三七根茎的化学成分研究

目的:研究五加科人参属植物三七Panaxnotoginseng(Burk)F.H.Chen根茎中的化学成分。方法:利用大孔吸附树脂柱、硅胶柱、RP-8和RP-18柱进行化合物的分离纯化,根据其理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果:从三七根茎中分离得到8个化合物,分别鉴定为:人参皂苷Rh4(ginsenoside Rh4,Ⅰ),人参皂苷Rh1(ginsenosideRh1,Ⅱ),人参皂苷Re(ginsenoside Re,Ⅲ),三七皂苷R1(notoginsenoside R1,Ⅳ),人参皂苷Rd(ginsenoside Rd,Ⅴ),人参皂苷Rb1(ginsenoside Rb1,Ⅵ),三七皂苷S(notoginsenoside S,Ⅶ),三七皂苷T(notoginsenoside T,Ⅷ)。结论:化合物Ⅰ为首次从该植物中分离得到,化合物Ⅶ和Ⅷ为首次从三七根茎中分离得到。     

人参抗心律失常作用机制的研究进展

人参Panax ginseng作为传统中药,具有较好的抗心律失常作用.从多离子通道阻滞作用、抑制炎症反应、抑制心肌纤维化和重构以及调节自主神经方面,对近10年人参、人参皂苷及含人参的中成药抗心律失常作用机制的研究进展进行综述.为以人参为基础,探究高效、低毒的抗心律失常中药的实验研究及临床用药提供参考.     

反相离子对色谱法测定三七中三七素含量

建立反相离子对色谱法测定三七中三七素含量。通过超声提取样品中的三七素,并采用四丁基氢氧化铵离子对试剂与反相高效液相色谱法结合直接测定三七素含量。确定超声提取优化条件为物液比为1:20,连续超声提取2次,每次15 min,3500 r·min^-1,离心15 min。三七不同生长年限、产地、部位、以及同属植株中三七素含量均有差异:一年生三七茎叶三七素含量最高;红河州样品三七素含量高于文山州;真空冷冻干燥方式优于其他加工方式;三七高于其他同属植株。该检测方法操作简便,分离度好,稳定性好,适用于三七素含量直接测定,为三七中三七素的质量标准控制提供参考。     

三七总皂甙改善高血压病左室舒张功能的临床与实验研究

目的；研究三七总皂甙对高血压病左室舒张功能的影响及其可能机理。方法：测定３０例Ｉ期ＥＨ患者联合运用ＴＳＰＮＳ和开搏通治疗前后的左室舒张功能（Ｅ峰、Ａ峰、Ｅ／Ａ、Ｅ面积分数、Ａ面积分数）、左室心肌重量指数（ＬＶＭＩ）、红细胞内Ｃａ＾２＋及其膜上Ｃａ泵活性；并以单用开搏通治疗为自身对照。同时通过对ＴＳＰＮＳ及生理盐水治疗ＳＨＲ大鼠的疗效的对比研究，以月龄相仿的ＷＫＹ大鼠为正常对照。同时通过对ＴＳＰＮＳ     

注射用血栓通体外对家兔血小板聚集的影响

目的研究注射用血栓通(冻干,主要成分为三七总皂苷,质量分数为95%)体外对二磷酸腺苷(ADP)、花生四烯酸(AA)、血小板活化因子(PAF)诱导家兔血小板聚集的影响。方法采用Born法,检测ADP、AA、PAF诱导的家兔血小板聚集率。结果与对照组比较,注射用血栓通7.2、14.4 mg/mL组能显著抑制ADP、AA、PAF诱导的兔血小板聚集率(P<0.01),注射用血栓通3.6 mg/mL组能显著抑制ADP诱导的兔血小板聚集率(P<0.01)。结论注射用血栓通具有体外抑制家兔血小板聚集的作用。     

生晒参乙醇提取物直接酶法转化及液质分析

目的比较糖苷酶制剂直接催化水解生晒参乙醇提取物中人参皂苷部位转化制备高活性次生皂苷的能力。方法利用7种糖苷酶制剂直接水解生晒参乙醇提取物中天然皂苷部位,建立HPLC法评价其转化能力及采用LC/MS联用分析对特征峰加以指认。结果建立的HPLC方法可同时测定8种皂苷成分。糖苷酶制剂对生晒参乙醇提取物中天然皂苷部位转化能力分别为蜗牛酶SE07,62.1%;果胶酶PE05,62.1%;果胶酶PE06,51.6%;白酒酶LE04,31.5%;纤维素酶CE02,22.6%;纤维素酶CE01,9.7%。结论糖苷酶制剂可以直接转化人参皂苷部位成高活性次生皂苷部位。蜗牛酶与果胶酶可以规模化制备次生皂苷。     

三七总皂苷传递体的制备及其治疗大鼠急性软组织损伤作用研究

目的优化三七总皂苷(PNS)传递体的处方,验证其治疗大鼠急性软组织损伤的作用。方法采用薄膜分散法制备PNS传递体,以传递体弹性为指标,通过均匀设计法优化其处方工艺;分别以挤出法、离心超滤法测定传递体的弹性与包封率;通过对实验动物的损伤症候指数、血液流变学及组织形态学的观测评价传递体对大鼠急性软组织损伤的治疗作用,并与阳性对照药青鹏软膏进行比较。结果 PNS传递体最佳处方为PNS 100 mg、胆固醇15 mg、大豆磷脂120 mg、维生素E 2 mg、中药挥发油(柠檬烯-柠檬醛4∶1)80 mg、水化液[磷酸盐缓冲液(PBS),p H 5.0]10 m L;以最佳处方制得的成品弹性为(2.74±0.32)min、粒径为(123.60±0.36)nm、Zeta电位为(-36.67±2.29)m V,人参皂苷Rg1与人参皂苷Rb1的包封率分别为(82.42±0.69)%、(94.40±0.74)%;药效学实验结果显示,与模型组相比PNS传递体可显著降低实验动物的损伤证候指数(P0.01)、全血黏度及血浆黏度(P0.05),有效改善病灶部位组织形态。结论所得PNS传递体粒径适宜,弹性与药物包封率良好,疗效确切。     

不同三七饮片中六六六、滴滴涕农药残留量的分析

目的建立三七饮片中有机氯农药六六六、滴滴涕的测定方法,为三七饮片中有机氯农药六六六、滴滴涕残留量监测提供可行的分析手段。方法采用毛细管气相色谱法测定六六六、滴滴涕含量,采集不同三七饮片27份进行检测。结果参照食品中六六六、滴滴涕残留量的测定方法(GB/T5009.19-1996)测定,六六六、滴滴涕在1~100μg/mL的浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,检测结果表明不同三七饮片中的农药残留量普遍低于三七国家标准(GB 19086-2003)中的农药残留量。结论毛细管气相色谱法测定三七饮片中有机氯农药六六六、滴滴涕的测定方法可靠。     

竹节参鲨烯环氧酶基因的克隆及生物信息学分析

目的 克隆竹节参Panax japonicus鲨烯环氧酶基因（squalene epoxidase,PjSE）的全长cDNA序列,进行生物信息学分析和原核表达。方法 设计特异性引物,从竹节参中克隆得到PjSE序列;以PjSE基因序列作为输入数据,利用多序列同源比对等生物信息学分析工具进行序列分析;构建重组原核表达载体pCold-PjSE,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行蛋白诱导表达;采用实时荧光定量PCR技术分析该基因在竹节参不同组织中的相对表达量。结果 PjSE基因开放阅读框长度为1884 bp,编码627个氨基酸,PjSE蛋白相对分子质量为68 639.49,初步预测其具有跨膜结构域,可能定位在叶绿体上;聚丙烯凝胶电泳结果显示诱导表达蛋白的相对分子质量大小与预期结果一致;该基因在竹节参叶中表达量最高,须根次之,根中表达量最低。结论 PjSE基因的克隆、生信分析及原核表达研究,不仅有助于丰富竹节参中该类功能蛋白的种类和数量,完善竹节参皂苷类成分的生物合成途径,也为后期开展竹节参皂苷的异源合成提供了可供选择的关键基因元件。     

药用植物DNA标记辅助育种(一):三七抗病品种选育研究

药用植物DNA标记辅助育种以DNA多态性为基础,依据分子杂交、聚合酶链式反应、高通量测序等技术,筛选与高产、优质、抗逆等表型关联的DNA片段作为标记,辅助新品种的选育。该研究采用DNA标记辅助育种结合系统选育的技术,选育首个三七抗病新品种"苗乡抗七1号"。结果表明,基于RAD-Seq技术检测出抗病品种包含12个特异SNP位点,经验证record_519688位点与三七抗根腐病相关,包含此位点的基因片段可作为抗病品种的遗传标记辅助三七系统选育;与常规栽培种相比,抗病品种种苗根腐病及锈腐病的发病率分别下降83.6%,71.8%;二年生及三年生三七根腐病的发病率分别下降43.6%,62.9%。此外,依据与抗病关联的SNP筛选三七潜在的抗病群体,该模式扩大目标群体并提高选育效率。药用植物DNA标记辅助育种将加快药用植物新品种选育及推广的进程,保障中药材产业健康发展。