SELDI-TOF-MS技术对胃炎诊断的应用

目的采用蛋白质剖析技术同时解析和分析多种蛋白质，从而找出更好的生物标记物，用于检测胃炎。方法用SELDI—TOF—MS技术及配套蛋白质芯片检测30例慢性胃炎和64例非胃炎疾病患者的血清蛋白质指纹图谱，建立诊断模型。结果2个蛋白质峰[5084和8691质荷比（m／z））组合构建的诊断模型鉴别慢性胃炎和健康志愿者，灵敏度为96．66％（29／30），特异性为93．55％（29／31）。2个蛋白质峰（5910和6440m/z合的诊断模型鉴别胃炎和胃癌患者的灵敏度为96．6％（29／30），特异性为90．9％（30／33）。结论SELDI—TOF—MS在慢性胃炎的诊断尤其是早期诊断及候选标志物筛选等方面具有一定价值，值得进一步深入研究。     

SELDI—TOF—MS技术在非小细胞肺癌中的应用

表面增强激光解析离子化飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术是一种使用特殊的增强表面直接捕获待测样本中的蛋白质分子，然后经激光解析离子化．飞行时间质谱测定被捕获的蛋白质的相对分子量、丰度的新兴技术。目前该项技术已经成功应用于前列腺癌的诊断、子宫良恶性肿瘤的鉴别等方面。SELDI-TOF-MS技术通过寻找肿瘤病人相关的特异性蛋白用于对非小细胞肺癌的早期诊断，指导治疗及预测预后等方面具有很好的应用前景。     

Rapid analysis of proteomic biomarkers expressed in human endometrial stromal cells during decidualization

Decidualization of human endometrial stromal (ES) cells plays a critical role in successful uterine implantation. Therefore, monitoring of the behavior of human ES cells may provide the clue for early detection of a uterine abnormality such as sterility and abortion. Monitoring of decidualization in vitro cell culture system fundamentally depends on expression of the definite biomarkers. In this study, we tried to uncover novel marker proteins of 8-bromo-cyclic adenosine monophosphate (8-Br-cAMP)-induced decidualization in human ES cells using the surface enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (SELDI-TOF-MS). Samples were divided into three groups; control human ES cells (n=7), ES cells treated with 8-Br-cAMP (n=7 per each treatment, treated for 3, 6, 9, or 12 days), and cells from which 8-Br-cAMP was withdrawn for 3 days (n=7) or 6 days (n=7) after 8-Br-cAMP treatment for 6 days. Differential expressions between non-decidual control cells and 8-Br-cAMPinduced decidual cells were observed in the peaks of 9787.058 Da, 10115.45 Da, and 24031.25 Da, detected by H4 ProteinChip, and in the peaks of 10833.08 Da, 22440.88 Da, and 32777.38 Da, detected by CM10 ProteinChip. The expression patterns of these decidual markers are expected to provide invaluable information in monitoring cellular development, and further identification of these proteins may hopefully offer precious means for clinical research and therapeutic purposes.     

3种人工神经网络模型预测大肠癌的初步研究

目的探讨大肠癌血清蛋白标志物、肿瘤标志物及联合多标志物人工神经网络(ANN)模型在预测大肠癌中的价值。方法大肠癌与健康对照血清样本106例,利用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)检测血清蛋白质谱并筛选大肠癌蛋白标志物,电化学发光法检测癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、糖类抗原72-4(CA72-4)和CA19-9分别建立蛋白标志物、肿瘤标志物及蛋白标志物与肿瘤标志物结合的多标志物ANN模型。结果大肠癌患者和对照组间比较差异有统计学意义(P<0.001),筛选4个质荷比(m/z)分别为4 095、5 6404、4807、620 m/z蛋白建立ANN模型,预测大肠癌敏感度和特异度为92.3%和83.3%;肿瘤标志物模型预测大肠癌的敏感度为73.1%,特异度86.7%;联合筛选的4个标志蛋白和CEA、CA72-4建立的模型诊断大肠癌敏感度和特异度分别为92.3%和96.7%。结论联合蛋白标志物和肿瘤标志物建立ANN模型,在预测大肠癌中显示高通量、高敏感性和高特异性的特点,具有潜在应用价值。     

肾康灵干预阿霉素肾病大鼠血蛋白质组的实验研究

目的 应用蛋白质组学筛选阿霉素肾病大鼠血清中差异表达的蛋白质,旨在观察频复发性肾病综合征的诊断标志物及肾康灵的作用靶点. 方法利用表面增强激光解析-电离飞行时间质谱合CM10蛋白质芯片技术检测45组大鼠血蛋白质组质谱的表达,用Cipbergen Proteinchip Soft-ware 3.2.1和Biomarker...     

应用SELDI-TOF-MS技术研究急性胰腺炎特异性血清标志物

目的 应用蛋白芯片表面加强激光解析电离-飞行时间-质谱（SELDI-TOF-MS）术揭示胰腺炎患者血清蛋白指纹特征,查找病情特异性血清标志物,探讨急性重症胰腺炎的早期诊断及评估的新方法.方法 收集急性胰腺炎患者血清标本52份,其中急性重症胰腺炎患者24份（SAP组）,急性轻型胰腺炎28份（MAP组）,同期健康人群血清52份（正常对照组）,应用SELDI检测急性胰腺炎患者及健康人群的蛋白质谱,按照临床胰腺炎分级,获得不同临床级别胰腺炎和健康人群的血清蛋白指纹图谱,应用计算机软件分析处理所有峰谱.结果 在质荷比（M/Z）1 000~20 000检出到127个蛋白峰,其中MAP组与正常对照组比较5个峰差异有明显统计学意义（P＜0.05）,MAP组与SAP组比较3个峰值差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 用SELDI-TOF-MS蛋白指纹图谱技术可筛选出有意义的生物标记差异蛋白,这对急性胰腺炎的诊断以及病情轻重的评估提供了新的路径.     

采用血清蛋白指纹图谱技术筛选食管鳞状细胞癌特异相关性蛋白的研究

目的应用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱（SELDI—TOF—MS）技术检测食管鳞状细胞癌患者血清蛋白指纹图谱,筛选候选肿瘤标志物并建立诊断模型,初步探讨所建的诊断模型在食管鳞癌诊断中的临床意义。方法144例经手术后病理证实的食管鳞状细胞癌患者和50例健康人血清,用SELDI—TOF—MS检测各血清标本获得血清蛋白指纹图谱。用Biomarker Wizard筛选差异峰。扩大样本量,采用SPSS12．0中ROC曲线分析入选差异峰用于食管癌诊断的灵敏度和特异性。结果在分子量1500～30000范围内,共检测到93个蛋白峰,其中10个差异峰有统计学意义（P〈0．01）。ROC曲线面积超过08的有2768、2745、3403、6638、5972、6440、3321和3978m/z差异峰。当差异峰3403m／z以3．0为临界值时,其敏感性和特异性分别为87．5％和94．0％;3978m/z以2．0为临界值时,其敏感性和特异性分别为8417％和72．0％。其诊断价值均超过CA724、CEA和CA242单独或联合检测。结论3978和3403m/z两个蛋白对区分食管鳞癌患者和健康人群具有较好的诊断价值。     

IgA肾病湿热证的血清蛋白质组学研究

目的：应用表面加强激光解析电离-飞行时间-质谱（SELDI-TOF-MS）技术,对IgA肾病（IgAN）湿热证患者进行血清蛋白质指纹图谱检测,分析探讨该人群中所表达的特异蛋白,试图从蛋白质组层面寻找与IgA肾病湿热证相关的血清标志物。方法：采集IgA肾病患者的血清样本共29例（湿热证14例,非湿热证15例）,同时选择非IgA肾病的湿热证肾病患者血清样本10例和健康人血清样本15例。采用表面增强激光解析离子化蛋白质芯片分析仪实现各组血清蛋白质表达谱的检测,后运用Biomarker WizardTM和Biomarker PatternsTM软件进行数据分析,最终识别IgA肾病湿热证特异表达的蛋白质,并建立证候决策树模型。结果：IgA肾病湿热证组与非湿热证组之间共检出有7个蛋白峰具有显著差异（P〈0.05）;IgA肾病湿热证组与非IgA肾病湿热证组之间共检出有4个蛋白峰具有显著差异（P〈0.05）;IgA肾病湿热证组与健康对照组之间共检出有5个蛋白峰具有显著差异（P〈0.05）;综合以上各组对比结果,并结合统计学分析证实,M/Z（质荷比）为4987.92所代表的“Beta-defensin 33蛋白”可能是IgA肾病湿热证的特异血清蛋白标志物。经筛选以M/Z为1092.71等11个蛋白峰组成的证候决策模型能很好地将IgA肾病湿热证区分出来,该模型的敏感性为92.86%,特异性为87.50%。进一步对此决策模型进行盲法验证,结果其敏感性为90.00%,特异性为86.67%。结论：IgA肾病湿热证的发生发展,可能是以M/Z为4987.92所代表的“Beta-defensin 33蛋白”的差异表达为物质基础的,同时建立了分子生物学证候决策树模型。     

应用表面增强基质辅助激光解析离子化-飞行时间质谱技术筛选子宫内膜异位症血清学标记物

目的:应用表面增强基质辅助激光解析离子化-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术比较子宫内膜异位症(内异症)血清差异蛋白质,建立内异症血清差异蛋白质指纹图谱,筛选内异症血清学标志物。方法:选择在我院接受手术治疗的内异症患者73例,体检结果正常妇女48例,进行血清SELDI-TOF-MS检测,统计学分析检测差异蛋白质峰,构建诊断模型,并用盲法验证诊断模型。结果:内异症组与健康妇女血清差异蛋白质峰有26个,其中内异症组表达上调的13个,下调的13个。应用M/Z为5632 Da、8135 Da的两个蛋白质峰建立内异症诊断模型,诊断内异症的敏感性为98.00%,特异性为85.00%,阳性预测值为89.09%,阴性预测值97.14%,盲法验证敏感性为91.30%,特异性为92.86%。结论:应用SELDI-TOF-MS技术建立内异症血清蛋白质指纹图谱,建立诊断模型,对于内异症的诊断具有很高的价值。M/Z为5632 Da、8135 Da两个蛋白质峰有望成为内异症诊断的血清学标志物。     

骨肉瘤、骨软骨瘤与正常人血清蛋白指纹图谱分析

目的分析骨肉瘤和骨软骨瘤患者血清蛋白指纹图谱的差异,筛选对骨肉瘤早期诊断有意义的特异性蛋白.方法收集河南省洛阳正骨医院2007年6月至2010年1月病理确诊的骨肉瘤25例、单发骨软骨瘤16例和性别、年龄与上两组患者匹配的26例健康志愿者,采用SELDI-TOF-MS质谱仪方法对这67例静脉血液离心获得的血清进行蛋白指纹图谱分析.结果我们发现2个特异性蛋白质荷比(M/Z)具有差异性表达,即3954Da、6438Da.在学习模式下其诊断灵敏度96.0%,特异度96.1%,在测试模式下其诊断灵敏度98.5%,特异度100.0%,采用leave-one-out互证交叉检验验证,认为该决策树盲法筛选分组的正确率可达67/67=100%,灵敏度为25/25=100%;特异性为42/42=100%.结论采用SELDI-TOF-MS方法筛选出的2个特异性蛋白可能对骨肉瘤的早期诊断和治疗监测有临床参考价值.