不同类型干细胞在缺血性脑卒中治疗中的应用研究进展

目的总结不同类型干细胞移植治疗缺血性脑卒中的研究进展。方法通过检索 PubMed 数据库，总结 2000 年—2020 年不同类型干细胞治疗缺血性脑卒中的研究结果。结果干细胞可经脑实质立体定向移植、外周血、鼻腔、脑脊液等途径移植治疗缺血性脑卒中，主要通过旁分泌和细胞替代两种机制发挥治疗作用。目前对于缺血性脑卒中及其常见并发症的治疗研究主要集中在神经干细胞、胚胎干细胞及 MSCs，这 3 类干细胞各有优缺点，集中反映在干细胞迁移能力、存活率和安全性等方面。目前已有部分干细胞疗法完成了阶段性临床试验。结论干细胞移植治疗缺血性脑卒中可行且具有巨大临床价值，但在干细胞类型的选择、移植策略、迁移能力及存活率等方面，仍存在一些问题亟待解决。     

脂肪来源干细胞在皮肤瘢痕防治领域的研究进展

目的综述脂肪来源干细胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）在皮肤瘢痕防治领域的研究进展。方法广泛查阅相关文献，对 ADSCs 预防、治疗皮肤瘢痕形成的体外实验、动物实验及临床研究效果、可能机制以及优化 ADSCs 效果的生物材料进行综述。结果体外、体内实验及临床研究提示 ADSCs 参与皮肤创伤愈合全过程，可能通过减轻炎症反应、促进血管新生，调控 p38/MAPK、过氧化物酶体增殖物激活受体 γ 或 TGF-β₁/Smads 等通路抑制（肌）成纤维细胞活性，减少胶原沉积，从而预防、治疗皮肤瘢痕。生物工程材料，如猪脂肪源基质水凝胶、猪小肠黏膜下层细胞外基质以及人工合成的聚羟基丁酸酯-羟基戊酸盐支架，均有可能进一步提高 ADSCs 防治皮肤瘢痕形成的效能。 结论ADSCs 在皮肤瘢痕防治研究中取得了显著进展，但临床应用途径仍待进一步研究。     

膝关节置换术后骨密度变化的研究进展

目的总结膝关节置换术后骨密度的变化及其诊断方式、影响因素和药物防治研究进展。方法查阅近年国内外有关文献，对骨密度评估测量方式的优缺点、膝关节置换术后骨密度的变化趋势及其影响因素，以及药物防治疗效差异进行总结。结果膝关节置换术后全身骨密度及假体周围平均骨密度总体呈下降趋势，与检测时患者体位、年龄、体质量、日常活动、假体固定方式、假体设计以及假体材料等因素密切相关。狄诺塞麦、双膦酸盐和特立帕肽等药物能够减少膝关节置换术后骨密度降低程度。结论膝关节置换术后骨密度呈下降趋势，但发生机制尚不明确，与多种因素相关。目前，抑制骨吸收药物对于膝关节置换术后骨密度降低有一定效果，但远期疗效有待进一步探究。     

改性壳聚糖基导电复合材料神经导管的体内降解及组织相容性观察

目的探讨改性壳聚糖基导电复合材料神经导管的体内降解及组织相容性，以期为组织工程神经构建提供新的支架材料。方法采用微乳液聚合法合成纳米聚吡咯（polypyrrole，PPy），与壳聚糖共混后注入定制的成管模型，冷冻干燥及脱酸后，制成改性纳米 PPy/壳聚糖复合材料导管（记作 CP 导管）；再经不同程度乙酰化（乙酰化反应时间分别为 30、60、90 min）改性，制备不同乙酰度的 CP 导管（记作 CAP1、CAP2、CAP3 导管）。各导管予红外光谱、扫描电镜进行表征，使用四探针电导仪测定电导率。取 30 只雌性 SD 大鼠，于背部左、右侧各制备 4 个皮下筋膜隧道，分别植入上述导管。术后 2、4、6、8、10、12 周取材，大体观察导管形态及完整性、扫描电镜观察导管微观结构、测量导管降解率，以观察导管体内降解性能；行 HE 染色及抗巨噬细胞免疫荧光染色，观察导管体内组织相容性。结果经表征证实乙酰化改性后的各导管 1 562 cm^–1左右的酰胺Ⅱ谱带增强，表示壳聚糖乙酰化改性成功。各导管均具备导电性能，组间电导率差异无统计学意义（P>0.05）。扫描电镜观察示各导管表面相对光滑、结构致密，无明显差异。导管植入体内后，随时间延长均出现一定程度塌陷，其中 CAP3 导管尤为明显；亦出现不同程度质量丢失，且乙酰化度越高，质量变化越大（P<0.05）。扫描电镜观察示植入 12 周后材料出现较多孔隙，且随着乙酰化度增加，孔隙呈增大趋势。组织学观察显示术后早期各导管均有较多巨噬细胞、淋巴细胞浸润，随着植入时间延长，淋巴细胞有所减少、成纤维细胞增多、胶原纤维增生明显。 结论不同乙酰度的改性壳聚糖基导电复合材料神经导管均有较好的体内生物相容性、可导电、可降解，且降解性与乙酰度相关，有望为组织工程神经构建提供一种新的支架材料。     

计算流体力学在组织工程中的应用进展

目的综述计算流体力学（computational fluid dynamics，CFD）在组织工程中的应用进展。方法广泛查阅 CFD 应用于组织工程的相关文献，主要对 CFD 用于生物反应器设计改良或优化、模拟体外组织再生过程中的流体动力学和细胞生长动力学等方面进行综述。结果CFD 的模拟预测能力可为生物反应器的设计优化和体外组织工程组织培养提供重要的指导作用，且结合实验研究能进一步提高模型预测结果的准确性。结论CFD 作为新兴和有效的研究工具，已在组织工程中展现出独特优势并取得显著进展，但更全面、准确地模拟组织再生全过程仍需进一步研究。     

Gain-of-Function Lrp5 Mutation Improves Bone Mass and Strength and Delays Hyperglycemia in a Mouse Model of Insulin-Deficient Diabetes

High fracture rate and high circulating levels of the Wnt inhibitor, sclerostin, have been reported in diabetic patients. We studied the effects of Wnt signaling activation on bone health in a mouse model of insulin-deficient diabetes. We introduced the sclerostin-resistant Lrp5^A214V mutation, associated with high bone mass, in mice carrying the Ins2^Akita mutation (Akita), which results in loss of beta cells, insulin deficiency, and diabetes in males. Akita mice accrue less trabecular bone mass with age relative to wild type (WT). Double heterozygous Lrp5^A214V/Akita mutants have high trabecular bone mass and cortical thickness relative to WT animals, as do Lrp5^A214V single mutants. Likewise, the Lrp5^A214V mutation prevents deterioration of biomechanical properties occurring in Akita mice. Notably, Lrp5^A214V/Akita mice develop fasting hyperglycemia and glucose intolerance with a delay relative to Akita mice (7 to 8 vs. 5 to 6 weeks, respectively), despite lack of insulin production in both groups by 6 weeks of age. Although insulin sensitivity is partially preserved in double heterozygous Lrp5^A214V/Akita relative to Akita mutants up to 30 weeks of age, insulin-dependent phosphorylated protein kinase B (pAKT) activation in vitro is not altered by the Lrp5^A214V mutation. Although white adipose tissue depots are equally reduced in both compound and Akita mice, the Lrp5^A214V mutation prevents brown adipose tissue whitening that occurs in Akita mice. Thus, hyperactivation of Lrp5-dependent signaling fully protects bone mass and strength in prolonged hyperglycemia and improves peripheral glucose metabolism in an insulin independent manner. Wnt signaling activation represents an ideal therapeutic approach for diabetic patients at high risk of fracture. © 2021 The Authors. Journal of Bone and Mineral Research published by Wiley Periodicals LLC on behalf of American Society for Bone and Mineral Research (ASBMR).     

黄芪-丹参药对通过下调miR-466b-5p改善高血压肾损害

目的：探讨黄芪-丹参药对通过调节微小核糖核酸-466b-5P（miR-466b-5p）改善高血压肾损害的机制。方法：基于微RNA（miRNA）测序寻找自发性高血压大鼠与Wistar-京都鼠（WKY）的差异基因,构建腺相关病毒转染小鼠,24只C57BL/6小鼠,随机选取12只尾静脉注射小鼠腺相关病毒miR-466b-5P（rAAV-miR-466b-5P）构建miR-466b-5p过表达组,余12只作为空白对照组注射腺相关病毒-9（AAV-9）空载体,转染6周后再各随机分为2组,每组6只,A组（黄芪-丹参+miR-466b-5P过表达组）和C组（黄芪-丹参+空白对照组）以黄芪配方颗粒：2.036 g/kg+丹参配方颗粒：0.255 g/kg灌胃;B组（miR-466b-5P过表达组）和D组（空白对照组）以相同体积生理盐水灌胃;灌胃28 d后观察各组小鼠尿β2-微球蛋白（β2-MG）、N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（NAG）、微量白蛋白（mALB）,血清胱抑素C（Cys-C）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、C反应蛋白（CRP）水平和肾脏病理,进行实时荧光定量(RT-qPCR)与蛋白质印迹法(Western Blotting)寻找其靶基因。结果：1）基于前期miRNA测序选定了miR-466b-5p;2）与D组比较,B组小鼠尿β2-MG、NAG、mALB、血清Cys-C、AngⅡ、CRP均显著升高（P<0.01）;与B组比较,A组小鼠血清Cys-C、CRP明显升高（P<0.05）,尿β2-MG、NAG、mALB、血清AngⅡ无明显改变（P>0.05）;3）与D组比较,B组小鼠出现明显肾小球硬化、小管纤维化,A组较B组有明显改善;4）与D组比较,B组小鼠透明质酸酶2（HAS2）明显下调,而经黄芪-丹参干预后有所回调。结论：miR-466b-5p的过表达会导致高血压肾损害的发生,黄芪-丹参药对通过靶向HAS2下调miR-466b-5p改善高血压肾损害。     

和胃安神方对失眠模型大鼠5-羟色胺、多巴胺及去甲肾上腺素水平的影响

目的：探讨和胃安神方对失眠模型大鼠下丘脑5-羟色胺（5-HT）、多巴胺（DA）和去甲肾上腺素（NE）水平的影响。方法：将60只雄性Wistar大鼠随机分为6组,即正常对照组、失眠模型组、地西泮组、和胃安神方低剂量组、和胃安神方中剂量组、和胃安神方高剂量组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组大鼠下丘脑组织5-HT、DA、NE的水平。结果：与正常对照组比较,失眠模型组大鼠5-HT水平显著下降,差异有统计学意义（P<0.05),DA、NE水平较正常对照组显著升高,差异有统计学意义（P<0.05);与失眠模型组比较,地西泮组、和胃安神方低剂量组5-HT、DA、NE水平差异均无统计学意义(均P>0.05);和胃安神方中剂量组、和胃安神方高剂量组5-HT水平均较失眠模型组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),DA、NE水平较失眠模型组显著下降,差异有统计学意义（P<0.05)。结论：和胃安神方治疗失眠症的疗效机制可能与调节脑内5-HT、DA、NE水平有关。     

基于HS-GC-IMS技术分析六神曲炮制前后（炒、焦）挥发性物质的变化

目的 分析六神曲Massa Medicata Fermentata炮制前后（炒、焦）的挥发性有机物特征及其变化规律。方法 采用顶空-气相色谱-离子迁移质谱（headspace-gas chromatography-ion migration mass spectrometry,HS-GC-IMS）测定六神曲生品、炒品和焦品的挥发性有机物,构建HS-GC-IMS指纹图谱,采用VOCal软件对检测到的成分进行定性和定量分析,运用主成分分析（principal component analysis,PCA）、偏最小二乘-判别分析（partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA）、t检验等对样品进行差异性分析。结果 基于HS-GC-IMS技术从六神曲生品、炒品和焦品中共获得了80种挥发性有机物,定性鉴别出60种;构建了六神曲生品、炒品和焦品的HS-GC-IMS指纹图谱,通过PCA、PLS-DA、t检验等分析方法可将三者进行区分,己醛-D(hexanal-D)、乙醇（ethanol）2种物质可作为六神曲生品的特征性成分;丁醛（butanal）...     

基于网络药理学探究防风中生物活性成分及对类风湿关节炎的作用机制

目的 通过以网络药理学为基础的策略研究防风治疗类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）的分子生物学机制。方法 采用网络药理学方法收集防风活性成分和治疗RA的潜在靶点,并评估活性成分的药理和毒理学等相关参数;构建蛋白质相互作用网络筛选核心靶点,并通过生物信息学方法进一步验证核心靶点和疾病的关联;对核心成分和相应靶点进行分子对接。体外通过CCK-8实验、细胞迁移和侵袭、细胞凋亡、qRT-PCR和Western blotting分析,阐明别欧前胡素对MH7A细胞磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）通路的调控作用。结果 从防风中共鉴定出18种活性成分和66个与筛选出的RA疾病靶基因相交的潜在靶基因,最终获得了汉黄芩素、β-谷甾醇、5-O-甲基维斯阿米醇和别欧前胡素等核心成分。防风治疗RA的潜在机制可能是通过调控PI3K/Akt、白细胞介素-17（interleukin-17,IL-17）、凋亡等信号通路和多种生物过程来实现,以发挥抗炎和免疫调节作用。分子对接证实了所有的核心成分和关键靶点均具有很好的对接活性。别欧前胡素抑制MH7A细胞的活力、迁移和侵袭（P＜0.05、0.01）,诱导细胞凋亡（P＜0.01）,并显著下调IL-1β、IL-6、IL-8、基质金属蛋白酶-1（matrix metalloproteinase-1,MMP-1）和MMP-3的基因表达（P＜0.01）。分子分析表明别欧前胡素通过抑制PI3K/Akt通路发挥对MH7A的调控作用。结论 成功预测了防风治疗RA的有效成分和潜在靶点,为进一步探究其分子机制提供了新的理论基础。揭示了别欧前胡素通过PI3K/Akt通路抑制RA成纤维样滑膜细胞的活力、迁移、侵袭及细胞因子和MMPs的表达,并诱导细胞凋亡。