结核分枝杆菌Rv3425蛋白原核可溶性表达

目的在原核系统内获得结核分枝杆菌Rv3425蛋白可溶性表达并进行纯化,Western-blot技术初步鉴定重组蛋白的抗原性和特异性。方法将Rv3425核酸编码序列克隆至融合表达载体p ET-Dsb C中,然后进行融合蛋白Dsb CRv3425表达并实现亲和纯化,用Western-blot分析其抗原性和特异性。结果 Rv3425基因在大肠杆菌中获得可溶性表达,亲和纯化的Dsb C-Rv3425蛋白与结核病患者血清标本呈强阳性反应,与健康人血清标本呈阴性反应。结论Dsb C-Rv3425蛋白在大肠杆菌中以可溶性表达形式存在,具有较好的抗原特异性和免疫原性,对结核病诊断有潜在的应用价值。     

慢性不可预计温和应激大鼠microRNA差异表达谱分析

目的探讨慢性不可预计温和应激大鼠模型microRNA（miRNA）表达谱差异。方法采用慢性不可预计温和应激模型,将16只SD大鼠随机分为对照组和应激组,每组8只,对照组常规饲养,不予任何处理,应激组每天随机予1～2种温和刺激,共6周;造模结束后均采用旷场试验评价大鼠行为,安乐处死,取伏隔核低温保存。采用miRNA测序技术比较两组大鼠miRNA表达差异。结果与对照组比较,慢性不可预计温和应激大鼠有25个miRNA显著下调,2个miRNA显著上调。结论慢性不可预计温和应激可能使大鼠部分miRNA表达发生改变。     

微小RNA-21转染介导食管鳞癌细胞生物学行为及细胞放射敏感性的变化

目的 探讨微小RNA-21（miRNA-21）表达介导食管鳞癌细胞的生物学特性。方法 转染miRNA-21正义表达载体、miRNA-21空载体及miRNA-21抑制剂,通过Real-time PCR实验,以食管鳞状上皮癌TE-1正常细胞为对照组,检测转染结果。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8）对细胞增殖活性进行检测;采用流式细胞术检测细胞凋亡能力;通过Transwell小室和划痕实验观察TE-1细胞侵袭能力及迁移能力;通过集落形成实验观察TE-1细胞对放疗敏感性变化;采用SPSS 19.0统计学软件对所得数据进行分析。结果 Real-time PCR结果显示,转染miRNA-21抑制剂后,TE-1细胞中miRNA-21的表达水平明显降低（P<0.05）。相比正常细胞生长组,阳性对照组、阴性对照组转染miRNA-21抑制剂后,TE-1细胞增殖能力降低,细胞凋亡加快（P<0.05）。此外,实验抑制组中细胞侵袭和迁移能力下降。集落形成实验分析显示,抑制miRNA-21表达明显提高了TE-1细胞对放射的敏感性。结论 下调miRNA-21可降低食管鳞状上皮癌TE-1细胞的增殖、侵袭、迁移能力及放疗的敏感性,是未来治疗食管癌的潜在靶点。     

外泌体miRNA在心血管疾病中的研究进展

心血管疾病(cardiovascular diseases,CVD)是全球高发性疾病,其中冠心病(coronary heart disease,CHD)是世界范围内的主要死亡原因,在老年人群中死亡率和发病率不断上升[1],与微小RNA(microRNA,miRNA,miR)的调节密切相关[2]。研究报道,miRNA调节大量信号通路,可通过外泌体(exosome)实现细胞间传递,参与细胞间的信息交流[3].