凋亡相关蛋白Apr-2的克隆、测序及初步表达

目的: 从HL-60细胞凋亡模型中克隆凋亡相关蛋白Apr-2编码区基因,并对其进行表达,为进一步研究Apr-2的结构功能及多克隆抗体的制备奠定基础.方法: 建立HL-60细胞凋亡模型,提取HL-60凋亡细胞总RNA,以RT-PCR方法获取Apr-2 cDNA编码区全序列,将其与PGEM-T Easy载体连接,转化E.coli DH5α,构建重组克隆载体PGEM-TEasy/apr-2,测序正确后,将目的片段亚克隆入PGEX-4T-2原核表达载体,并转化大肠杆菌, IPTG诱导重组蛋白质表达,分析蛋白质在细菌中的表达分布,进行凝胶自动扫描分析. 结果:序列分析表明,与GenBank中已登录的Apr-2 cDNA编码区序列比较,完全一致.表达的融合蛋白占菌体总蛋白质的40%以上,主要以包涵体的形式存在. 结论:成功的获得了细胞凋亡模型HL-60中Apr-2 cDNA编码区的克隆及其融合蛋白表达产物.     

胃腺癌微卫星不稳定性与VEGF蛋白表达关系的研究

目的：探讨胃癌微卫星不稳定性(MSI)与胃腺癌中皿管内皮生长因子(VEGF）之间的关系。方法：应用PCR—SSCP技术检测30例胃腺癌5个位点的微卫星不稳定性，同时应用免疫组织化学的方法检测肿瘤皿管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达。结果：MSI阳性率为43．4％(13／30)。VEGF阳性率为60％(18／30）。MSI—H胃癌VEGF的表达显著减少。结论：MSI—H的胃癌与MSS胃癌可能存在两种不同的胃癌及肿瘤血管新生形成的途径。MSI—H肿瘤较低的VEGF表达可能可以解释为何MSI-H胃癌有较低的侵袭性。     

抗NI-35重组单链抗体基因cDNA的合成与克隆

目的抗NI-35抗体(anti-NI-35antibody)作为神经再生抑制因子(NI-35)的拮抗剂对神经再生促进作用的研究是近年的热点,研究表明,抗NI-35抗体能促进体内外受损伤神经元的存活和突起生长。我们重新设计并人工合成抗NI-35重组单链抗体(anti-NI-35-scfv)的cDNA克隆构建其表达载体,在原核系统中实现初步表达。方法参照genebank中发表的抗NI-35抗体的轻链重链序列,重新设计适于在大肠杆菌中表达的目的基因片段,将该基因双链分成35个小片段合成,经退火、复性连接成目的片段后,克隆到经过BamHI和HindIII双酶切的克隆载体pUC18中,并转化大肠杆菌DH5a,抽提重组子pUC18/744进行克隆PCR、酶切鉴定及测序分析。结果测序结果证明获得的基因序列与实验设计仅差一个碱基。结论正确合成了抗NI-35重组单链抗体(anti-NI-35-single-chainantibody)为抗NI-35抗体应用于治疗弥漫性轴索损伤提供了实验基础。     

瘢痕疙瘩成纤维细胞p53基因突变的研究

目的　探讨瘢痕疙瘩成纤维细胞中 p5 3基因第 4～ 8外显子的突变规律及其意义。　方法　取瘢痕患者手术切除的瘢痕疙瘩和增生性瘢痕标本各 12例 ,并设患者自身正常皮肤标本及血标本为对照。体外分离、培养上述组织标本的成纤维细胞。采用聚合酶链式反应 单链构象多态性(PCR SSCP)分析方法和基因测序法 ,检测各种组织成纤维细胞中p5 3基因的突变情况。　 结果　 12例瘢痕疙瘩标本中有 9例p5 3基因外显子 4、5、6、7出现点突变和移码突变 ,增生性瘢痕标本、正常皮肤标本及血标本中均未检出突变。　结论　p5 3基因突变是瘢痕疙瘩形成和发展的重要因素之一。     

急性心肌梗死患者经皮冠状动脉内支架植入术前后QT离散度的对比分析

目的　探讨急性心肌梗死患者经皮冠状动脉成形术 (PTCA) +支架植入术前后QT离散度的变化。方法　对确诊的5 1例急性心肌梗死患者 ,在入院 7～ 14天后行PTCA +支架植入术 ,使急性心肌梗死相关血管再通 ,分别测量术前及术后第 4天心电图QT离散度。结果　PTCA +支架植入术成功后患者心电图的QT离散度明显减小 ,与术前比较有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　急性心肌梗死患者PTCA +支架植入术后 ,闭塞或严重狭窄的相关冠状动脉血运获得重建 ,使心肌细胞得到再灌注 ,缺血心肌血供改善 ,QT离散度减小 ,能有效避免严重心律失常及猝死的发生。     

急性颅脑损伤和神经元凋亡

凋亡(apoptosis)又称程序性细胞死亡(pro．grammedcelldeath，PCD)，是现代医学研究的热点，但其机制不清。急性颅脑损伤(acutebrainin．juries)是否存在神经元凋亡(neuronalapoptosis)一直存在争议，主要原因是缺乏人脑损伤的直接资料来证实这一现象。本文简要综述凋亡的研究进展及急性颅脑损伤和神经元凋亡的关系。     

血液透析患者C-反应蛋白与心血管疾病的关系

目的:探讨血液透析患者的慢性炎症与心血管疾病的关系.方法:对64例稳定的血液透析患者进行统计分析慢性炎症的标志物-血C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)和心血管疾病(心肌梗死、心绞痛及心力衰竭)的关系.结果:64例患者中有28.1%(18/64)的患者CRP超过正常值(正常值为＜5 mg/L),平均血CRP12.61 mg/L±4.81 mg/L(5.90 mg/L～21.4 mg/L).其中有心血管疾病患者27例,无心血管疾病患者37例.心血管疾病组的CRP(7.79 mg/L±6.61 mg/L)明显高于无心血管疾病组(2.14 mg/L±3.59 mg/L)(P＜0.01).多元Logistic逐步回归分析证实:CRP是心血管疾病的独立致病因素.结论:血液透析治疗的患者确实存在慢性炎症;慢性炎症与心血管疾病有关.     

紫河车蜜丸对老年期痴呆患者脑脊液β淀粉样蛋白的影响

目的观察紫河车蜜丸对老年期痴呆患者的疗效及脑脊液β淀粉样蛋白的影响。 方法用紫河车蜜丸治疗阿尔茨海默病患者 1 6例 ,血管性痴呆患者 1 9例 ,采用改良长谷川痴呆量表记分的方法观察治疗前后的变化 ,并用酶联吸附免疫法测定患者脑脊液β淀粉样蛋白含量变化。结果紫河车蜜丸治疗阿尔茨海默病和血管性痴呆均有效 (P <0 .0 5 ) ,并能降低脑脊液 β淀粉样蛋白含量 (P <0 .0 1、P <0 .0 5 )。结论紫河车蜜丸治疗老年期痴呆患者有效 ,并能降低患者脑脊液β淀粉样蛋白含量。     

胰岛素样生长因子-1在妇科疾病中的作用

在许多组织增生过程中，通过内分泌、旁分泌和自分泌会产生胰岛素样生长因子-1(IGF-1)。最近的研究发现，IGF-1存在于各种增生组织，如子宫内膜和卵巢组织。患有严重子宫内膜异位症时，血清中IGF-1水平较高，而子宫内膜局部的：IGF-1水平减低，这可能是导致不孕的原因，多囊性卵巢综合征(PCOS)患者卵巢局部的IGF-1活性增强，与患者肥胖、高雄激素水平等一系列临床症状有关。IGF-1在良、恶性肿瘤中也起着重要的作用，IGF-1能刺激子宫肌瘤细胞的生长。围绝经期妇女若存在高IGF-1和低IGF-1结合蛋白-3(IGFBP-3)水平，则患乳腺癌的风险增大。绝经前后女性的高IGF-1水平与宫颈癌、卵巢癌和子宫内膜癌的发病率存在相关性。     

C-反应蛋白的临床意义

最近一项研究发现，CRP含量最高的人患结、直肠癌的危险性是最低者的两倍，并认为其是结、直肠癌的一个早期标记。如何将测量CRP含量与当前结肠癌筛检的预防策略相结合，尚缺大样本多中心的前瞻性研究。是否可作为术后检测复发和转移的指标，有待于进一步研究。