基于RNAi的昆虫几丁质合成酶类调控研究进展

几丁质在昆虫的生长发育中具有重要作用,与蛋白质相互作用形成角质层,保护昆虫免受外界伤害,并参与昆虫生长发育过程中周期性蜕皮等重要生理活动。几丁质的合成由糖代谢、海藻糖合成和几丁质合成等多个途径协调完成,包括海藻糖酶(TRE)和几丁质合成酶(CHS)在内的8种酶参与协同催化。RNA干扰(RNA interference, RNAi)技术是用于研究几丁质合成途径中关键酶类基因功能的重要方法之一。本文概述了昆虫几丁质生物合成途径中关键酶的基因组成,及RNAi处理后不同酶类基因的表达与昆虫表型之间的关系,为全面认识几丁质合成途径关键酶的功能、作用机理以及开发新型杀虫剂防治害虫奠定基础。     

长链非编码RNA CASC15在成釉细胞瘤中的差异表达及生物信息学分析

目的:探讨CASC15在成釉细胞瘤(ameloblastoma,AM)组织中的表达及其在AM发生、发展过程中的作用机制.方法:分析8对AM及其正常瘤旁组织二代高通量全转录测序数据筛选出的目的lncRNA CASC15,采用DEseq2算法筛选与CASC15具有显著差异表达的mRNA;通过与GO数据库以及KEGG数据库中...     

基于循环microRNAs预测模型在子痫前期早期诊断中的应用

目的 探讨基于循环microRNAs预测模型在子痫前期早期诊断中的应用价值。方法 选择2019年1月—2021年6月于海南医学院第二附属医院产科行产检并具有子痫前期危险因素的孕妇(孕周≥20周)246例作为研究对象,根据妊娠期间是否诊断为子痫前期分为子痫组、非子痫组。检测2组孕妇循环microRNAs含量、外周血可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)、胎盘生长因子(PlGF)及子宫动脉搏动指数(UTPI),比较2组患者临床资料。通过Logistic回归分析影响子痫前期发生的相关因素,使用列线图构建基于循环microRNAs含量的预测模型并验证可行性。受试者工作特征曲线(ROC)分析预测模型与sFlt-1/PlGF对子痫前期的预测效能。结果 孕妇246例发生子痫前期71例。子痫组子痫家族史、高血压、肾脏疾病、24 h尿蛋白≥0.3 g占比及平均动脉压(MAP)显著高于非子痫组,PLT及Alb低于非子痫组[χ²(U)/P=10.894/<0.001、13.518/<0.001、8.573/0.003、28.612/<0.001、3.510/&l...     

腹膜透析患者血清lncRNA MEG3、miR-223水平与腹主动脉钙化的相关性分析

目的 探讨腹膜透析患者血清长链非编码RNA MEG3(lncRNA MEG3)、微小RNA-223(miR-223)水平与腹主动脉钙化(AAC)的关系。方法 选取2020年9月—2021年9月武汉科技大学附属孝感医院肾脏内科收治的腹膜透析患者100例为研究对象,根据腹部CT检查结果将其分为AAC组52例和非AAC组48例;同时将AAC组患者分为轻度AAC亚组31例和重度AAC亚组21例。采用实时荧光定量PCR法检测2组血清lncRNA MEG3、miR-223表达,Pearson法或Spearman法评估腹膜透析AAC患者血清lncRNA MEG3、miR-223与一般资料及生化指标的相关性,ROC曲线评价血清lncRNA MEG3、miR-223对腹膜透析患者发生AAC的预测价值;采用Logistic回归分析腹膜透析患者发生AAC的影响因素。结果 AAC组年龄、糖尿病比例、血磷(P)、腹主动脉钙化评分及血清lncRNA MEG3高于非AAC组[t(χ²)/P=6.465/<0.001、 5.364/0.021、2.639/0.010、31.766/<...     

lncRNA NRON靶向miR-185-5p调节乳腺癌细胞化疗耐药性的机制研究

目的 探讨长链非编码RNA抑制因子活化T细胞(lncRNA NRON)对miR-185-5p的调控作用及其影响乳腺癌细胞增殖、凋亡及化疗耐药性的基因调控机制。方法 2020年8月—2021年12月于陆军军医大学大坪医院中心实验室进行实验。选取2016年7月—2020年7月于医院乳腺甲状腺外科行手术切除的乳腺癌患者26例的癌组织及癌旁组织样本,体外培养正常乳腺上皮细胞系(MCF10A)及乳腺癌细胞系(MCF7、MDA-231、T47D、SKBR3、ZR7530、BT549、HCC1937、BT474)。qRT-PCR法检测lncRNA NRON、miR-185-5p基因表达;双荧光素酶试验验证lncRNA NRON与miR-185-5p的靶向关系。将MCF7乳腺癌细胞分为阴性对照(NC)组、plasmid NRON组(转染lncRNA NRON过表达载体)、plasmid NRON+mimic NC组(转染plasmid NRON+mimic NC)、plasmid NRON+miR-185-5p mimic组(转染plasmid NRON+miR-185-5p模拟物),分别给予5-氟尿...     

环状RNA在胶质瘤中的研究进展

环状RNA(circRNA)是一种新型的环状功能性非编码RNA,在真核生物中广泛分布,与传统线性RNA分子相比,没有多聚腺苷酸尾结构,且具有更强的稳定性.circRNA在胶质瘤等多种肿瘤的发生发展进程中发挥重要调节作用,且已用作潜在的生物标志物和肿瘤相关治疗靶点.本文就circRNA的生物学特点、功能以及与神经胶质瘤相...     

定量沉默c-Met基因表达对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和化疗敏感性的影响

目的 探讨定量沉默c-Met基因表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、表阿霉素化疗敏感性的影响及其可能机制。方法 设计3条针对c-Met基因不同位点短发夹RNA(shRNA)片段,瞬时转染MDA-MB-231细胞,挑选出沉默效率最佳的shRNA,并设定scramble为阴性对照组,MDA-MB-231细胞为空白对照组。将沉默效率最佳的TA-shRNA连接到PSD400慢病毒载体中进行病毒包装,收集病毒液并感染MDA-MB-231细胞,利用嘌呤霉素筛选出稳定表达针对c-Met的shRNA细胞系(PSD400-c-Met-shRNA-MDA-MB-231)及阴性对照组细胞(PSD400-scramble-MDA-MB-231)。利用多西环素(DOX)诱导稳定细胞系,Western blot检测稳定细胞系c-Met蛋白表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测敲低c-Met后对稳定细胞系增殖的影响。将诱导的稳定细胞系加入不同浓度表阿霉素,MTT法检测不同浓度表阿霉素作用对稳定细胞系存活率的改变,计算出药物半数抑制浓度(IC₅₀);流式细胞技术检测细胞凋亡情况;Western...     

上调lncRNA TUG1靶向miRNA-194-5p促进KIAA1199表达对结直肠癌细胞增殖侵袭和EMT的影响

目的 探讨上调长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA TUG1)靶向miRNA-194-5p/KIAA1199轴对结直肠癌细胞SW480增殖、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。方法 RT-qPCR检测该院病理确诊为结直肠癌并行肿瘤切除术的52例患者结直肠癌组织、癌旁组织及SW480、人正常结肠黏膜上皮细胞NCM460细胞中lncRNA TUG1、miRNA-194-5p和KIAA1199的表达。生物信息学软件预测TUG1可能结合的靶基因。分别下调lncRNA TUG1、miRNA-194-5p和KIAA1199在SW480细胞中的表达,RT-qPCR检测lncRNA TUG1、miRNA-194-5p和KIAA1199的基因表达水平,CCK-8法检测SW480细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测SW480细胞EMT相关蛋白表达水平。结果 与癌旁组织比较,结直肠癌组织lncRNA TUG1、KIAA1199表达水平明显上调(P<0.01),miRNA-194-5p表达水平明显降低(P<0.05);与NCM460细胞比较,...     

非编码RNA在肺动脉高压中的机制及最新研究进展

肺动脉高压(PAH)是一种高度恶性的心血管疾病,其发病机制尚不明确。关于PAH的影响因素,目前认可度较高的主要有肺血管重塑、炎症、肺细胞异常增殖及遗传因素等。非编码核糖核酸(ncRNA)是一类不能翻译成蛋白质的RNA分子,主要包括微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)及环状RNA(circRNA)。近年来大量研究表明,ncRNA参与PAH的许多病理过程。ncRNA在PAH的调控作用有望阐明PAH的发病机制并为其治疗提供新思路。     

LncRNA在食管癌中的双重调控机制及其临床价值

食管癌是临床常见消化道恶性肿瘤,具有较高的发病率和死亡率,由于早期症状不典型,多数患者确诊时已处于中晚期,治疗效果欠佳。目前对食管癌发病机制的认识有限,基本认为是基因-遗传-环境互作的结果,但目前尚无确切定论,且缺乏有效的治疗方法。因此,明确食管癌潜在发病机制对于临床早期筛查、诊断、治疗和预后等均具有重要意义。其中,长链非编码RNA(long noncoding RNA, LncRNA)是肿瘤诊断、治疗和预后评估的新型生物标志物,在肿瘤细胞的分化、增殖、凋亡、侵袭和转移中扮演着重要角色,介导包括食管癌在内的多种恶性肿瘤的发生与发展。LncRNA在食管癌中具有抑癌和促癌的双重角色,但文献报道较为零散,且LncRNA介导食管癌发生与发展的作用机制尚不完全明确。基于此,文章就LncRNA在食管癌发生发展中的双重调控机制进行系统综述,旨在明确LncRNA如何影响食管癌的发生与发展,以期为食管癌的临床防治提供新思路。