KAI1基因抑制胰腺癌转移的体内实验

目的 研究瘤体注射携带KAI1基因的腺病毒(Ad-KAI1)抗胰腺癌转移的作用.方法 首先建立胰腺癌荷瘤裸鼠模型,分别将其分为生理盐水对照组、Ad组和Ad-KAI1组.从成瘤第10天开始,每7 d注射1次,共注射3次,观察肿瘤的重量和体积,肝、肺重及病理改变.结果 3组移植瘤的重量和体积无显著差异.Ad-KAI1组肺重(0.366±0.041)g,肝重(1.35±0.21)g;Ad组肺重(0.57±0.065)g,肝重(1.58±1.828)g;对照组肺重(0.66±0.13)g,肝重(1.95±0.34)g.Ad-KAI1组与对照组差异显著(t=5.984,P<0.05),Ad组与对照组差异无显著性(t=1.089,P>0.05).Ad-KAI1组肺转移灶平均(1±1)个,肝转移灶平均(2±1)个,淋巴结转移灶平均(2±2)个;Ad组分别为(6±2)个、(5±1)个和(10±2)个;对照组分别为(7±2)个、(6±2)个和(11±3)个.Ad-KAI1组转移灶显著少于对照组(t=7.44、4.34、8.16,P<0.05),而Ad组与对照组无显著差异(t=0.92、0.64、0.42,P>0.05).结论 Ad-KAI1肿瘤内直接注射具有抑制胰腺癌转移的作用.     

Laparoscopic hepatic left lateral Iobectomy combined with fiber choledochoscopic exploration of the common bile duct and traditional open operation

AIM:To investigate the possibilities and advantages of laparoscopic hepatic left lateral Iobectomy combined with fiber choledochoscopic exploration of the common bile duct compaired with traditional open operation.METHODS:Laparoscopic hepatic left lateral Iobectomy combined with fiber choledochoscopic exploration of the common bile duct and traditional open operation were performed in two groups of patients who had gallstones in the left lobe of liver and in the common bile duct.The hospitalization time,hospitalization costs,operation time,operative complications and post-operative liver functions of the two groups of patients were studied.RESULTS:The operation time and post-operative liver functions of the two groups of patients had no significant differences,while the hospitalization time,hospitalization costs and operative complications of the laparoscopic hepatic left lateral Iobectomy combined with fiber choledochoscopic exploration in the common bile duct group were significantly lower than those in the traditional open operation group.CONCLUSION:For patients with gallstones in the left lobe of liver and in the common bile duct,laparoscopic hepatic left lateral Iobectomy combined with fiber choledochoscopic exploration of the common bile duct can significantly shorten the hospitalization time,reduce the hospitalization costs and the post-operative complications,without prolonging the operation time and bringing about more liver function damages compared with traditional open operation.This kind of operation has more advantages than traditional open operation.     

胰腺癌组织SPARC基因CpG岛甲基化状态及临床意义

目的 检测胰腺癌SPARC基因CpG岛的甲基化状态及其与临床病理参数的关系.方法 收集17例胰腺癌及相应癌旁组织、6例CP和6例正常胰腺组织以及6例健康成人外周血液标本,抽提DNA,进行亚硫酸氢盐修饰,然后行甲基化特异性PCR,检测SPARC基因第一外显子区CpG岛的甲基化状态,并分析与肿瘤病理参数的关系.结果 健康人外周血白细胞DNA中SPARC基因第一外显子区CpG位点均无甲基化.正常胰腺、CP、胰腺癌及相应癌旁组织SPARC基因第2、3、4、5、6、7 CpG位点的甲基化率分别为61.6%、47.1%、37.5%、24.7%;第1,8、9、10、11、12 CpG位点的甲基化率分别为52.0%、28.7%、16.7%和0.胰腺癌SPARC基因甲基化率与正常胰腺、CP比较均差别非常显著(P＜0.001),与相应癌旁组织比较差别不显著.胰腺癌SPARC基因CpG岛甲基化与患者性别、年龄、危险诱因(如长期吸烟或饮酒、CP)、肿瘤大小、分化程度、TNM分期、淋巴结转移等均无显著差异.结论 胰腺癌SPARC基因第一外显子区CpG岛为高甲基化状态,可能为胰腺癌发生、发展的早期事件.     

Patient-reported outcomes in subjects with neuroendocrine tumors of the pancreas

AIM: To assess the patient-reported outcomes (PROs) of pancreatic neuroendocrine tumor (PNET) patients. METHODS: Fifty-one consecutive patients (21 male,30 female, 61.0 ± 10.3 years) with proven PNETs were studied. An SF-12 questionnaire capable of exploring the physical (PCS) and mental (MCS) aspects of daily life was used. Four questionnaires were also used [12 items General Health Questionnaire (GHQ-12) for nonpsychotic psychiatric disorders, State Trait Anxiety Inventory (STAI) Y-1 and Y-2 for anxiety and BDI-Ⅱ for depressive symptoms] to explore the psychological aspects of the disease. Forty-four sex- and age-matched Italian normative subjects were included and evaluated using the SF-12, STAI Y-1 and Y-2 questionnaires.RESULTS: Seven patients refused to participate to the study; they were clinically similar to the 44 participants who agreed to complete the questionnaires. PNET patients had a PCS score (44.7 ± 11.0) were not significantly different from the norms (46.1 ± 9.9, P = 0.610), whereas the MCS score was significantly lower in patients (42.4 ± 13.0) as compared to the norms (48.2 ± 9.8, P = 0.036). GHQ-12 identified 11 patients (25.0%) as having non-psychotic psychiatric disorders. The STAI scores were similar in the patients and in the normative population. Finally, BDI-Ⅱ identified eight patients (18.2%) with moderate depression and 9 (20.5%) with mild depression whereas 27 patients (61.4%) had no depression. CONCLUSION: The PNET patients had a good physical but an impaired mental component of their quality of life; in addition, mild or moderate depressive symptoms are present in about 40% of PNET patients.     

甲状腺功能亢进患者OGTT结果与胰岛β细胞功能状态的初步观察

目的探讨胰岛β细胞功能障碍在甲亢合并糖代谢紊乱发病过程中的作用。方法对6例正常人（NC组）、36例不同糖代谢紊乱的甲亢患者进行研究，测定空腹、60、120分钟血糖、胰岛素，并计算比较各组胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、胰岛β细胞功能指数（HOMA-β）、胰岛素敏感指数（ISI）。结果甲亢合并糖代谢紊乱组HOMA—IR明显高于NC组（P〈0.05），而ISI明显低于NC组（P〈0.05），甲亢糖尿病组HOMA-β明显低于NC组（P〈0.05）。结论甲亢合并糖代谢紊乱患者的胰岛素敏感性降低，严重患者胰岛β细胞功能降低；甲亢治疗后短期随访上述指标有所好转。     

快速交换系统在胆管取石中的应用研究

目的评价快速交换(RX)系统在内镜下逆行胰胆管造影(ERCP)治疗胆管结石中的应用价值。方法将2005年11月至2007年4月中国人民解放军总医院收治的154例胆管结石患者按结石和临床情况随机分为两组,其中一组应用传统器械(76例),另一组应用RX系统(78例),分别记录并统计分析两组在取石过程中的导丝脱出率、器械交换时间、网篮及球囊插入胆管的难易程度、一次取石成功率和术后相关并发症发生情况。结果RX组较传统组明显降低了导丝脱出率(%)(2.2±1.4对9.5±2.8,P<0.01)和加快了器械交换时间(s)(124±41对302±69,P<0.01);而且,与传统组比较,RX系统的网篮(P<0.01)及球囊(P<0.05)插入胆管也相对容易;但两组的一次结石取净率差异无显著性意义,RX组和传统组分别为88.46%(69/78)和81.58%(62/76);另外两组均有个别患者发生了术中乳头少量出血和术后胰腺炎。结论RX系统缩短了治疗时间,方便了胆管取石操作,提高了治疗效率。     

胰腺癌中表观遗传修饰研究进展

胰腺癌的形成受遗传学和表现遗传修饰的影响.基因突变或缺失(遗传学)参与肿瘤的形成,DNA甲基化、组蛋白修饰和RNA干扰等(表观遗传修饰)调节基因表达.随着基因组筛选技术的发展,胰液中DNA甲基化定量检测是诊断胰腺癌的潜在工具,以DNA甲基化和组蛋白乙酰化为基础的表观遗传学是胰腺癌治疗领域中的新靶点.本文对胰腺癌发生发展过程中出现的表遗传修饰异常,以及其生物学和临床意义前景作一介绍.     

靶向封闭EEF1A2对胰腺癌细胞凋亡的作用及其机制研究

目的 观察靶向封闭EEF1A2基因对胰腺癌细胞株凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 体外转录制备2对EEF1A2 siRNA,应用脂质体技术转染胰腺癌细胞株BxPC-3,半定量RT-PCR、蛋白质印迹法检测转染前后EEF1A2基因表达的变化.运用膜联蛋白V/碘化丙啶法检测细胞凋亡率;蛋白质印迹法检测细胞中caspase-3、caspase-8、caspase-9、聚二磷酸腺苷核糖多聚酶(PARP)细胞色素C和Bid等凋亡相关蛋白表达变化.结果 2对EEF1A2 siRNA均能有效降低BxPC-3细胞中EEF1A2的表达,其中第2对siRNA静默效果更佳,EEF1A2在mRNA和蛋白质水平的表达抑制率均达75%左右.抑制BxPC-3细胞中EEF1A2的表达后,细胞的早期凋亡率为15.28%±3.65%,显著高于阴性对照组的10.11%±3.05%和空白组的9.41%±4.14%,同时伴随出现caspase-3、caspase-8、caspase-9、PARP和Bid的蛋白活化增强和细胞色素C表达增加.结论 抑制EEF1A2表达能明显诱导胰腺癌细胞BxPC-3的凋亡,而死亡受体途径和线粒体途径的激活可能均参与凋亡的发生.     

朊蛋白(PrP~C)在胰腺癌中的表达及临床意义

目的探讨朊蛋白(PrPC)在胰腺癌组织中表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测PrPC在胰腺癌及其对应正常胰腺组织的表达,分析其表达强度与性别、分化、临床分期及转移等临床病理资料之间的关系。结果PrPC在胰腺癌组织中和正常胰腺组织中的表达有显著差异;在高分化胰腺癌组织中表达明显低于中、低分化肿瘤组织,在转移组阳性表达高于非转移组(P0.05),但在性别间差异没有统计学意义。结论PrPC在胰腺癌中表达与其发生、临床分期及转移密切相关,在其发生发展中可能起着重要作用,有望作为早期诊断及靶向治疗的分子标记。     

新生期小鼠胰岛细胞凋亡及其机制的研究

目的 观察新生期小鼠胰岛细胞凋亡的变化特点并分析细胞凋亡相关基因的表达差异,初步探讨相关机制.方法 采用胶原酶消化法分离纯化第1、3和8周小鼠胰岛细胞,以磷脂结合蛋白V-绿色荧光素/碘化丙啶双染法流式细胞术检测细胞凋亡率.透射电镜观察胰岛细胞凋亡形态,原位末端脱氧核苷酸转移酶标记（Tunel）/胰岛素免疫荧光双染法检测凋亡.采用实时定量PCR技术检测凋亡相关基因mRNA的表达.采用Western blotting技术检测促凋亡基因和抗凋亡基因的表达.多组间统计数据比较采用单因素方差分析.结果 （1）新生期小鼠胰岛细胞凋亡率在3周时显著增加,明显高于1周和8周[分别为（10.53±2.61）％、（1.80±0.69）％、（3.26±0.94）％,F=32.09,P＜0.01].透射电镜结果显示新生第3周小鼠胰岛细胞核出现凋亡早期改变.3周时Tunel/胰岛素双阳性细胞数明显高于1周和8周.（2）新生期小鼠胰岛细胞凋亡相关基因的表达呈动态变化,3周时,促凋亡基因Fas和FasL的mRNA表达均明显高于1周和8周（分别为1.53±0.21、1.00±0.00、0.46±0.24,F=24.85,P＜0.01;2.63±0.56比1.00±0.00、0.52±0.14,F=32.77,P＜0.01）,抗凋亡基因Bcl-2 mRNA表达明显低于1周和8周（分别为0.30±0.23、1.00±0.00、1.71±0.00,F=78.06,P＜0.01）.（3）3周时,Fas、FasL和裂解的Caspase-3蛋白表达均明显高于1周和8周（分别为2.05±0.16、1.00±0.00、0.59±0.24,F=61.47,P＜0.01;3.54±0.86、1.00±0.00、0.72±0.26,F=27.04,P＜0.01;5.74±0.59比1.00±0.00、3.11±0.20,F=128.79,P＜0.01）;Bcl-2蛋白表达明显低于1周和8周（0.62±0.13比1.00±0.00、1.90±0.10,F=151.08,P＜0.01）.结论 Fas/FasL以及Bc1-2介导的细胞凋亡信号通路可能参与新生期小鼠胰岛细胞凋亡的调控.