Survivin基因沉默对结直肠癌PTTG mRNA的影响

目的探讨重组载体介导的Survivin小干扰RNA(siRNA)对人结肠癌细胞株Lovo中PTTG mRNA的影响。方法前期成功构建的Survivin特异性siRNA真核表达载体转染结肠癌Lovo细胞后,采用实时荧光定量PCR检测PTTG mRNA的表达水平。结果 Survivin基因沉默后24～72 h,与正常对照组相比,Survivin mRNA表达明显降低(P<0.05);基因沉默24和48 h后,pGenesil-2-Survivin 1组和pGenesil-2-Survivin 2组PT-TG mRNA表达显著低于正常对照组(P<0.05)。结论 Survivin基因沉默后结直肠癌细胞PTTG mRNA表达显著下调,提示Survivin和PTTG可能相互促进共同参与结直肠癌的发生发展。     

PTTG靶向siRNA表达载体构建及其沉默效率评价

目的：构建针对人脑胶质瘤细胞系U251的高效率沉默垂体瘤转化基因(PTTG)的小分子干扰RNA(siRNA)表达载体。 方法：合成特异性干扰PTTG 的siRNA片段,并与pGenesil2 载体连接,构建PTTG干扰载体（pGenesil2-PTTG siRNA）。利用脂质体将其转染U251细胞,分为正常细胞对照组、HK阴性对照组和3个siRNA干扰组（pGenesil2-PTTG siRNA1、pGenesil2-PTTG siRNA2和pGenesil2-PTTG siRNA3）,应用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法和流式细胞术对转染后U251细胞中PTTG 的mRNA和蛋白表达水平进行分析。 结果：酶切证实PTTG-siRNA表达载体构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA结果一致;转染pGenesil2-PTTG siRNA后,3个干扰组的U251 细胞中PTTG基因和蛋白表达水平均较正常对照组显著降低（P<0.01）。 结论：成功构建了能高效率沉默PTTG 的RNAi表达载体;pGenesil2-PTTG siRNA高效地抑制了胶质瘤U251细胞中PTTG基因的表达。     

PTTG、MMP-2在人脑星形细胞瘤中的表达及意义

目的探讨PTTG、MMP-2在人脑星形细胞瘤中的表达,研究其与病理分级的关系,分析二者在表达过程中的相互关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测PTTG、MMP-2在正常脑组织及在不同病理级别人脑星形细胞瘤中的表达。结果 PTTG、MMP-2在2组阳性表达比较差异有统计学意义(P<0.05),表达阳性率随病理级别的增高呈增高趋势,低度恶性组与恶性组比较差异有统计学意义(P<0.05),而恶性组与高度恶性组比较差异无统计学意义(P>0.05),二者在表达过程中存在正相关(r=0.504,P<0.05)。结论 PTTG和MMP-2在人脑星形细胞瘤的发生发展过程中存在正相关性,PTTG可能通过MMP-2促进肿瘤的发生和发展。     

乳腺良恶性病变PTTG、VEGF-C和MMP-14表达及临床病理意义

目的 研究乳腺浸润性导管癌、乳腺良性病变组织中垂体瘤转化基因(PTTG),基质金属蛋白酶-14(MMP-14)和血管内皮生长因子-C(VEGF-C)的表达水平,探讨其临床病理意义.方法 40例乳腺浸润性导管癌、20例乳腺良性病变手术切除标本常规石蜡包埋切片,PTTG、MMP-14和VEGF-C染色方法为免疫组化SP法.结果 乳腺浸润性导管癌PTTG、VEGF-C和MMP-14表达阳性率(75.0%、85.0%和77.5%)明显高于乳腺良性病变(20.0%、30.0%和25.0%,P<0.01),有淋巴结转移病例PTTG、VEGF-C和MMP-14表达阳性率明显高于无淋巴结转移病例(P<0.01),而在不同年龄、肿瘤大小、分化程度组间差别无统计学意义(P>0.05).乳腺浸润性导管癌中PTTG与VEGF-C和MMP-14表达呈高度一致性(r=0.586,0.657,P<0.01),VEGF-C与MMP-14表达亦呈高度一致性(r=0.649,P<0.01).结论 PTTG、VEGF-C和MMP-14的表达可能是反映乳腺浸润性导管癌发生、发展、生物学行为及预后的重要生物学指标,三者有望成为乳腺癌抗淋巴管治疗的新靶点.     

口腔鳞状细胞癌中垂体瘤转化基因1表达及其对上皮-间质转化的作用研究

目的 探讨口腔鳞状细胞癌（OSCC）中垂体瘤转化基因 1（PTTG1）表达及其对上皮-间质转化（EMT）的作用。方法 应用逆转录及定量PCR及蛋白印迹法检测58例OSCC组织及配对癌旁组织中PTTG1的表达;并采用RNAi技术下调口腔癌SCC9细胞系中PTTG1的表达,检测其对细胞中EMT相关基因E-cadherin表达的影响。结果 PTTG1在OSCC组织与配对癌旁组织中的相对表达量分别为（3.046 ± 1.137）和（0.975 ± 0.434）,差异有统计学意义（P < 0.05）。OSSC组织中PTTG1的高表达与肿瘤临床分期及伴发淋巴结转移密切相关（P < 0.05）。下调人口腔癌SCC9细胞系中的PTTG1的表达,细胞中E-cadherin的表达也减少,差异有统计学意义（P < 0.05）。结论 OSCC患者肿瘤组织中存在PTTG1的高表达,其高表达与肿瘤EMT存在相关性。     

垂体肿瘤转化基因在大肠正常黏膜、腺瘤及大肠癌组织中的表达及意义

目的探讨垂体肿瘤转化基因(PTTG)的表达与大肠癌发生、发展的关系。方法采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术及免疫组织化学法检测20例大肠正常黏膜、20例大肠腺瘤、80例大肠癌组织中PTTG mRNA及蛋白的表达水平。结果大肠癌组织中PTTG mRNA及蛋白的表达量明显高于大肠腺瘤和正常黏膜组织(P均<0.01),大肠腺瘤组织亦高于正常黏膜组织(P<0.01),且PTTG mRNA及蛋白的表达量与大肠癌浸润深度、淋巴结转移呈正相关。结论PTTG的高表达在大肠癌的发生、发展过程中起到重要作用,可作为判断大肠癌发生发展的预测因素。     

PTTG在原发性胆囊癌组织中表达的研究

目的　探讨垂体肿瘤转化基因 (PituitaryTumorTransformingGene ,PTTG)在原发性胆囊癌中的表达及其临床病理意义。方法　应用免疫组织化学法 ,检测 41例原发性胆囊癌及 2 0例慢性结石性胆囊炎中PTTG表达水平 ,并结合患者的临床病理资料进行统计学分析。结果　在原发性胆囊癌中PTTG阳性表达率为 85 .4%,其阳性率及表达等级均明显高于慢性胆囊炎中的表达情况 (P <0 .0 5 ) ;PTTG表达等级与胆囊癌的Nevin分期和淋巴结转移密切相关 (P <0 .0 5 ) ;PTTG表达与胆囊癌Nevin分期成等级正相关 (r =0 .5 3 3 ,P <0 .0 5 ) ;PTTG表达阳性患者的累积生存期明显低于阴性者 (P <0 .0 5 )。结论　PTTG可能在胆囊癌的发生、发展及预后中起着重要作用。PTTG表达的检测有助于原发性胆囊癌恶性程度和预后的判断 ,以进一步指导临床诊疗。     

Pituitary‐tumour‐transforming‐gene 1 expression in testicular cancer

Genomic instability is a feature of germ cell tumours. The pituitary‐tumour‐transforming‐gene 1 (PTTG1) is the major effector of chromosome segregation during mitosis, protecting the cell from aneuploidy. The protein expression of this gene has been evaluated in testicular tumours by immunohistochemistry. Formalin‐fixed and paraffin‐embedded specimens of testicular tissues from 83 patients undergoing therapeutic orchidectomy for seminomas (n = 53), embryonal carcinoma (n = 10), yolk sac tumour (n = 10) and teratoma (n = 10) were examined. Seminoma was associated with in situ carcinoma (CIS) in 23 samples. PTTG1 immunostaining was performed using rabbit anti‐PTTG1 as a primary antibody. In CIS, only isolated cells showed nuclear staining for PTTG1. In the peripheral area of seminoma, PTTG1 was mostly detected as localised in the nucleus; in the central area of seminoma, PTTG1 staining was more intense in cytoplasm. PTTG1‐positive cells were also present in the areas of seminoma infiltration. On the other hand, in embryonal carcinoma, cells had a diffuse positive immunostaining, mainly cytoplasmatic, while we did not observe an expression of PTTG1 in yolk sac tumour and mature teratoma. We firstly identified the PTTG1 expression pattern in normal testis, CIS and testicular cancer. Further investigation is needed to clarify the functional activity of PTTG1 in testicular oncogenesis.     

CD133、肝细胞生长因子和垂体肿瘤转化基因在大肠癌中的表达及临床意义

目的：探讨CD133、肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）和垂体肿瘤转化基因（pituitary tumor transforming gene,PTTG）在大肠癌患者肿瘤组织、肿瘤旁正常组织和淋巴结中的表达及其与肿瘤患者临床之间的关系。方法应用免疫组化法检测70例大肠癌患者的肿瘤组织、肿瘤旁的正常组织和淋巴结,分别检测CD133、HGF、PTTG的表达情况。结果 CD133、HGF、PTTG三种蛋白均在肿瘤组织中高表达,且表达均与大肠癌的淋巴结转移及术后生存期有关（P＜0．05）,而与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、临床病理分期及肿瘤大小无关（P＞0．05）;三种蛋白的表达两两之间无相关性。结论 CD133、HGF、PTTG三种蛋白对于大肠癌的诊断及鉴别诊断有一定的意义;三种蛋白的表达对大肠癌患者的术后复发、转移及其预后可能有指导意义。