全文获取类型
收费全文 | 486篇 |
免费 | 145篇 |
国内免费 | 69篇 |
专业分类
耳鼻咽喉 | 2篇 |
妇产科学 | 2篇 |
基础医学 | 64篇 |
口腔科学 | 2篇 |
临床医学 | 25篇 |
内科学 | 61篇 |
皮肤病学 | 2篇 |
神经病学 | 4篇 |
特种医学 | 7篇 |
外国民族医学 | 2篇 |
外科学 | 9篇 |
综合类 | 170篇 |
预防医学 | 88篇 |
药学 | 70篇 |
中国医学 | 83篇 |
肿瘤学 | 109篇 |
出版年
2024年 | 1篇 |
2023年 | 1篇 |
2022年 | 7篇 |
2021年 | 16篇 |
2020年 | 62篇 |
2019年 | 9篇 |
2018年 | 25篇 |
2017年 | 19篇 |
2016年 | 22篇 |
2015年 | 20篇 |
2014年 | 32篇 |
2013年 | 43篇 |
2012年 | 50篇 |
2011年 | 52篇 |
2010年 | 46篇 |
2009年 | 40篇 |
2008年 | 41篇 |
2007年 | 48篇 |
2006年 | 43篇 |
2005年 | 32篇 |
2004年 | 19篇 |
2003年 | 14篇 |
2002年 | 6篇 |
2001年 | 13篇 |
2000年 | 11篇 |
1999年 | 3篇 |
1998年 | 2篇 |
1997年 | 1篇 |
1996年 | 1篇 |
1995年 | 2篇 |
1994年 | 3篇 |
1992年 | 1篇 |
1991年 | 1篇 |
1988年 | 4篇 |
1987年 | 2篇 |
1985年 | 1篇 |
1983年 | 1篇 |
1982年 | 3篇 |
1981年 | 1篇 |
1979年 | 1篇 |
1978年 | 1篇 |
排序方式: 共有700条查询结果,搜索用时 31 毫秒
31.
目的观察β-咔啉类生物碱对体外培养的人胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法不同浓度β-咔啉类生物碱处理人胃癌SGC-7901细胞48 h后,检测细胞增殖、凋亡情况,并以荧光定量聚合酶链反应(RTPCR)和蛋白印迹法(Western blot)分别测定细胞中抑癌基因PTEN、蛋白激酶B(AKT)基因mRNA及其蛋白表达。结果不同浓度的β-咔啉类生物碱均能抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖,其中40μg/m L浓度的抑制效果较其他浓度及5-Fu干预组更显著(P0.01),并可诱导细胞凋亡。不同浓度β-咔啉类生物均可引起PTEN mRNA和蛋白表达增加,AKT mRNA和蛋白表达减少,其中40μg/m L浓度的调节效果较其他浓度及5-Fu干预组更显著(P0.01)。结论β-咔啉类生物碱可抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,诱导凋亡,其作用机制可能是通过上调PTEN及下调AKT蛋白的表达实现。 相似文献
32.
目的研究白花蛇舌草多糖对体外培养人胃癌7901细胞增殖抑制的影响及其作用机理。方法采用MTT法测定不同浓度白花蛇舌草多糖对人胃癌7901细胞增殖的影响;流式细胞技术检测药物作用后的细胞周期和凋亡率;RT-PCR方法检测药物对人胃癌7901细胞P53和Bcl-2基因表达的影响。结果白花蛇舌草多糖能明显抑制人胃癌7901细胞的增殖,其作用48 h的IC50约为116.52 mg·L-1;流式细胞检测显示40 mg·L-1白花蛇舌草多糖联合5.0 mg·L-1顺铂组总凋亡率为69.42%,明显优于顺铂组的50.85%(P〈0.01)和40 mg·L-1白花蛇舌草多糖组的26.41%(P〈0.01);PCR结果显示高、中浓度白花蛇舌草多糖可使人胃癌7901细胞的bcl-2 mRNA表达量降低,P53 mRNA表达量增加。结论白花蛇舌草多糖能明显诱导人胃癌7901细胞的凋亡,与顺铂联合可产生协同作用,其作用机制可能与降低细胞bcl-2和增加P53基因表达量有关。 相似文献
33.
目的 构建含人的肿瘤侵袭和转移的特异性抗原CD44v6编码基因的真核表达的重组载体,进行核苷酸序列分析,并在肿瘤细胞中表达.方法 ①以pBud作为真核表达载体,选择CD44v6编码基因进行RT-PCR扩增,构建重组表达质粒,进行酶切鉴定和测序分析.②在Lipofectamine 2000的介导下,将构建成功的pBud-CD44v6重组表达质粒转染到肿瘤细胞中,通过免疫组织化学方法检测CD44v6的表达.结果 经酶切鉴定和测序分析表明,插入的目的 基因片段为CD44v6的编码基因,长为129 bp,与GenBank中登录的cDNA相比较,同源性高达100%,且方向正确;重组质粒pBud-CD44v6转染对数生长期胃癌细胞株SGC-7901,进行免疫组织化学检测结果显示,与空质粒转染组对比,重组质粒组肿瘤细胞的细胞质中可见大量CD44v6基因编码的表达,其蛋白呈棕黄色,而对照组呈阴性.结论 成功构建了pBud-CD44v6真核表达的重组载体,并在肿瘤细胞中表达. 相似文献
34.
目的:对比脂质体与电穿孔法对 HepG2、SGC7901/ADM 两种细胞的转染效率。方法以 HepG2、SGC7901/ADM细胞为研究对象,采用脂质体法和电穿孔法分别转染pcDNA3.1‐EGFP质粒,流式细胞仪计算细胞存活率,借助绿色荧光标志蛋白eGFP测算转染效率。结果利用脂质体转染eGFP质粒至HepG2细胞所获得的阳性转染率为(20.8±2.1)%,而电穿孔法转染效率增高至(49.6±2.5)%,二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。利用脂质体转染eGFP质粒至SGC7901/ADM细胞所获得的阳性转染率为(25.4±1.3)%,而电穿孔法转染效率增高至(52.6±2.1)%,二者比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论使用电穿孔法能明显提高大片段载体的转染效率。 相似文献
35.
目的研究经RGD修饰的人内皮抑素(endostatin)N-端的30肽对胃癌SGC-7901细胞增殖能力的影响。方法人工合成人内皮抑素1~30位氨基酸(30肽,25~31序列由RGIR GAD改为RGDRGD)所对应的核苷酸序列,连接到质粒pTYB2中,再转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,用WST-1试剂检测30肽对SGC-7901细胞增殖活性的影响。结果 30肽能够有效抑制SGC-7901细胞的增殖,并呈时间剂量依赖性。结论 30肽能有效抑制SGC-7901细胞的增殖,其在临床胃癌的治疗上具有潜在的应用前景。 相似文献
36.
环孢素A、维拉帕米、川芎嗪对胃癌多药耐药细胞株SGC-7901/ADR逆转作用的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨环孢素A(CsA)、维拉帕米(VP)、川芎嗪(TMP)对胃癌多药耐药细胞株SGC-7901/ADR耐药性的逆转作用。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法观察SGC-7901/ADR对化疗药氟尿嘧啶(5-FU)的耐药性,选择CsA、VP、TMP的非细胞毒性剂量,并观察其与5-Fu联合对SGC-7901/ADR的逆转作用。结果:SGC-7901/ADR对化疗药5-FU具有耐药性,相对耐药性(RF)为97.49;CsA3.0mg/L、VP10.0mg/L、TMP300.0mg/L以下为SGC-7901/ADR细胞的非细胞毒性剂量,除CsA外,VP和TMP对SGC-7901/ADR的逆转作用呈剂量依赖关系;300.0mg/L TMP较10.0mg/LVP逆转作用强(P〈0.01),使SGC-7901/ADR相对耐药性降至12.89,将5-FU IC50由13.001mg/L下调到1.542mg/L,逆转倍数是8.43倍。结论:SGC-7901/ADR对5-Fu具有耐药性,300.0mg/L TMP是SGC-7901/ADR细胞多药耐药性最有效的逆转剂。 相似文献
37.
目的:构建以Livin基因为靶基因的siRNA表达载体pGPU6/GFP/Neo/Livin,获得稳定沉默Livin基因的胃癌细胞SGC-7901/siRNA-Livin.方法:化学合成siRNA,Livin寡核苷酸,将其分别克隆进载体pGPU6/GFP/Neo,进行核酸序列测定.脂质体法转染SGC-7901细胞,半定量RT-PCR和Western blot检测Livin基因在SGC-7901细胞中的沉默效率,G418筛选获得稳定转染的细胞克隆.结果:酶切分析显示,所有质粒均为阳性重组载体,核酸测序表明合成的序列准确插入pGPU6/GFP/Neo载体,G418筛选基因转染SGC-7901细胞后形成稳定克隆.其中pGPU6/GFP/Neo/Livin-4转染后Livin mRNA沉默效率大于70%.结论:成功获得Livin特异性siRNA表达载体,SGC-7901细胞Livin基因的表达受到抑制,转染胃癌细胞后获得SGC-7901/siRNA-Livin细胞克隆. 相似文献
38.
Shen Wang Jien Guo Zhenzhou Mo Xiangcheng Shi Chongxiao Qu 《Journal of gastrointestinal oncology.》2022,13(2):581
BackgroundPoor prognosis is common in gastric cancer patients due to multidrug resistance (MDR)-induced recurrence and metastasis. In the present study, we investigated the expression of microRNA (miR)-200c in gastric cancer tissues and cell lines and its relationship with the expression of the drug resistant gene ABCB1, which encodes P-glycoprotein (P-gp).MethodsThe basic characteristics of 102 patients with gastric cancer were reviewed. Real time-polymerase chain reaction (PCR), immunohistochemistry, and Western blot were employed to detect the expression levels of miR-200c and P-gp in gastric carcinoma tissues and cell lines. The correlation of miR-200c messenger RNA (mRNA) level with clinicopathological characteristics and P-gp protein expression were analyzed. SGC7901/vincristine (VCR) cells were transfected with miR-200c mimics or a specific small interfering RNA (siRNA) targeting the ABCB1 gene. The methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay and flow cytometry were used to determine the role of miR-200c and ABCB1 on the viability and apoptosis of gastric carcinoma cell lines.ResultsThe level of miR-200c in carcinoma tissues was significantly lower than that in adjacent tissues, and the expression level of P-gp in carcinoma tissues was obviously higher than that in adjacent tissues (P<0.01, P=0.029). The expression levels of miR-200c and P-gp were associated with the malignant characteristics of gastric cancer, and patients with high expression of miR-200c or negative expression of P-gp had a better prognosis (P=0.006, P=0.022). MiR-200c negatively regulated the ABCB1 gene in gastric cancer cell lines. MiR-200c overexpression and ABCB1 down-regulation increased the sensitivity of SGC7901/VCR cells to VCR and reversed MDR by promoting cell apoptosis.ConclusionsThe expression level of miR-200c decreases in gastric carcinoma tissues and drug-resistant gastric cancer SGC7901/VCR cells. Overexpression of miR-200c may enhance the sensitivity of SGC7901/VCR cells to VCR by regulating the expression of P-gp. 相似文献
39.
目的研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammaliantargetofrapamycin,mTOR)特异性抑制剂RAD001对胃癌耐药细胞株SGC7901/DDP的血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的影响,以期为临床治疗肿瘤提供新的线索。方法常规培养胃癌耐药细胞株SGC7901/DDP,RAD001单独或联合顺铂(DDP)干预48h后,ELISA法测定药物对细胞分泌VEGF蛋白的影响,蛋白免疫印迹法和免疫细胞化学法检测药物作用后细胞中VEGF蛋白的表达情况。结果RAD001单独或联合DDP干预后,SGC7901/DDP细胞分泌的VEGF蛋白减少,呈剂量依赖性;SGC7901/DDP细胞的VEGF蛋白的表达降低。结论RAD001可以减少胃癌SGC7901/DDP细胞的VEGF蛋白的分泌和表达,与DDP联合用药时作用更明显。 相似文献
40.
目的:探讨iressa对胃癌SGC.7901细胞增殖,细胞周期和细胞凋亡的影响。方法:用四氮甲唑蓝(MTT)法检测不同浓度iressa对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测不同浓度iressa对胃癌SGC-7901细胞周期分布和细胞凋亡的影响。结果:在5~20μmol/L浓度范围内,iressa对SGC-7901的生长具有明显的抑制作用,并呈时间和剂量依赖性。10μmol/L和20μol/L的iressa可以导致SGC-7901细胞Gl期阻滞,并引起细胞凋亡。结论:Iressa可改变SGC-7901细胞周期分布,诱导细胞凋亡,从而抑制细胞增殖。 相似文献