超声介导微泡靶向传输基因促血管新生的实验研究

目的探讨超声介导微泡靶向传输血管内皮生长因子VEGF165促心肌血管新生即心肌“分子搭桥”的新途径。方法利用分子生物学方法构建人血管内皮生长因子真核表达质粒pcDNA3.1-/VEGF165;制备载VEGF165基因脂质体微泡,分析其理化性质和功能,在超声场利用超声辐射向大鼠梗死心肌靶向传输VEGF165;2周后取材,逆转录聚合酶链式反应(RT PCR)评价大鼠心肌中人源VEGF165mRNA表达,蛋白印迹杂交(WesternBlot)观察大鼠心肌VEGF165的蛋白表达,CD34免疫组化微血管密度(MVD)计数半定量法评价超声介导微泡靶向传输VEGF165促梗死心肌血管新生效果。结果①成功构建、克隆血管内皮生长基因VEGF165重组真核表达质粒pcDNA3.1-/VEGF165,测序分析、酶切鉴定准确无误;②研制的脂质体微泡超微结构显示可粘附或包载DNA,粒度分析显示平均粒径<5μm;③在超声介导下该脂质体载基因微泡可靶向传输VEGF165至大鼠梗死心肌,超声介导靶向传输组VEGF165的mRNA、蛋白表达及促血管新生作用(MVD表示)仅次于VEGF165基因心肌注射组。结论超声介导微泡可向大鼠心肌靶向传输VEGF165基因并产生促血管新生效应。     

背向散射积分超声组织定征在心肌梗死患者中的临床应用研究

目的探讨心肌背向散射积分(IBS)参数评估心肌梗死患者心肌病变的价值及其与局部心肌收缩功能的关系。方法用背向散射联机分析技术,观测31例前间壁心肌梗死患者及27例正常人前间隔标化平均背向散射积分(AII%),背向散射积分周期变异幅度(CVIB);通过二维超声测算室壁增厚率(WT%)。结果与正常人相比,心肌梗死患者的AII%明显增加(2.2±0.3vs1.6±0.2,P＜0.01),CVIB明显减低(3.3±1.7vs7.9±1.3,P＜0.01)。CVIB与反映局部心肌收缩功能的指标(WT%)呈高度相关(r为0.78,P＜0.01),AII%和WT%呈一定程度相关(r为－0.56,P＜0.01)。结论IBS两个参数,即AII%和CVIB,可以区分正常心肌和梗死区心肌,并能反映局部心肌收缩功能,具有评估心肌存活性的潜力。     

胞二磷胆碱提高心肺复苏效果和减轻心肌损伤的作用研究

目的 探讨胞二磷胆碱在心肺复苏(CPR)中对于提高自主循环恢复(ROSC)率和减轻心脏损伤的作用.方法 按随机数字表法将SD大鼠分为对照组(未窒息,5只)、模型组(10只)、肾上腺素组(10只)、胞二磷胆碱组(10只),用窒息法复制心搏骤停(CA)动物模型并进行CPR,各组分别于复苏前5 min和复苏开始时给2次药,对照组和模型组给予等量生理盐水.各组于CPR期间及复苏成功后2h内测定血流动力学指标,然后处死大鼠取心脏组织,检测ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,评估大鼠心肌缺血/再灌注损伤情况.结果 胞二磷胆碱组和肾上腺素组ROSC率高于模型组(90％、80％比20％,均P＜0.01),平均复苏时间(s)显著短于模型组(53±10、55±9比95±7,均P＜0.01);复苏后2h末心率(HR,次/min)、平均动脉压(MAP,mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa)均显著高于模型组(HR:222.78±41.55、167.75±11.76比131.50±0.70,MAP:36.53±8.69、39.30±6.45比30.19±5.15,均P＜0.01).胞二磷胆碱组复苏后心功能[左室内压上升/下降最大速率(±dp/dt max)]逐渐平稳并显著高于模型组和肾上腺素组;肾上腺素组虽高于模型组,但下降趋势明显.胞二磷胆碱组Na+-K+-ATP酶(μmol· mg-1· h-1)和SOD活性(U/mg)显著高于模型组和肾上腺素组(Na+-K+-ATP酶:7.35±0.20比5.11 ±0.69、4.70±0.41,SOD活性:320.65±47.25比225.79±24.64、253.67±12.00,均P＜0.01),而MDA含量(mmol/mg)显著低于模型组和肾上腺素组(8.19±1.64比16.59±1.27、14.65±0.93,均P＜0.01),且上述指标与对照组比较无明显差异;模型组和肾上腺素组上述各指标也无明显差异.结论 胞二磷胆碱可提高CPR成功率,并且与肾上腺素相比可减轻心肌缺血/再灌注损伤,改善复苏后心功能.     

PET和SPECT结合延迟增强MRI评价存活心肌的进展

冠状动脉硬化性心脏病可造成不同程度的心肌损害,而只有存活心肌经血运重建后心功能得到改善,患者才能从中获益。因此,选择一种有效、准确的评价存活心肌的方法对选择治疗方案,决定是否进行血运重建治疗具有重要的临床指导意义。PET和SPECT是评价心肌存活的常用方法,近年来,随着MRI技术的迅速发展,临床应用也不断扩展,特别是心肌灌注延迟增强扫描显像的应用可从坏死组织中区分周围的存活心肌。     

升主动脉缩窄心衰大鼠心肌PKC活性测定

目的：探讨升主动脉缩窄慢性压力后负荷心肌肥厚转变为心力衰竭过程中心肌蛋白激酶C（PKC）比活性的变化及意义。方法：用泰夫隆管环扎幼鼠升主动脉，制作慢性压力后负荷心肌肥厚－心力衰竭模型。据改良Takai放射性核素酶解测定法，应用γ－^32P-ATP测定不同病理时期心肌组织中PKC比活性。结果：与假手术组比较，肥厚组心肌胞膜、胞浆PKC比活性明显增高（P＜0．01）、PKC膜／浆比值明显增加（P＜0．01）；心力衰竭组心肌胞膜、胞浆PKC比活性差异均无显著性（P＞0．05），但PKC膜／浆比值明显增加（P＜0．01）。结论：PKC亚细胞水平的活性变化在慢性压力后负荷心肌肥厚－心力衰竭的转变中起重要的调控作用。     

320层容积CT心肌灌注成像对心肌灌注缺损的诊断价值

目的 探讨320层容积CT心肌灌注成像(CT-MPI)的可行性及其对心肌灌注缺损的诊断价值.方法 对14例经SPECT心肌灌注成像(SPECT-MPI)阳性的已知或可疑冠心病患者行静息和腺苷负荷320层容积CT-MPI检查,使用专用心肌灌注软件对CT-MPI进行分析.以心肌16节段标准分段方法(心尖除外)分别分析核素和容积CT-MPI的固定或可逆性灌注缺损.以SPECT-MPI为参考标准评价CT-MPI对心肌灌注缺损诊断的敏感度、特异度.结果 所有患者均成功完成320层容积CT-MPI.SPECT-MPI显示14例患者中共有39段心肌出现固定或可逆性灌注缺损,CT-MPI正确显示了其中12例患者的34段心肌灌注缺损.320层容积CT-MPI诊断心肌灌注缺损的敏感度、特异度分别为87.2％( 34/39)和91.4％(169/185).结论 320层容积CT-MPI对诊断心肌灌注缺损有较高的敏感度和特异度.     

Localization of Na-K-ATPase in guinea-pig myocardium

The cytochemical distribution of Na-K-ATPase was demonstrated in the guinea-pig myocardium. The hearts were fixed with paraformaldehyde glutaraldehyde mixture, sections were incubated at room temperature in modified Ernst medium employing p-nitrophenyl phosphate as substrate and the tissue was processed for electron microscopy. The ATPase activity was localized in the subsarcolemmal cisterns, inner side of plasma membrane, T-tubules, free and junctional sarcoplasmic reticulum and capillary endothelium. The reaction product on the plasma membrane and T-tubules was inhibited by ouabain or by potassium deletion. However, the amount of precipitation in mitochondria, sarcoplasmic reticulum (free and junctional) and subsarcolemmal cisterns remained unaffected by ouabain or by potassium deletion. The enzyme reaction in the myocardium represents ouabain-sensitive, potassium-dependent ATPase.     

大蒜素对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤细胞凋亡的影响

目的 探讨大蒜素对培养乳鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤的保护作用及对心肌细胞凋亡的影响。方法 利用乳鼠培养心肌细胞缺氧／复氧（A／R）损伤模型,将培养心肌细胞分为正常对照组（C组）、缺氧预处理组（AP组）、缺氧/复氧组（A／R组）、大蒜素预处理组（G组）,测定各组缺氧后、复氧后细胞损伤指标乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）含量,并应用DNA琼脂糖凝胶电泳及原位末端标记（TUNEL）法检测各组凋亡指数（AI）。结果G、AP组LDII、MDA明显较A／R组降低（P＜0．01）,SOD明显增高（P〈0．01）;A／R、AP、G组AI较C组明显增高（P〈0．01）,AP、G组AI较A／R组显著降低（P〈0．01）,G组AI较AP组稍高（P〉0．05）。结论 大蒜素具有抗心肌细胞凋亡作用。可减轻心肌细胞A／R损伤。     

正常人心肌等容收缩期多普勒组织成像特点及其临床价值

目的探讨正常人心肌等容收缩期多普勒组织成像特点及其临床价值。方法应用多普勒组织成像（DTI）对30例正常人心肌进行检测。于标准胸骨旁左室长轴观、心尖左室长轴观、两腔观和四腔观,将取样容积分别置于左室前间隔、后壁、前壁、下壁、后间隔和侧壁的基底段和中段处内膜下心肌层,获取6个壁共16个取样点的组织多普勒图像,在每一个取样点的DTI图像上测量等容收缩期正向波、负向波的峰值速度（VIVC1,VIVC2）,持续时间（TIVCI,TIVC2）,速度时间积分（VTIIVC1,VTIIVC2）,并计算等容收缩期正、负向波峰值速度的差值DIVC（DIVC：VIVC1-VIVC2）。结果正常人左心室六个壁等容收缩期心肌各位点DTI频谱通常呈正向为主的正负双向型坡。除后壁外（包括纵向和横向）每个壁基底段、中段的VIVC1〉VIVC2,TIVC1〉TIVC2,VTIIVC1〉VTIIVC2（P〈0．05）,同一节段不同壁之间及同一壁不同节段间的VIVC1比较以及VIVC2比较差异多无统计学意义（P〉0．05）。结论正常心肌等容收缩期多普勒组织成像具有明显特点,应用其可对多种心脏疾病予以评价,因而具有重要临床意义。     

山药对糖尿病小鼠血糖、血脂、肝糖元和心肌糖元含量的影响

目的：观察山药的抗糖尿病作用效力。方法：采用四氧嘧啶制作糖尿病小鼠模型，并以优降糖作阳性对照。连续21天用不同剂量的山药灌胃治疗，比较各组生化指标的差异。结果：①与对照组比，剂量在6．00g／Kg·d(-1)以上的山药各组的血糖和血脂含量较低（P＜0．001或P＜0．05），而肝糖元和心肌糖元含量较高（P＜0．001或P＜0．01）。②与优降糖组比，剂量在6．00g／Kg·d(-1)以上的山药各组的血糖、血脂和心肌糖元含量较高（P＜0．001或P＜0．01），而肝糖元含量较低（P＜0．01）。结论：山药有一定的抗糖尿病作用，但效力显著弱于优降糖，且需剂量大。