Nucleostemin基因在姜黄素抑制胃癌SGC-7901细胞增殖中的意义

目的探讨NS基因在姜黄素抑制胃癌SGC-7901细胞株增殖和诱导凋亡中的作用。方法不同浓度姜黄素作用于胃癌SGC-7901细胞株,利用MTT法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR法检测姜黄素作用前后NS基因表达量的变化,流式细胞仪法检测细胞周期和细胞凋亡情况。结果姜黄素能显著抑制体外培养的胃癌SGC-7901细胞株增殖,并呈量效和时效关系;流式细胞术显示G0/G1期细胞增加,S期细胞减少,检出亚二倍体凋亡峰;RT-PCR显示NS基因表达量下降。结论姜黄素显著抑制胃癌SGC-7901细胞株增殖,并促进凋亡,其发生可能与NS基因表达下降有关。     

RNA 干扰Nucleo stemin 基因对人食管癌Eca-109 细胞株增殖影响的实验研究

 目的 筛选NS基因特异性siRNA阳性细胞克隆，研究NS基因特异性RNA干扰对Eca-109细胞株体外增殖能力的影响。方法 用脂质体法将NS特异性siRNA表达载体转染Eca-109细胞，Zeocin抗生素压力筛选后用PCR方法鉴定阳性克隆；MTT法检测各组细胞的生长增殖情况，RT-PCR方法检测NS基因表达量的变化情况。结果 与对照组比较，silencer组肿瘤细胞趋于分化，细胞增殖抑制率超过80％（P〈0．01），差异具有显著性；NS基因表达量下降。结论 NS基因特异性RNA干扰抑制人食管癌Eca-109细胞株体外增殖，使NS基因表达量下降。     

核干细胞因子的RNA干扰对胶质瘤U251细胞的影响

目的探讨U251细胞株中NS基因表达及被干扰后,U251细胞株在mRNA、蛋白表达水平及细胞增殖变化情况。方法考察U251细胞NS-mRNA和NS-protein的表达水平;合成人类NS基因siRNA片段;转染至U251细胞中,RT-PCR和Westernblot检测转染前后U251细胞中mRNA及蛋白表达水平;MTT检测细胞增殖率。结果 U251细胞NS-mRNA和NS-protein的表达分别为178.91%和97.55%;siRNA转染U251细胞后NS-mRNA抑制率60.79%,NS-protein抑制率94.00%;MTT结果显示干扰72h后细胞增殖抑制率为31.3%。结论 NS基因siRNA片段转染U251细胞后,NS基因表达被特异性沉默,细胞增殖受到抑制。     

食管癌Eca109细胞中Nucleostemin基因表达的实验研究

目的：研究Nucleostemin（NS）基因在食管癌Eca109细胞中的表达及凋亡作用。方法：提取各组食管癌细胞总RNA,用半定量RT-PCR方法检测NS基因的表达情况;用CCK-8法检测3组细胞增殖抑制率;TUNEL试剂盒法检测细胞凋亡情况。结果：与对照组比较,实验组细胞NS基因表达量下降,细胞增殖抑制率〉65%,细胞凋亡增加（凋亡指数为39.47%）差别具有统计学意义。结论：NS基因特异性RNA干扰使食管癌Eca109细胞中NS基因表达量下降,出现细胞增殖抑制,细胞凋亡增加。     

核干细胞因子基因在人肝癌组织及细胞中转录特征及临床意义

目的 研究核干细胞因子(nucleostemin,NS)基因在肝癌组织和细胞中的表达特性,探讨其在肝癌发生中的意义.方法 用PCR方法从人肝癌cDNA中分别进行NS片段和全长基因的扩增,并将扩增产物连接到pMD18-T载体进行测序验证;在40例肝癌和癌旁组织,以及3种肝癌细胞系cDNA中进行NS片段的PCR扩增及分析.结果 分别从肝癌cDNA克隆到了NS基因的部分片段(450 bp)及全长(1 650 bp);发现在肝癌组织中NS的表达高于癌旁组织,临床病例分析表明3期和4期病例NS基因上调表达显著高于下调表达;肝癌细胞株分析结果提示,NS基因随肝癌细胞转移能力的增加表达量增加.结论 NS基因参与肝癌细胞的增殖过程,对肝癌的发生起促进作用.     

核干细胞因子与肿瘤干细胞

恶性肿瘤是导致人类死亡的主要原因之一,但并非所有恶性肿瘤细胞均有致瘤性。肿瘤干细胞指具有自我更新和无限增殖潜力的少量细胞群体,与干细胞的特性类似。核干细胞因子（NS）基因在干细胞处于早期多潜能状态时高表达,细胞开始分化后,其表达几乎完全消失。此外,多种癌细胞中NS基因亦高表达,而在分化的成体组织中不表达。NS基因表达与癌细胞的恶性程度有关。本文就NS与肿瘤干细胞作一综述。     

Nucleostemin通过p53与非p53途径调控细胞增殖的研究进展

Nucleostemin(NS)是一种可在细胞核仁和核浆内穿梭的GTP结合蛋白,主要定位于核仁内,其在维持干细胞未分化状态、细胞周期进程、肿瘤细胞及干细胞的增殖与凋亡中发挥着重要作用。就NS调控细胞增殖的机制而言,目前仍存在争议。一部分研究认为,NS通过结合p53,发挥维持细胞增殖、抑制细胞凋亡的作用;另一部分研究则认为,NS通过细胞内其他通路及参与核糖体的生物合成,进而影响细胞的生物学功能。     

核干细胞因子的研究进展

干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化增殖潜能的原始细胞，根据干细胞的来源及分化潜能，可将干细胞分为胚胎干细胞和成体干细胞，肿瘤细胞无限增殖特性与干细胞相似，肿瘤可能通常起源于正常干细胞的转化，相似的信号通路可能既调节干细胞也调节癌细胞的自我更新，且肿瘤细胞中可能包含有“肿瘤干细胞。（cancer stem cells）．它们是一些极少的具有自我更新不定潜能的驱使肿瘤形成的细胞。正是这群特异性细胞促使肿瘤的产生和发展。     

Nucleostemin knocking-down causes cell cycle arrest and apoptosis in human T-cell acute lymphoblastic leukemia MOLT-4 cells via p53 and p21Waf1/Cip1 up-regulation

Objectives

Nucleostemin (NS), a recently discovered nucleolar protein, is essential for maintaining self-renewal and proliferation of embryonic and adult stem cells as well as cancerous cells. The aim of this study was to determine biological function of NS in MOLT-4 cells as a human T-cell acute lymphocytic leukemia (T-ALL) model.

Methods

Efficacy of a specific small interference RNA on NS depletion was studied by quantitative polymerase chain reaction and western blotting. The growth rate and viability were analyzed by trypan blue exclusion test. Fluorescent microscopy was used for detecting apoptosis. Cell cycle and apoptosis were mechanistically studied by flow cytometry and western blotting.

Results

Knockdown of NS inhibited proliferation, arrested the cell cycle, and induced apoptosis through p53 and p21^Waf1/Cip1 pathways in MOLT-4 cells.

Discussion

These findings demonstrate critical roles of NS in MOLT-4 cells and may implicate on its therapeutic potential in this human T-ALL model.