逆转录病毒介导的c-met-小干扰RNA抑制肝癌转移的体内研究

我们对c-met与肝癌的临床病理因素的关系进行了分析，明确了c-met与肝癌转移有关联。此前也通过逆转录病毒载体介导，成功建立了表达c-met-siRNA的肝癌细胞株MHCC97-H／c-met-siRNA，并证实逆转录病毒载体能长期、稳定表达针对靶基因c-met的siRNA，因此，本研究拟进一步在体内研究c-met-siRNA对肝癌生长、转移的影响，以期为c-met-siRNA应用于临床防治肝癌转移复发提供实验依据。     

短发卡RNA对人胃癌细胞STAT3基因的沉默作用

目的:探讨STAT3基因小发夹RNA（shRNA）表达质粒对胃癌MKN-45细胞STAT3基因的干扰作用。方法:根据STAT3 mRNA 编码序列，设计RNA干扰靶点，构建STAT3基因的特异性小RNA干扰质粒（psiRNA-H1/STAT3），使用脂质体转染人胃癌细胞系（MKN-45细胞）。实验分为对照（A）组，psiRNA-H1转染（B）组和psiRNA-H1/STAT3转染（C）组。通过RT-PCR和Western Blot检测STAT3特异性小RNA干扰基因对胃癌细胞STAT3基因mRNA和蛋白表达的影响。结果:psiRNA-H1/STAT3经限制性酶切及部分序列分析证明基因插入正确，并经测序证实。将其成功转染MKN-45细胞后，该细胞的STAT3 mRNA和蛋白表达均明显下降(P<0.05)。 结论:将成功构建的针对STAT3基因的shRNA表达载体转染MKN-45细胞，能有效抑制该细胞的STAT3 mRNA和蛋白表达，为STAT3基因靶向治疗提供一定的实验依据。     

白细胞介素-12基因修饰对树突状细胞表面分子表达及细胞因子分泌的影响

目的 观察白细胞介素(IL)-12基因修饰对树突状细胞(DC)表面分子及细胞因子分泌的影响.方法 采用重组逆转录病毒介导IL-12基因修饰人外周血单个核细胞(PBMC)来源的Dc;ELISA法检测各组DCs和各组T细胞上清中IL-12、IL-10、IFN-γ因子的分泌水平;流式细胞仪(FACS)分析各组DC表面CD83、CD86的表达;MTT法检测DC刺激同源T淋巴细胞增殖的能力;统计学分析比较各组间的差异.结果 IL-12基因修饰使得DC高表达CD83和CD86分子,分泌高水平IL-12及IFN-γ,但对IL-10因子的分泌无明显影响,刺激同源T淋巴细胞增殖明显,诱导激活的T细胞上清中IFN-γ水平显著增高、IL-10分泌水平显著降低.结论 经IL-12基因修饰后的DC表型成熟,分泌IL-12及IFN-γ的能力增强,对IL-10因子的分泌无影响,能抑制T细胞分泌IL-10因子,优化抗原提呈的微环境.     

沉默树突状细胞恒定链以增强其抗肿瘤作用的体外实验研究

目的初步观察用小分子干扰RNA(siRNA)沉默树突状细胞(DCs)恒定链(Ii)后,DCs疫苗的体外抗肿瘤效果。方法从小鼠骨髓分离骨髓前体细胞,细胞经100 ng/ml GM-CSF和100 ng/ml IL-4诱导培养6 d后,转染针对DCs Ii链特异的Ii-siRNA,转染后加用50 ng/ml TNF-α继续诱导细胞成熟48 h,然后分别用Western blot检测沉默效果及CCK-8试剂盒检测DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力;此外,DCs共转染Ii-siRNA和小鼠胃癌前体细胞MFC的总RNA后,与同种异体淋巴细胞共培养,通过ELISA检测培养上清IFN-γ/和IL-4的水平,并收集致敏淋巴细胞进行体外杀伤实验。结果Ii-siRNA明显抑制DCs Ii的表达。沉默Ii链能够增强DCs的淋巴细胞增殖能力,并促使淋巴细胞向Th1的方向漂移[IFN-γ:(5107±351)pg/ml,IL-4:(65±13)pg/ml,P＜0．05]。淋巴细胞经共转染Ii-siRNA和MFC RNA的DCs激活后,明显而特异地杀伤靶肿瘤细胞(杀伤百分率: 66．94%±2．75%,P＜0．05)。结论通过siRNA沉默DCs的Ii链可能是一种行之有效的增强抗肿瘤免疫的方法。     

乙型肝炎治疗研究进展

乙性肝炎病毒感染所导致的慢性肝炎是我国的一个大问题,给患者及社会带来了很大负担。慢性乙型肝炎现行治疗主要依靠干扰素、核苷类似物等,其存在高耐药、低耐受以及不良反应等问题。新的、更为安全有效的治疗药物及方法亟待发展。最近,科学家们发现人体内的TRIM22分子对抑制乙肝病毒的复制起到重要作用,为乙肝的治疗及有效药物的研发开辟了新的道路。     

单甲氧聚乙二醇化学修饰药物酶的研究进展

用单甲氧基聚乙二醉(1)化学修饰药物酶是生化药物研究开发的重要手段之一。本文综述了1化学修饰药物酶的一般方法及修饰后酶在生物和理化性质方面的变化，同时对1研究前景进行展望，并指出了尚待解决的问题。     

Two novel gastric cancer-associated genes identified by differential display

AIM To clone novel gastric cancer-associated genes and investigate their roles in gastric cancer occurrence.METHODS A method called differential display was used which allows the identification of differentially expressed genes by using PAGE to display PCR-amplified cDNA fragments between gastric cancer cells and normal gastric mucosa cells. These fragments were cloned into plasmid vector pUC18. Homology analysis was made after sequencing these fragments.RESULTS Two novel genes were identified compared with sequences from GenBank. One was registered with the AD number AF 051783. In situ hybridization showed that these two novel genes expressed specifically in gastric cancer tissues.CONCLUSION The two novel genes obtained by differential display were confirmed to be gastric cancer-associated genes using in situ hybridization.     

鹿茸有效成分对小鼠肝脏RNA和蛋白质合成的影响

多次给小鼠po鹿茸多胺30mg/kg,对[³H]leucine和[³H]uridine掺入肝组织蛋白和RNA有明显的促进作用,而庸茸非多胺则无此作用;当腐胺剂量为21mg/kg时,不仅促进[³H]leucine和[³H]uridiae掺入肝组织蛋白和RNA,也促进[³H]uridine掺入肝细胞核的RNA中,并增强RNA聚合酶的活性;精脒在剂量为8mg/kg时,仅对[³H]leucine掺入肝组织蛋白有促进;而精胺在1mg/kg时,没有观察到上述各种现象。此结果提示,鹿茸多胺类物质是鹿茸中刺激小鼠肝组织蛋白和RNA合成的主要活性物质,这 种刺激小鼠肝组织蛋白和RNA合成效应是由于鹿茸多胺能够显著地增强RNA聚合酶的活性。     

苯DNA加合物研究进展(综述)

苯ＤＮＡ加合物研究进展（综述）李桂兰，常平综述徐伯洪审校（中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所，北京１０００５０）我国职业接触苯的工人约有５０万，长期接触苯可引起白血病。苯与其它实质性肿瘤的问题也有报道［１，２］。世界癌症研究机构（ＩＡＲＣ）１９...     

胰RNA对离体瘤细胞的杀伤作用及其机制的探讨

在体外培养瘤细胞的实验中,胰RNA提取物对艾氏腹水瘤细胞及其他瘤细胞(S_(180),P_(88),H_(22))有杀伤作用。在胰RNA提取物中,对瘤细胞具有杀伤作用的活性物质不是性凝集素样多糖类物质或能透过半透膜的小分子化合物,而是具有二级结构的低分子RNA。