CpG ODN BW006对实验性牙移动模型大鼠牙周组织中Runx2和Osterix表达的影响及其意义

目的：通过观察免疫刺激性脱氧寡核苷酸（CpG ODN）BW006对实验性牙移动大鼠牙周组织中成骨相关转录因子Runx2和Osterix表达的影响,探讨其对正畸牙移动大鼠牙周组织改建的作用。方法：选取36只7周龄雄性Wistar大鼠建立实验性牙移动模型,左侧上颌为实验组（局部注射CpG ODN BW006）,右侧上颌为对照组（局部注射PBS）,每3 d给药1次,每次40 μL,于加力3、7和14 d时分别随机选取12只大鼠处死,取含有第一磨牙的上颌骨组织制备标本,进行HE染色和免疫组织化学染色,观察牙周组织形态表现,测量牙齿移动距离,检测牙周组织中Runx2和Osterix的表达。结果：HE染色,实验组大鼠压力侧骨吸收程度较低,对照组大鼠压力侧骨吸收明显,实验组大鼠张力侧可见大量成骨细胞,牙槽骨丰满度及高度高于对照组;加力7和14 d时实验组牙齿移动距离分别为（0.347±0.007）和（0.443±0.016）mm,对照组分别为（0.585±0.012）和（0.975±0.084）mm,实验组与对照组牙齿移动距离比较差异有统计学意义（P<0.01）。免疫组织化学染色,加力3和7 d时实验组大鼠牙周组织中Runx2和Osterix阳性表达水平明显升高,与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）,且均于加力7 d时达到峰值;加力14 d时实验组Runx2和Osterix阳性表达水平略有下降,但与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论：CpG ODN BW006可通过促进牙移动过程中Runx2和Osterix的表达调控牙周组织改建。     

术前行短程或常规放化疗的ⅢB期直肠癌患者术后疗效及组织标本中Runx3、Ki-67表达的差异

目的 分析术前行短程放化疗或常规放化疗对ⅢB期直肠癌患者的手术效果及切除的组织标本中Runt相关转录因子3（Runx3）、细胞增殖核抗原Ki-67（简称Ki-67）表达的差异。 方法 前瞻性研究2019年1至12月于河北北方学院附属第一医院确诊的100例ⅢB期直肠癌患者的临床资料,其中男性52例、女性48例,年龄38～79（58.56±9.11）岁。将所有患者按电脑随机数字表法分为对照组和观察组,每组50例。对照组术前接受常规调强适形放疗+化疗,观察组术前接受短程放疗+化疗,分别比较2组患者手术的一般临床资料、术后病理T分期降期率、病理学完全缓解（pCR）率、不良反应发生情况、局部复发率、远处转移率和生存率,对切除的直肠癌组织标本采用免疫组化方法分别计算Runx3和Ki-67表达的评分。2组间计量资料的比较采用独立样本t检验;2组间的计数资料进行比较时,当例数<40或理论频数T≤1时采用Fisher's确切概率法,当例数≥40且理论频数T≥5（未校正）或1χ2检验。 结果 观察组与对照组患者的手术时间[（165.89±18.73） min 对（158.14±23.57） min]、术中出血量[（215.63±56.89） mL对（227.84±60.75） mL]、术后排气时间[（62.28±16.47） h 对（59.28±12.04） h]、住院时间[（13.97±7.11） d对（15.01±5.29） d]、吻合口瘘率[6%（3/50）对2%（1/50）]、肠梗阻率[4%（2/50）对0（0/50）]、感染率4%（2/50）对[8%（4/50）]的差异均无统计学意义（t=0.854~1.820,χ2=0.260、0.177,Fisher's确切概率法,均P>0.05）。2组患者术后T分期降期率和pCR率的差异均无统计学意义（χ2=0.160、0.000,均P>0.05）。观察组放射性皮炎总发生率（12%,6/50）低于对照组（30%,15/50）,且差异有统计学意义（χ2=4.883,P<0.05）。观察组术中切除标本中Runx3表达的评分为（2.56±0.51）分,高于对照组的（1.87±0.72）分,且差异有统计学意义（t=5.530,P<0.01）,Ki-67表达的评分为（2.39±1.03）分,低于对照组的（3.94±0.46）分,且差异有统计学意义（t=9.716,P<0.01）;观察组局部复发率（2%,1/50）低于对照组（17%,8/48）,且差异有统计学意义（χ2=5.936,P<0.05）。 结论 对ⅢB期直肠癌术前行短程放化疗,不会增加全直肠系膜切除术的难度与风险,可减少不良反应的发生,降低局部复发率。手术切除标本中Runx3和Ki-67的表达存在差异。     

Transactivation by Runt related factor-2 of matrix metalloproteinase-13 in astrocytes

We have previously shown functional expression by osteoblasts of signaling machineries required for neurotransmission in the brain. In this study, we have evaluated possible functional expression of different osseous genes in the brain. In embryonic and adult mouse brains, mRNA expression was invariably seen for the master regulator of osteoblastic differentiation Runt related factor-2 (Runx2), in addition to the partner protein core binding factor-β and their targets such as osteopontin (OPN) and matrix metalloproteinase-13 (MMP13), but not for collagen-I or osteocalcin. In pluripotent P19 progenitor cells, Runx2 mRNA expression was drastically increased along with mRNA expression of an astrocytic marker, but not with neuronal marker mRNA expression. Both mRNA and corresponding protein were detected for Runx2 in cultured rat neocortical astrocytes and astrocytic C6 glioma cells. In C6 glioma cells, transient overexpression of Runx2 significantly increased mRNA expression of MMP13, but not of OPN. Moreover, transient overexpression of Runx2 significantly increased luciferase activity in C6 glioma cells transfected with the reporter plasmid linked to a wild-type Runx2 binding element in the MMP13 promoter, but not in cells with a mutated element. These results suggest that Runx2 signal input may lead to transactivation of MMP13 gene without affecting OPN expression in astrocytes.     

Cbfa1/Runt2在牙髓组织和牙髓干细胞中的表达研究

目的:检测Cbfa1/Runt2在成人牙髓组织及牙髓细胞的表达,以便进一步探讨其在成牙本质细胞分化过程中所起的作用.方法:选取因正畸拔除的第一前磨牙牙髓,一部分用于免疫酶标检测,一部分用酶消化法进行细胞培养.取第4代细胞进行Cbfa1/Runt2的免疫荧光检测.选取牙龈组织和牙龈成纤维细胞作为对照.结果:Cbfa1/Runt2在牙髓组织的表达集中在成牙本质细胞下层和血管周围.在牙髓细胞的表达集中在细胞核.结论:Cbfa1/Runt2可能参与成牙本质细胞分化的调控,但其在成牙本质细胞分化过程中所起的作用还需进一步研究.     

左旋肉碱经Runx2/COL1A1通路抑制老年鼠肿瘤恶液质的骨骼肌纤维化

目的 探讨左旋肉碱经Runx2/COL1A1通路抑制老年鼠肿瘤恶液质的骨骼肌纤维化。方法 用结肠癌MC38细胞在C57老年鼠右侧腹股沟皮下植瘤构建肿瘤恶液质模型,实验分为非荷瘤组、荷瘤组和左旋肉碱组,并进行相应干预。实验结束后取一侧腓肠肌称重,行苏木精⁃伊红染色（HE染色）和Masson染色后,分别测量腓肠肌横截面积和胶原纤维面积占比;对侧腓肠肌提取总蛋白,蛋白质印迹法检测Runx2和COL1A1蛋白水平。体外实验用转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导NIH/3T3细胞,建立体外纤维化模型,经左旋肉碱干预后,分别提取总蛋白和mRNA,蛋白质印迹法检测Runx2和COL1A1蛋白水平,并用qRT⁃PCR检测COL1A1 mRNA水 平,转染cDNA⁃Runx2验证左旋肉碱通过Runx2调控COL1A1。结果 三组进行比较,荷瘤组腓肠肌重量明显低于非荷瘤组（[ 98.12±17.04）mg 比 (122.18±6.91）mg（] P<0.05）;荷瘤组腓肠肌横截面积（207.46±54.55）µm2显著低于非荷瘤组（488.61±46.72）µm2和左旋肉碱组（434.54±113.84）µm（2 P<0.05）;胶原纤维面积占比荷瘤组（9.69±1.55）%明显高于左旋肉碱组（5.48±1.19）%和非荷瘤组（3.88±0.86）% （P<0.05）。蛋白质印迹法结果显示,与其他两组相比,荷瘤组Runx2和COL1A1高表达（P<0.05）。体外研究表明,左旋肉碱可逆转TGF⁃β1诱导的Runx2蛋白和COL1A1 mRNA高表达。过表达Runx2结果证实左旋肉碱通过抑制Runx2蛋白的表达下调COL1A1 mRNA。结论 左旋肉碱通过降低Runx2/COL1A1改善老年鼠肿瘤恶液质的骨骼肌纤维化。