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91.
D. A. Garteiz T. Madden D. E. Beck W. R. Huie K. T. McManus J. L. Abbruzzese W. Chen R. A. Newman 《Cancer chemotherapy and pharmacology》1998,41(4):299-306
A highly sensitive and specific assay for the quantitation of the anticancer agent dolastatin-10 (DOL-10) in human plasma
is described. The method was based on the use of electrospray ionization-high-performance liquid chromatography/mass spectrometry
(ESP-LC/MS). The analytical procedure involved extraction of plasma samples containing DOL-10 and the internal standard (DOL-15)
with n-butyl chloride, which was then evaporated under nitrogen. The residue was dissolved in 50 μl mobile phase and 10 μl was subjected
to ESP-LC/MS analysis using a C18 microbore column. A linear gradient using water/acetonitrile was used to keep the retention times of the analytes of interest
under 5 min. The method exhibited a linear range from 0.005 to 50 ng/ml with a lower limit of quantitation (LLQ) at 0.005 ng/ml.
Absolute recoveries of extracted samples in the 85–90% range were obtained. The method's accuracy (≤5% relative error) and
precision (≤10% CV) were well within industry standards. The analytical procedure was applied to extract DOL-10 metabolites
from samples obtained following incubation of the drug with an activated S9 rat liver preparation. Two metabolic products
were detected and were tentatively identified as a N-demethyl-DOL-10 and hydroxy-DOL-10. Structural assignments were made based on the fragmentation patterns obtained using the
electrospray source to produce collision-induced dissociation (CID). The method was also applied to the measurement of DOL-10
in the plasma of patients treated with this drug. Preliminary investigation of the pharmacokinetics suggested that drug distribution
and elimination may be best described by a three-compartment model with t1/2α = 0.087 h, t1/2β = 0.69 h and t1/2γ = 8.0 h. Plasma clearance was 3.7 l/h per m2.
Received: 17 March 1997 / Accepted: 13 June 1997 相似文献
92.
IL-15对儿童MDS造血前体细胞bcl-2、bcl-xl mRNA表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨IL-15对骨髓增生异常综合征(MDS)造血细胞bcl-2、bcl—xl mRNA表达的影响,以探索IL-15抑制MDS CD34^ 造血干/祖细胞凋亡的可能机制:方法 采用吸附单克隆抗体的免疫磁珠分离系统,分离纯化17例MDS患儿骨髓CD34^ 细胞,采用RT—PCR检测bcl-2、bcl—xl mRNA表达水平,观察IL-15对它们的影响。结果 IL-15可呈时间与剂量依赖性的增强体外培养的MDS造血前体细胞bcl-2、bcl—xl基因mRNA的表达。结论 IL-15可能为抑制MDS CD34^ 造血干/祖细胞凋亡的作用机制之一。 相似文献
93.
骨髓增生异常综合征造血前体细胞对白细胞介素15反应的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨儿童骨髓增生异常综合征 (MDS)造血前体细胞对白细胞介素 15 (IL 15 )的反应 ,为临床应用提供理论依据。方法 采用吸附单克隆抗体的免疫磁珠分离系统分离纯化 18例MDS患儿骨髓CD3 4 细胞 ,采用碘化丙锭染色、流式细胞仪分析和细胞核形态检测两种方法同时检测体外培养MDS造血前体细胞增殖、分化过程中的凋亡状况 ;观察IL 15对其影响 ,并进行定量分析。结果 在培养d8,IL 15浓度在 0~ 10 0ng/ml可呈剂量依赖性地抑制体外培养MDS骨髓造血前体细胞的凋亡。结论 IL 15可部分抑制体外培养的MDS造血前体细胞凋亡 相似文献
94.
甲硫腺苷磷酸化酶在非小细胞肺癌中转录表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)及其连锁基因p14,p15和p16在非小细胞肺癌中的转录表达变化情况。方法 采用RT-PCR方法检测15例新鲜肺癌标本及相应癌旁组织中MTAP及其边锁基因p14、p15和p16mRNA的表达情况。结果 MTAP在73.3%的肿瘤标本中不表达或转录水平降低5倍以上,而MTAP在癌旁对照组织中的表达率却高达93.3%;此外,MTAP在肺腺癌和鳞癌中的低表达现象无显著性差异,但在中/低分化肺癌中低表在显著高于高于分化癌。对7例标本分析表明,1例P15基因在正常组织及癌瘤中都高水平表达,1例均不表达。5例在癌标本中基本不表达.而在正常组织中表达;而p14和p16正常组织中转录表达水平很低,而在配对的7例肺癌组织中却分别有3项高表达。结论 MTPA基因低表达或丢失可能与肺癌的恶性程度密切相关,MTAP的缺失可能独立于p16之外,提示MTAP的低表达或缺失在肿瘤生物学中有其功基础的基础。 相似文献
95.
目的建立转人白细胞介素-15(hIL-15)基因的喉癌细胞株,并研究hIL-15的表达情况。方法将携带人白细胞介素-15的质粒pcDNA3.1( )-hIL-15转导入人喉表皮样癌细胞Hep-2中,G418筛选阳性克隆,RT-PCR、Westernblot和ELISA法对hIL-15的表达进行检测。结果IL-15基因成功地转导入Hep-2细胞中并能高效表达。RT-PCR电泳结果显示hIL-15基因在mRNA水平有表达;ELISA法测得106个转染阳性细胞24h内培养上清液中hIL-15的含量为(185.0±12.2)pg/ml,空载体转染及未转染的细胞未检测到hIL-15。结论hIL-15基因成功转染人喉癌细胞系Hep-2细胞且能持续大量表达。 相似文献
96.
目的研究多肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统用于胃癌的诊断价值。方法用多肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统检测50例正常人,70例胃良性疾病及80例胃癌患者血清中十二种常见的肿瘤标志物:甲胎蛋白(AFP),癌胚抗原(CEA),神经元特异性烯醇化酶(NSE),糖原125(CA125),糖原153(CA153),糖原242(CA242),糖原199(CA199),前列腺特异性抗原(PSA),游离前列腺特异性抗原(f-PSA),铁蛋白(FER),β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG),人生长激素(HGH)的水平并进行统计学分析。结果80例胃癌患者血清有74例血清肿瘤标志物为阳性(阳性率为92.75%),70例良性胃疾病中10例肿瘤标志物为阳性(阳性率为14.28%),50份正常对照血清有1例血清肿瘤标志物为阳性(特异性为98%)。试验还发现部分胃癌患者血清中出现NSE,HGH,PSA,f-PSA。结论多肿瘤蛋白芯片的应用,对胃癌患者的术前肿瘤良恶性的判定有一定的临床应用价值。 相似文献
97.
目的:探讨LRP15基因启动子区及第一外显子区的甲基化与血液系统疾病的关系和临床意义。方法:采用甲基化特异性PCR方法检测了9例正常人、73例急性白血病患者、8例慢性髓系白血病患者、2例慢性淋巴细胞白血病、12例血液系统良性病患者骨髓LRP15基因启动子区及第一外显子区的甲基化状况;硫化修饰结合限制性内切酶分析及硫化测序验证了一例血液系统良性病患者LRP15基因启动子区及第一外显子区的甲基化。结果:AL患者LRP15基因甲基化阳性率(71.23%)高于正常供者及慢性白血病(10%),差异有统计学意义(P<0.05)。LRP15基因在非恶性血液病患者中甲基化阳性率(55.56%)高于正常供者,硫化修饰结合限制性内切酶分析及硫化测序进一步证实了上述结论。结论:LRP15基因启动子的甲基化与不成熟的白血病细胞有关,与血液系统良性疾病也有一定关系。 相似文献
98.
目的探讨高鸟氨酸血症-高氨血症-高同型瓜氨酸尿症(HHH综合征)的临床及基因突变特点。方法回顾分析1例HHH综合征患儿的临床资料,并复习文献。结果患儿,女,2岁2个月,平素厌食高蛋白食物。生后反应弱,独走后出现共济失调,感染后加重。实验室检查示高氨血症、转氨酶升高及凝血异常。头颅MRI示半卵圆中心白质容积减少。基因检测示患儿携带SLC25A15基因c.190TC(p.Y64H)及c.278GA(p.R93Q)复合杂合突变,分别来自表型正常的父母。结论 HHH综合征临床表现以神经系统及肝脏受累为主要,需与其他尿素循环障碍及肝脏疾病相鉴别。 相似文献
99.
100.