糖尿病肾损伤早期诊断的尿液联合检测

目的 通过对糖尿病（DM）患者尿液中微量白蛋白（mAlb）、β2微球蛋白（β2-MG）、N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶（NAG）、转铁蛋白（TRF）等进行检测，探讨其联合检测对糖尿病肾损伤早期诊断的临床意义。方法利用免疫比浊法、酶法检测50例健康体检者及204例DM患者尿液中mAlb排泄率、β2-MG、NAG、TRF含量，尿蛋白定性及血BUN、CR测定，并分组比较。结果血BUN、CR及尿蛋白阴性糖尿病患者尿液中mAlb、β2-MG、NAG、TRF均明显高于对照组（P〈0．01），后四项联合检测较单项检测阳性率高。结论尿液联合测定有助于了解DM患者的肾损伤情况，其对糖尿病肾病（DN）的预防和早期诊断有重要意义。     

血清γ-谷氨酰转移酶水平与冠状动脉病变严重程度的关系

目的 研究血清γ-谷氨酰转移酶(GGT)水平与冠状动脉病变严重程度的关系,为冠心病防治提供理论基础.方法 对156例冠心病或可疑冠心病患者通过冠状动脉造影确定冠状动脉病变严重程度,γ-谷氨酰-3羧基-4-硝基苯胺法测定血清GGT水平,根据血清GGT水平分为高GGT组和正常GGT组,同时调查其他可能的危险因素.结果 高GGT组糖尿病患者比例,TC、TG水平以及冠状动脉病变严重程度评分均显著高于正常GGT组.相关分析显示,血清GGT水平与冠状动脉病变严重程度呈正相关.Logiatic回归分析显示GGT对于严重冠状动脉病变OR值为1.112,P值为0.010.此外,年龄、糖尿病对于严重冠状动脉病变的OR值分别为1.048和4.357,P值分别为0.017和0.003.结论 血清GGT与冠状动脉病变严重程度相关,可能为严重冠状动脉病变的独立危险因素.     

长期饮用纯净水加重铅对大鼠海马NMDA受体以及空间学习记忆能力的抑制

目的 比较长期饮用纯净水和自来水对血脑铅蓄积以及铅神经毒性的差异.方法 断乳雄性SD大鼠104只,计算机编程完全随机化实验设计分为4对8组,饮水分别为自来水、纯净水、自来水含铅(醋酸铅)50 mg/L、纯净水含铅50 mg/L、自来水含铅200 mg/L、纯净水含铅200mg/L、自来水含铅800 mg/L、纯净水含铅800 mg/L.各组食物及其他处理因素完全一致.分别在12、24周时对大鼠进行Morris水迷宫实验中的定向航行、空间探索和可视平台实验.28周时处死大鼠取材,采用原子吸收分光一石墨炉法测定血铅和脑铅,采用RT-PCR法检测海马NMDA受体NR1、NR2A和NR2B亚基mRNA的表达.结果 铅染毒剂量相同时,不同的饮水对大鼠血铅的影响未显示差异,但饮用纯净水的大鼠脑铅均高于饮用自来水的大鼠,其中对照组及高铅组的增高差异具有统计学意义;饮用纯净水的大鼠其NR1、NR2A、NR2B亚基mRNA的表达均低于饮用自来水的大鼠,其中低铅组的NR2A亚基表达差异具有统计学意义;24周水迷宫实验中,饮用纯净水的大鼠其定向航行实验的逃逸潜伏期长于自来水组,其中低、中铅剂量组差异都具有统计学意义,且差异来自于实验的前2 d.结论 与饮用自来水相比较,长期饮用纯净水可增加大鼠脑组织铅蓄积,降低NMDA受体NR1,NR2A,NR2B亚基mRNA的表达,同时迟滞其空间学习记忆能力.低剂量铅暴露下上述效应更为明显.     

应用VPA调节组蛋白乙酰化修饰抑制乳腺癌细胞增殖的实验研究

目的 观察应用组蛋白脱乙酰酶抑制剂丙戊酸钠(VPA)调节染色体组蛋白低乙酰化水平对乳腺癌细胞增殖的作用,并进一步检测Cyclin A、Cyclin D1、Cyclin E、P21Waf/cipl蛋白及mRNA表达变化来探讨其分子作用机制.方法 乳腺癌细胞系MCF-7细胞经0.75-4.0 mmol/L VPA作用后,MTT法检测细胞生长抑制、PI标记流式细胞术检测细胞周期、间接免疫荧光法分析CyclinA、Cyclin D1、Cyclin E、P21Waf/cipl蛋白表达、RT-PCR检测分析Cyclin A、Cyclin DI、Cyclin E、P21Waf/cipl mRNA表达.结果 经0.75-4.0 mmol/L VPA作用24、48、72、96 h,试验组细胞生长抑制率逐渐升高,且呈时间、剂量依赖趋势;对照组细胞增殖周期G1、S、M期所占比例未见明显改变,而实验组则随药物浓度、作用时间的不同而出现不同程度的细胞增殖周期G1期阻滞,G1期比例由56.7%-78.9%不等,与对照组比较其升高差异有统计学意义(P<0.01).试验组P21Walf/cipl蛋白、mRNA表达被明显上调、Cyclin D1蛋白及mRNA表达被明显下调,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);而CyclinA、CyclinE蛋白和mRNA表达则未见明显变化(P>0.05).结论 通过应用组蛋白特异性脱乙酰酶抑制剂调节组蛋白乙酰化修饰可明显抑制乳腺癌细胞生长、诱导细胞增殖周期阻滞;丙戊酸钠作为组蛋白脱乙酰酶抑制剂可明显抑制乳腺癌细胞增殖,其作用机制是通过上调P21Walf/cipl mBNA、蛋白表达,下调Cyclin D1 mRNA和蛋白表达分别和/或协同实现.     

全氟辛烷磺酸对大鼠仔鼠学习记忆能力的影响

Objective To study the effects of prenatal and postnatal perfluorooetane sulfonate (PFOS) exposure on spatial learning and memory, N-methyl-D-aspartate receptor 2B (NR2B) mRNA and protein level in frontal cortex and hippoeampus of rat pups and to explore the mechanism of developmental neurotoxicity induced by PFOS. Methods Twenty-eight pregnant mrs were randomly divided into three groups in proportion of 3: 2: 2,including control group (C), low dose group (L) and high dose group (H) by means of randomized number table, which respectively received 0,7.2, 14.4 mg/kg PFOS feed from pregnancy day 0 to postnatal day(PND)30 by free feedings. The animal models of prenatal and postnatal non-exposure (CC), prenatal exposure (LC and HC), postnatal exposure (CL and CH), and prenatal and postnatal exposure (LL and HH) to PFOS were established by cross-fostering method. The spatial learning and memory were measured by water maze experiment,the NR2B mRNA levels in frontal cortex of rat pups was determined with semi-quantitative RT-PCR, NR2B protein express in cerebral cortex (frontal and tempera]cortex) and hippocampus (CAI, CA3, CA4 and DG regions) of rat pups was detected by immunohistochemistry. Results The escape latency of CL, CH, LL and HH groups pups in water maze experiment were (99. 83±25.77) s, (111.30±17. 82) s, (106. 40±18. 71) s, (107.70±16. 85) s, and longer as compared with CC group[(54.90±26.69)s](q value were 4.349,4.773,6.026 and 5.641, respectively,P<0. 01). The number of errors of HH group rat pups entering dead end was (22. 30±7.56) at the training day 4,and it was significantly higher than that of CC group (9. 80±4. 64) (q=5. 173,P<0. 01). The NR2B mRNA levels of frontal cortex of pups in HC group at PND1 ,and LC group, HC group and HH group at PND14 were (0. 167±0. 008), (0. 364±0. 035), (0. 341±0. 030) and (0. 328±0. 045) respectively,which were significantly lower than CC group (0.271±0.060) and (0.465±0.067) (q values were 3. 547, 3. 739, 4. 597 and 5. 006, respectively, P<0.05) . The results of immunohistochemistry indicated that NR2B protein express of the hippocampus CA1 region of pups in LC group was (0.091±0.005),and showed significant lower than CC group which was (0. 123±0.009) at PND1 (q=5. 209 ,P<0. 05). At PND14, the effect of PFOS extended to cerebral cortex and hippocampus regions. At PND28, the effects of PFOS were showed in hippocampus CA1, CA3 and temporal cortex regions. Conclusion Prenatal and postnatal exposure to PFOS should result in the spatial learning and memory damage,and the mechanism might be possibly involved in the decrease of NR2B level in cerebra lcortex and hippocampal formation regions.     

龙葵碱对人肝癌HepG2细胞N-乙酰基转移酶活性的影响

目的探讨龙葵碱对HepG2细胞N-乙酰基转移酶(NAT)活性的影响。方法采用HPLC方法,以2-氨基芴(2-AF)为底物,以2-AF被NAT乙酰化为2-乙酰氨基芴(2-AAF)的量来反应NAT的活性。结果龙葵碱能显著降低HepG2完整细胞NAT的活性;龙葵碱能够降低HepG2细胞质内NAT的活性,作用具有剂量依赖性。结论龙葵碱通过抑制HepG2细胞NAT的活性发挥细胞毒作用。     

德国小蠊磷酸酯酶及谷胱甘肽S-转移酶生化特性的变化与抗药性的关系研究

目的了解德国小蠊的抗药性与磷酸酯酶和谷胱甘肽S-转移酶（GSTs）生化特性变化的关系，以初步揭示其抗性机制。方法参照Bessey等的方法测定磷酸酯酶活性与动力学参数Km和Vmax。参照Clark、Kao和Booth等的方法测定GSTs活性与动力学参数Km和Vmax。结果敏感品系与野生品系德国小蠊的酸性磷酸酯酶活力分别为0．98和26．95nmol／（只·30min），比活力分别为1．45和1．59μmol／（mg pro·30min），Km值分别是26．14和0．89mmol／L，Vmax值分别是3．33和0．85nmol／（mg pro·30min）；敏感品系与野生品系德国小蠊的碱性磷酸酯酶活力为（0．03±0．00）和（0．28±0．06）nmol／（只·30min），比活力分别为（0．33±0．00）和（0．37±0．00）μmol/（mg pro·30min），Km值分别是70．38和61．24mmol／L，Vmax值分别是16．20和14．00nmol／（mg pro·30min）；敏感品系与野生品系德国小蠊GETs活力分别是0．13和0．47nmol／min，比活力分别为8．94和17．37nmol／（mg pro·30min）；Km值分别是2．08和5．81mmol／L，Vmax值分别是0．08和0．17nmot／min。结论磷酸酯酶与GSTs在野外品系的抗性形成过程中起一定作用。     

高效液相色谱法测定空气中苯胺和N-甲基苯胺的研究

目的建立高效液相色谱法同时测定空气中苯胺、N-甲基苯胺的检测方法。方法应用高效液相色谱，C18通用色谱柱，以甲醇为流动相，流速0．7ml／min，紫外检测器在240nm波长下测定吸收值。，结果苯胺线性范围0．00～1000μg／ml，回归方程：Y=0．000936x＋0．6769，相关系数r=0．9999，最低检出浓度1．0μg／ml，空气中最低检出浓度0．22μg／m^3，在250、25、2．5μg/ml浓度下测得平均回收率分别为：99．2％、100．5％、104．4％，相对标准偏差RSD分别为0．23％、0．42％、3．25％；N-甲基苯胺线性范围0．00～1000μg／ml，回归方程：Y=0．00124x＋0．02，相关系数r=0．9999，最低检出浓度0．4μg／ml，空气中最低检出浓度0．09μg／m^3，在250、25、2．5μg／ml浓度下测得平均回收率分别为：99．7％、101．6％、102．0％，相对标准偏差RSD分别为0．27％、0．23％、3．65％。结论分析时间短，相关性好，精密度高，准确度好。特异性强，该法线性范围宽。     

鼻咽癌患者血清与鼻咽组织γ－谷氨酰转肽酶的检测

用γ－谷氨酰对硝基苯胺法测定了１０６例鼻咽癌（ＮＰＣ）和６５例鼻咽炎患者血清及鼻咽组织γ－谷氨酰转肽酶（γ－ＧＴ）活件。并对其中初诊为ＮＰＣ患者进行放疗前（３４例）后（１５例）血清及鼻咽组织γ－ＧＴ活性测定。结果显示：ＮＰＣ与鼻咽炎、ＮＰＣ放疗前后血清及鼻咽组织γ－ＧＴ活性差异都有极显著性。提示可将γ－ＧＴ活性测定作为ＮＰＣ辅助诊断及评价疗效的参考指标。     

难治性癫癎患者脑组织中5种耐药基因产物的同步表达及临床意义

目的　观察难治性癫患者脑组织中 5种耐药基因产物的同步表达 ,探索其临床意义。方法　 17例难治性癫患者分为长 (≥ 10年 )、短病程 (<10年 )两组 ,测定两组患者术后脑组织中P 糖蛋白 (Pgp)、多药耐药相关蛋白 (MRP)、谷胱甘肽硫转移酶 π(GST π)、肺耐药相关蛋白 (LRP)及拓扑异构酶Ⅱ (Topo Ⅱ )的表达 ,并与对照组比较。结果　短病程组患者胶质细胞Pgp表达 (M =4 0 )较长病程组 (M =0 0 )、对照组 (M =0 0 )增强 ,长、短病程组神经元Pgp表达 (M值均为 3 0 )较对照组 (M =0 0 )增强 ;神经元MRP、LRP表达在长病程组较短病程组增多 ,短病程组较对照组增多 ;GST π在神经元的表达长病程组 (M =6 5 )较短病程组 (M =2 0 )、对照组 (M =0 0 )增强 ;长、短病程组神经元Topo Ⅱ表达 (M值分别为 5 0、4 0 )较对照组 (M =0 0 )增强 ,差异均具有显著性意义 (P<0 0 1)。结论　Pgp、MRP、GST π、LRP及Topo Ⅱ均参与难治性癫耐药的形成。在病程早期 ,耐药机制以Pgp为主 ,并有LRP、MRP参加 ;在后期 ,Pgp作用减弱 ,LRP、MRP的作用进一步增强 ,同时GST π参与后期耐药的形成 ;TopoⅡ可能与难治性癫形成有关 ,具体机制尚待进一步研究。