延胡索总生物碱的急性毒性及其镇痛作用研究

[目的]对延胡索总生物碱的小鼠急性毒性及镇痛作用进行评价。[方法]采用ICR小鼠单次给药毒性试验,观察延胡索总生物碱对小鼠的急性毒性反应和致死性,以Bliss法测定延胡索总生物碱对小鼠的半数致死量(median lethal dose,LD50)。采用醋酸扭体法考察延胡索总生物碱对外周的镇痛作用,ICR小鼠80只,雌雄各半,随机分成8组,分别为空白对照组、阳性对照组、延胡索乙素组、更高剂量组、高剂量组、中剂量组、低剂量组、更低剂量组,各组小鼠灌胃给药后1h,经腹腔注射0.6%冰醋酸0.2mL·20g-1,记录15min内小鼠的扭体次数,计算扭体次数抑制率;采用热板致痛试验考察延胡索总生物碱对中枢的镇痛作用,将筛选出的合格KM雌性小鼠80只随机分成8组,分组同上,各组于给药前重复测量痛阈3次,取平均值作为该小鼠给药前痛阈值,给药后30、90、180min各测定1次痛阈值。[结果]延胡索总生物碱灌胃给药对小鼠的LD50值为473.36mg·kg-1,95%置信区间为422.34～532.58mg·kg-1。与空白对照组比较,延胡索总生物碱各剂量组对小鼠扭体均具有显著的抑制作用,差异均具有统计学意义(P＜0.01);除更低剂量组外,延胡索总生物碱各剂量组镇痛作用均优于延胡索乙素(P＜0.01,P＜0.05);除更低剂量组外,延胡索总生物碱各剂量组均能明显延长热板所致小鼠的痛阈值(P＜0.01,P＜0.05),各组痛阈值随浓度的增加呈上升趋势,且给药剂量达到120mg·kg-1后,痛阈值基本不再随浓度变化而变化。[结论]延胡索总生物碱具有明显的镇痛作用,在一定剂量范围内可安全使用。     

骨碎补总黄酮对Masquelet技术诱导膜内血管形成的影响

【目的】探讨骨碎补总黄酮对Masquelet技术诱导膜内血管形成的影响。【方法】将72只SD大鼠随机分成4组,分别为模型组,药物高、中、低剂量组,每组18只。复制SD大鼠股骨中段临界骨缺损模型,并在骨缺损区行聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)骨水泥旷置诱导生物膜形成。从术后第1天开始,各药物组大鼠分别给予骨碎补总黄酮高、中、低剂量(0.44、0.22、0.11 g·kg~(-1)·d~(-1))灌胃治疗,模型组予等量生理盐水灌胃。给药6周后取材,采用苏木素—伊红(HE)染色法观察诱导膜组织病理变化,分别采用酶联免疫吸附(ELISA)法和实时荧光定量逆转录—聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测诱导膜中转化生长因子-β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白及其mRNA表达。【结果】骨碎补总黄酮高剂量组诱导膜组织形成的新生血管多于其余各组。药物高、中、低剂量组诱导膜组织中TGF-β1、VEGF的蛋白及其mRNA表达水平均明显高于模型组(P0.05),除VEGF mRNA指标外,其余指标的表达均具有剂量依赖性。【结论】骨碎补总黄酮在诱导膜形成期可促进TGF-β1及VEGF的表达,加速血管化进程,促进后期骨缺损重建。     

重楼总皂苷对多发骨折-脂多糖两次打击模型大鼠血清细胞因子水平的影响

目的：探讨重楼总皂苷（RPTS）对多发骨折-脂多糖两次打击模型大鼠血清TNF-α、IL-1β及IL-6水平的影响。方法：68只Wistar大鼠随机分成5组,除空白对照组外,其余各组按多发骨折-脂多糖两次打击模型标准制模。制模成功后1h,除空白对照组和模型对照组外各组予以不同浓度的RPTS灌胃,干预后6h采血,以ELISA法检测血清中TNF-α、IL-1β及IL-6浓度。结果：大鼠血清TNF-α、IL-1β及IL-6浓度,模型对照组与空白对照组相比较明显升高（P〈0.001）,而RPTS各干预组与模型对照组相比较却明显下降（P〈0.001）,差异均有统计学意义。结论：重楼总皂苷可以降低多发骨折-脂多糖两次打击模型大鼠血清中的TNF-α、IL-1β及IL-6水平。     

正交试验法优化珠子参总皂苷提取工艺

目的优选珠子参总皂苷的提取工艺,为珠子参中皂苷类化合物的开发利用提供理论依据。方法采用紫外分光光度法建立珠子参中总皂苷含量的测定方法,检测波长540 nm,并通过正交试验考察乙醇浓度、溶剂倍量、提取时间及提取次数对珠子参总皂苷提取工艺的影响。结果珠子参总皂苷的线性范围为0.052~0.182 mg,平均加样回收率为98.64%。珠子参总皂苷最佳提取工艺为加入70%的乙醇10倍量,提取3次,每次提取1 h,平均收率12.32%。结论建立的紫外分光光度法检测珠子参总皂苷含量方法准确可靠,优选的珠子参总皂苷提取工艺简便、稳定可行。     

中药穴位贴敷对中风后便秘的预防效果研究

【目的】探讨中药穴位贴敷预防中风后便秘的临床效果。【方法】采用随机双盲对照的研究设计方案,将96例中风阳类证患者随机分为观察组和对照组各48例。2组患者均在中风疾病治疗的基础上进行预防便秘的常规护理,对照组给予安慰剂穴位贴敷治疗,观察组给予自制的大黄芒硝敷脐贴穴位贴敷治疗。观察2组患者便秘发生率、使用缓泻剂及不良反应情况。【结果】（1）经干预后,观察组在第7天、第14天的便秘发生率均低于对照组（P＜0.05或P＜0.01）。（2）干预后第7天和第14天,观察组的Bristol大便性状评分均较干预前显著提高（P＜0.05）,而对照组提高不明显（P＞0.05）,观察组在改善大便性状方面优于对照组（P ＜0.05）。（3）观察组使用缓泻剂的例次较对照组显著减少,差异有统计学意义（P＜0.05）。（4）对照组的不良反应发生率为6.25%,观察组为8.33%,差异无统计学意义（P＞0.05）;且所有患者的不良反应症状均较轻,未有中止治疗者。【结论】中药穴位贴敷预防中风后便秘效果好,操作简单且安全。     

骨碎补总黄酮对牵张成骨过程中骨形态发生蛋白-2和转化生长因子-β1表达的影响

【目的】探讨骨碎补总黄酮对家兔股骨牵张成骨的影响。【方法】选用健康家兔32只,随机分为治疗组和对照组,每组16只。行单侧股骨牵张术,以自制延长器固定。经7 d延迟期,以1 mm/d的速度牵张,2次/d,连续10 d。治疗组动物自术后第1天用骨碎补总黄酮溶液灌胃,至实验结束。固定28 d后处死动物,留取标本,行组织学观察及免疫组织化学检测。【结果】治疗组新生骨组织成熟骨质区域增大,成骨细胞数、骨小梁面积百分比均显著高于对照组,骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和转化生长因子-β1(TGF-β1)呈棕色深染,染色程度显著高于对照组。【结论】骨碎补总黄酮能有效地加速骨牵张中新生骨质的生成与成熟。     

不同半夏炮制品麻辣毒性与草酸钙针晶含量关系的研究

目的:研究半夏不同炮制饮片规格中草酸钙针晶含量与其麻辣毒性的关系。方法:高效液相色谱法测定半夏各炮制品中草酸钙针晶含量,采用家兔眼结膜刺激性实验方法,比较半夏各炮制品的刺激性作用。结果:不同半夏炮制品中草酸钙针晶平均含量:生半夏2.77%法半夏1.79%清半夏0.77%姜半夏0.44%;各炮制品的刺激性:生半夏法半夏清半夏姜半夏。结论:炮制降低草酸钙针晶含量的同时降低半夏毒性,炮制方法不同草酸钙针晶含量降低程度不同;半夏麻辣毒性与草酸钙针晶含量密切相关,并呈正相关性。     

知母饮片炮制前后黄酮类和皂苷类成分变化研究

目的:测定知母饮片炮制前后3个黄酮类和2个皂苷类成分变化。方法:采用高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)测定3个黄酮类成分,色谱柱为岛津Intetsil ODS-3(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%冰醋酸,梯度洗脱,进样量20μL,流速1.0 mL/min,柱温30℃;采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定2个皂苷类成分,色谱柱为岛津Intetsil ODS-3(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%冰醋酸,梯度洗脱,进样量10μL,流速1.0 mL/min,氮气流量2.5 mL/min,蒸发温度80℃。结果:知母饮片炮制后知母皂苷BⅡ、新芒果苷、芒果苷含量下降,知母皂苷AⅢ含量上升,异芒果苷含量相对稳定。结论:知母饮片炮制后部分知母皂苷BⅡ会转化成知母皂苷AⅢ,新芒果苷、芒果苷会转化成其他成分,异芒果苷结构相对稳定,不易转化成其他成分。     

张永华教授应用半夏类方治疗不寐的临证经验

[目的]总结浙江省名中医张永华教授应用半夏类方治疗不寐的临证经验,提高不寐的临床疗效。[方法]通过跟师学习,记录和整理张永华教授运用半夏类方治疗不寐的医案,结合相关古籍资料及现代文献研究,研究半夏类方所主不寐的病机、半夏体质的主要特征以及半夏类方的应用,最终分析总结张永华教授运用半夏类方辨证治疗不寐的临床经验,并通过验案佐证。[结果]张永华教授认为,不寐的病机与中焦不畅、阳不入阴有关,而半夏具有化痰降逆、通利中焦等功效。通过配伍,半夏秫米汤、半夏枯草煎、半夏厚朴汤、黄连温胆汤、半夏泻心汤等半夏类方可通过化痰降逆、通利中焦、调和阴阳,发挥治疗不寐的效果。所举医案,患者为胆胃不和、痰热中阻之不寐,治以理气化痰、清热安神之法,依次以半夏类方黄连温胆汤及黄连温胆汤合半夏厚朴汤加减治疗,效果明确。[结论]张永华教授运用半夏类方药辨治属半夏体质的不寐疗效显著,经验值得临床传承及推广学习。     

HPLC-UV法同时测定羌活酚酸和香豆素类成分含量

[目的]建立同时测定羌活酚酸(新绿原酸、绿原酸和阿魏酸)和香豆素(羌活醇和异欧前胡素)两类成分的高效液相色谱-紫外分析法(HPLC-UV),为羌活药材的质量评价提供技术支撑。[方法]Agilent Zorbax SB-C18反相色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸水,检测波长330 nm,进样量5μL,流速1 m L/min。[结果]两类成分具有良好的线性关系,方法学验证均符合要求。[结论]该方法简单易行,重复性好,专属性强,可用于羌活药材的质量控制。