympathetic, and parasympathetic - is satellite glial cells (SGCs). These cells usually form envelopes around single neurons, which create a distinct functional unit consisting of a neuron and its attending SGCs. This review presents the knowledge on the morphology of SGCs in sympathetic and parasympathetic ganglia, and the (limited) available information on their physiology and pharmacology. It appears that SGCs carry receptors for ATP and can thus respond to the release of this neurotransmitter by the neurons. There is evidence that SGCs have an uptake mechanism for GABA, and possibly other neurotransmitters, which enables them to control the neuronal microenvironment. Damage to post- or preganglionic nerve fibers influences both the ganglionic neurons and the SGCs. One major consequence of postganglionic nerve section is the detachment of preganglionic nerve terminals, resulting in decline of synaptic transmission. It appears that, at least in sympathetic ganglia, SGCs participate in the detachment process, and possibly in the subsequent recovery of the synaptic connections. Unlike sensory neurons, neurons in autonomic ganglia receive synaptic inputs, and SGCs are in very close contact with synaptic boutons. This places the SGCs in a position to influence synaptic transmission and information processing in autonomic ganglia, but this topic requires much further work.     

反义Survivin核酸对荷瘤裸鼠放疗敏感性影响的初步研究

目的 探讨反义Survivin核酸(anti-pcDNA3-svv)对荷瘤裸鼠放疗敏感性的影响.方法 采用电转染法转染胃癌细胞系SGC7901,观察转染组(SGC7901-SVVanti)和未转染组(SGC7901)在体内(裸鼠)和体外(细胞水平)对放射线敏感性的不同;采用免疫组化SP法对比转染组和未转染组裸鼠肿瘤中Survivin蛋白表达的不同.结果 SGC7901-SVVanti组细胞随着照射剂量的升高,细胞存活率明显低于SGC7901组,其IC50分别为(718.7±1.6)cGY和(1654.1 ±1.2)cGY,差异具有统计学意义(P＜0.05);相同剂量的X线照射裸鼠后,SGC7901-SVVanti组裸鼠的肿瘤缩减率明显高于SGC7901组裸鼠,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 Survivin反义核酸可以在体内、外水平增加荷胃癌细胞裸鼠对放射线的敏感性;抑制Survivin蛋白在裸鼠肿瘤中的表达.     

HIF-1α在RAD001联合DDP下调胃癌SGC7901/DDP细胞株VEGF分泌中的作用

目的 研究缺氧诱导因子（HIF-1α）在mTOR特异性抑制剂RAD001联合DDP下调胃癌细胞株SGC7901/DDP VEGF表达中的作用,并探讨其相关作用机制.方法 体外培养胃癌SGC7901/DDP细胞株,分别给予RAD001、DDP及RAD001＋DDP干预48 h后,免疫细胞化学染色及Western-blot法检测HIF-1α、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白的表达情况,RT-PCR法检测HIF-1α mRNA、VEGF mRNA的合成情况.结果 RAD001单独作用于SGC7901/DDP细胞48 h后,HIF-1α、VEGF蛋白的表达和HIF-1α 、VEGF mRNA的合成下降,且呈剂量依赖性.联合用药组比单独用药组作用增强,差异有统计学意义（P〈0.05）.VEGF和HIF-1α蛋白呈正相关（r=0.993,P〈0.01）,HIF-1α mRNA和VEGF mRNA呈正相关（r=0.994,P〈0.01）.结论 RAD001能够抑制细胞体外VEGF、HIF-1α的蛋白表达及mRNA的合成,RAD001联合DDP作用后,效果增强,其机制可能与mTOR/HIF-1α/VEGF信号通路有关.     

神经酰胺促胃癌SGC7901细胞凋亡的实验

目的探讨神经酰胺(Ceramide,Cer)对胃癌SGC7901细胞的促凋亡作用及可能作用机制。方法体外培养人胃癌SGC7901细胞,分别给予Cer、顺铂（DDP）;DDP联合Cer作用后,MTT检测单独使用Cer及联合DDP应用对SGC7901细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫组织化学染色、Western blot 检测SGC7901细胞NF-κB、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果Cer 2.5 μmol/L及以上时可以抑制细胞增殖,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。Cer联合DDP后,联合用药作用强于单独DDP及Cer组(P<0.05),q值在24、48、72 h分别为1.05、1.01、0.99。Cer、DDP作用48h可诱导SGC7901细胞凋亡,Cer 5 μmol/L、DDP 2.5 mg/L单独用药组及Cer 5 μmol/L 联合DDP 2.5 mg/L组凋亡率分别为：（39.23±1.62）%、（4727±113）%、（50.13±2.76）%,与对照组［（1846±1.64）%］相比差异有统计学意义（P<0.05）,联合用药作用强于单独DDP及Cer组(P<0.05)。NF-κB、Bcl-2在SGC7901细胞中较高表达［（74.10±2.69）%、（69.37±4.54）%］,Bax在SGC7901细胞中表达较低［（2460±373）%］,Cer 5 μmol/L、DDP 25 mg/L单独用药组及Cer 5 μmol/L 联合DDP 2.5 mg/L组NF-κB、Bcl-2阳性表达率降低(65.13±1.71、 62.17±2.12, 44.8±3.65;57.70±2.22、55.13±5.77、37.67±2.14),Bax表达率上调(33.80±1.10、35.50±2.27、51.73±3.76),Bcl-2/Bax 比值降低(1.71±0.10、1.56±0.26、0.73±0.09),与对照组相比差别有统计学意义（P<0.05）,联合用药作用强于单独DDP及Cer组(P<0.05)。相关性分析显示NF-κB与Bcl-2呈正相关（Spearman^,s rho =0.9510,Prob>|t|=0.0000）。结论Cer通过下调NF-κB进而调节Bcl-2/Bax比值诱导SGC7901细胞凋亡。     

玉米须提取物ESM对K562和SGC细胞的作用

从玉米须中得到乙醇提取物ＥＳＭ，采用人肿瘤细胞株体外排染试验研究ＥＳＭ的抗癌作用。结果表明：给药组（ＥＳＭ）人白血病细胞及胃癌细胞的体外存活率均较对照组明显下降（Ｐ＜０．００１），其中ＥＳＭ对人白血病细胞Ｋ５６２的体外抑制率为６３．３％；对人胃癌细胞ＳＧＣ的体外抑制率为９０．７％。提示玉米须有一定的抗癌作用。     

三氧化二砷(As_2O_3)诱导人胃腺癌SGC7901细胞程序化死亡并降低c-myc基因的表达

目的：探讨Ａｓ２Ｏ３对胃腺癌ＳＧＣ７９０１细胞系的生物学效应及机制。方法：通过ＭＴＴ还原法检测Ａｓ２Ｏ３对该细胞系存活率的影响,从光学显微镜形态观察,流式细胞仪分析,ＤＮＡ凝胶电泳,细胞凋亡原位检测（ＴＵＮＥＬ）进行细胞凋亡的检测。半定量ＲＴＰＣＲ检测基因表达。结果：Ａｓ２Ｏ３处理ＳＧＣ７９０１细胞后,细胞的存活率明显降低,光学显微镜下可见到明显的凋亡细胞,流式细胞仪测定细胞周期的Ｇ１期前有亚２倍体的凋亡峰,ＤＮＡ凝胶电泳显示出典型的凋亡特征：ＤＮＡ有规律断裂形成的梯状图谱,细胞凋亡原位检测发现ＤＮＡ的断裂,并降低细胞ｃｍｙｃ基因的表达。结论：Ａｓ２Ｏ３能诱导人胃腺癌ＳＧＣ７９０１细胞程序化死亡并可能通过降低ｃｍｙｃ基因的表达。     

人反义端粒酶RNA转染SGC-7901细胞后细胞周期调控基因表达的改变

目的：观察反义人端粒酶RNA(Human telomerase RNA components,hTR)转染的SGC－7901胃癌细胞（7901－ahTR)细胞周期调控基因表达的变化。方法 采用RT－PCR、Western印迹和免疫组化方法检测SGC－7901和7901－ahTR细胞p21、p27、p16、c-myc等基因mRNA和蛋白的表达。结果 反义hTR转染的7901细胞p21和p27表达增加,PCNA和c-myc表达下调,而cyclinD1和p16mRNA表达无明显变化。结论 抑制端粒酶活性能调节多种细胞周期调控基因的表达,从而抑制肿瘤细胞的增殖和诱导分化。