参附注射液对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注时PTEN和P13 K表达的影响

目的 探讨参附注射液(SFI)对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注时第10染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白酶基因(PTEN)和磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)表达的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠,体重220-280 g,单次腹腔注射1%链脲佐菌素.柠檬酸盐缓冲液60 m~Ckg制备糖尿病模型,取糖尿病模型制备成功的大鼠30只,随机分为3组(n=10):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和SH组.IR组和SFI组采用结扎冠状动脉左前降支30 min,再灌注120 min的方法建立心肌缺血再灌注模型,S组只穿线不结扎;SFI组开胸前以10ml·kg-1·h-1 的速率静脉输注SFI,开胸后以3 ml·kg-1·h-1的速率静脉输注至术毕,S组和IR组均静脉输注等容量乳酸钠林格氏液和羟乙基淀粉.于再灌注120 min时处死大鼠,取左心室心肌组织,计算心肌梗死面积.采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况,计算细胞凋亡指数.采用免疫组织化学法测定心肌组织PTEN和PI3K的表达水平,并计算其比值(PTEN/PI3K).观察心肌组织病理学结果.细胞凋亡指数与PTEN/PI3K行直线相关分析.结果 与S组比较,IR组和SFI组心肌梗死面积增加,细胞凋亡指数升高,PTEN和PI3K的表达上调(P<0.05或0.01),SFI组PTEN/PI3K降低(P<0.05);与IR组比较,SFI组心肌梗死面积减小,细胞凋亡指数降低,FTEN表达下调,PI3K表达上调,PTEN/PI3K降低(P<0.05);SFI组心肌损伤程度比IR组减轻.细胞凋亡指数与PTEN/PI3K呈正相关(r=0.452,P<0.05).结论 SFI减轻糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制与下调心肌组织FTEN表达,上调PI3K表达,从而激活PI3K/Akt信号通路有关.     

化痰消瘀、穴位埋线结合关节镜下关节腔清理术治疗早中期膝骨关节炎

目的:观察化痰消瘀、穴位埋线结合关节镜下关节腔清理术治疗早中期膝骨关节炎的临床疗效。方法:将符合标准的45例患者(52膝)随机分为2组。实验组22例(26膝)采用关节镜下关节腔清理术并自拟化痰消瘀蠲痹汤辨证施治、双侧足三里埋线治疗;对照组23例(26膝)采用关节镜下关节腔清理术并芬必得口服治疗。治疗后6个月,运用Lysholm功能评定标准评定两组患者的关节功能及总体疗效。结果:实验组膝关节功能及总体疗效优于对照组,差异有统计学意义(t=14.260,P=0.000;u=2.236,P=0.010)。结论:运用中药化痰消瘀、穴位埋线结合关节镜下关节腔清理术是治疗早中期膝骨关节炎的有效方法。     

犀角地黄汤合方含药血清调节ITP患者Teff/Treg分化及功能的研究#br#

目的　探究犀角地黄汤合方含药血清对免疫性血小板减少症（ITP）患者效应性T细胞（Teff）/调节性T细胞（Treg）分化的影响,并探讨磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路在其中的作用机制。方法　采用随机数字表法将20只大鼠分为含药血清组和空白血清组,每组10只,分别使用犀角地黄汤合方颗粒和蒸馏水连续灌胃3 d,收取2组大鼠全血制备含药血清和空白血清。收集健康志愿者和ITP患者外周血,提取外周血单个核细胞（PBMC）,磁珠分选CD4+ T细胞,抗CD3/CD28抗体培养体系活化后,分为对照组、模型组和实验组。对照组为健康志愿者CD4+ T细胞,模型组及实验组为ITP患者CD4+ T细胞,实验组采用含药血清干预72 h,对照组及模型组采用大鼠空白血清干预72 h。流式细胞术检测各组CD4+ T细胞中Teff/Treg比例;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组培养上清液中白细胞介素（IL）-2、干扰素（IFN）-γ、肿瘤坏死因子（TNF）-α、IL-6、IL-17及Treg细胞因子转化生长因子（TGF）-β、IL-10水平;Western blot检测PI3K、Akt、mTOR蛋白及磷酸化蛋白水平。结果　CD4阳性率为（99.44±0.01）%。与对照组相比,模型组CD4+ T细胞中Teff细胞比例明显升高,Treg比例明显降低,Teff/Treg比值增大,IL-2、IL-6、IL-17、IFN-γ、TNF-α水平以及PI3K、p-PI3K、mTOR、p-mTOR蛋白水平升高,TGF-β、IL-10、p-Akt蛋白水平降低（P＜0.05）;与模型组相比,实验组CD4+ T细胞中Teff细胞比例降低,Treg细胞比例升高,Teff/Treg比值减小,IL-2、IL-6、IL-17、IFN-γ、TNF-α水平以及PI3K、p-PI3K、mTOR、p-mTOR蛋白水平降低,TGF-β、IL-10水平升高（P＜0.05）。结论　犀角地黄汤合方含药血清能够调节ITP患者Teff/Treg的分化及细胞因子的分泌,可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路PI3K、mTOR蛋白表达及其磷酸化水平有关。     

甲基强的松龙联合益肾通痹汤对大鼠压迫性神经根损伤的保护作用

目的:探讨甲基强的松龙联合益肾通痹汤对大鼠压迫性神经根损伤的保护作用.方法:将90只SD大鼠随机分为5组,即空白组、模型组、甲基强的松龙组、中药组、甲基强的松龙+中药组,每组18只.采用王拥军等建立的腰神经根压迫造模法对模型组、甲基强的松龙组、中药组和甲基强的松龙+中药组大鼠进行造模,空白组大鼠切开背部后立即缝合.造模成功后,甲基强的松龙组以小剂量甲基强的松龙腹腔注射,中药组以益肾通痹汤灌胃,甲基强的松龙+中药组以小剂量甲基强的松龙腹腔注射并以益肾通痹汤灌胃;空白组和模型组仅以相同剂量的蒸馏水灌胃.分别于造模后第7天、第14天及第28天对各组大鼠的行为学特征和神经根损伤区变化进行观察.结果:①行为学特征:7 d时甲基强的松龙、益肾通痹汤单独使用均能降低大鼠行为学特征评分,且二者联合使用具有协同效应(甲基强的松龙:F=61.309,P=0.000;益肾通痹汤:F =98.078,P=0.000;联合应用:F=39.654,P=0.001);14 d时甲基强的松龙、益肾通痹汤单独使用均能降低大鼠行为学特征评分,且二者联合使用具有协同效应(甲基强的松龙:F=156.902,P=0.000;益肾通痹汤:F=196.267,P=0.000;联合应用:F =29.512,P=0.002);28 d时甲基强的松龙、益肾通痹汤单独使用均能降低大鼠行为学特征评分,且二者联合使用具有协同效应(甲基强的松龙:F =96.098,P=0.000;益肾通痹汤:F=78.204,P=0.000;联合应用:F=19.090,P=0.001).②正常神经元:7 d时各组正常神经元数量比较,差异有统计学意义(F=42.230,P=0.001);进一步两两比较,除模型组与中药组、甲基强的松龙组与甲基强的松龙+中药组比较差异无统计学意义外(P=0.087;P =0.069),其余各组间比较,差异均有统计学意义.14 d时各组正常神经元数量比较,差异有统计学意义(F=23.098,P=0.002);进一步两两比较,除模型组与甲基强的松龙组比较差异无统计学意义外(P =0.067),其余各组间比较,差异均有统计学意义.28 d时各组正常神经元数量比较,差异有统计学意义(F=34.543,P=0.001);进一步两两比较,除模型组与甲基强的松龙组比较差异无统计学意义外(P =0.098),其余各组间比较,差异均有统计学意义.③变性神经元:7 d时甲基强的松龙、益肾通痹汤单独使用均能减少变性神经元数量,且二者联合使用具有协同效应(甲基强的松龙:F=154.521,P=0.000;益肾通痹汤:F=102.721,P=0.000;联合应用:F=19.512,P=0.002);14 d时甲基强的松龙、益肾通痹汤单独使用均能减少变性神经元数量,且二者联合使用具有协同效应(甲基强的松龙:F =54.912,P=0.000;益肾通痹汤:F =60.451,P=0.001;联合应用:F=12.720,P=0.002);28 d时甲基强的松龙、益肾通痹汤单独使用均能减少变性神经元数量,且二者联合使用具有协同效应(甲基强的松龙:F=67.912,P=0.001;益肾通痹汤:F =53.109,P=0.001;联合应用:F=9.560,P=0.002).结论:甲基强的松龙联合益肾通痹汤能够减轻机械压迫性神经根损伤所导致的神经功能及组织形态病理学改变,促进损伤神经元修复以及正常神经元再生,具有改善神经功能、保护神经根的作用.     

天麻钩藤饮对自发性高血压大鼠心肌纤维化的影响

[目的]研究天麻钩藤饮对自发性高血压大鼠(SHR)心肌纤维化的影响及可能的作用机制.[方法]将24只8周龄SHR随机分成3组:即天麻钩藤饮组(剂量为20 g/kg)、卡托普利阳性对照组(剂量为100mg/kg)及高血压模型组(SHR组),并设正常对照组(同周龄正常血压大鼠8只),实验期24周.比较各组收缩压、左室质量(mLV)及左室质量指数(WLV)、心肌胶原含量,并采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测心肌胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的表达.[结果]天麻钩藤饮可显著降低SHR收缩压、mLV及wLV、心肌胶原含量及心肌组织中IGF-1表达水平(P<0.01).[结论]天麻钩藤饮可降低血压,抑制左室肥厚及心肌纤维化,其机制可能与减少心肌组织IGF-1表达有关.     

中西医结合辨证治疗急性重型颅脑损伤的临床观察

[目的]通过中西医结合辨证治疗急性重型颅脑损伤的规范化临床实施和观察,证明中西医结合治疗急性重型颅脑损伤患者的疗效,系统评价中医药治疗急性重型颅脑损伤的作用和意义.[方法]采用随机数字袁法将60例患者随机分为治疗组(中西医结合辨证治疗组)、对照1组(常规西医治疗加活血祛瘀法组)、对照2组(常规西医治疗组)各20例.治疗1个疗程(3周)后分别对其疗效、神经功能缺损评分变化和并发症情况进行比较.[结果](1)治疗组显效13例,有效5例,无效2例,总有效率为90.0%;对照1组显效8例,有效4例,无效8例,总有效率为60.0%:时照2组显效9例,有效6例,无效5例,总有效率为75.0%;3组比较,治疗组疗效优于两对照组(P＜0.05).(2)治疗组治疗后的意识刺激、面瘫、语言以及肌力均有改善(与治疗前比较,P＜0.05),对照l组的意识刺激、上肢肌力及手肌肌力和对照2组的意识刺激、面瘫、语言及肌力也有改善(与治疗前比较,P＜0.05),且治疗组在改善上述神经功能缺损评分方面优于对照l组与对照2组(P＜0.05).(3)并发症情况比较:治疗组的肺部感染和上消化道出血发生率与两个对照组比较,差异有显著性意义(P＜0.05).[结论]中西医结合辨证治疗能降低急性重型颅脑损伤患者致残率,促进脑神经功能恢复,减少并发症的产生.     

清毒饮和养正片对L7212白血病小鼠Fas基因及其可溶性受体的影响

[目的]探讨复方中药清毒饮和养正片抗急性白血病的疗效机理。[方法]采用L7212白血病小鼠模型,用原位末端标记法(TUNEL)观察清毒饮(由七叶一枝花、白花蛇舌草、大青叶、山慈菇等组成)、养正片(由黄芪、人参、补骨脂、赤灵芝、三七片等组成)和足叶乙甙(VP16)化疗对L7212的白血病细胞凋亡的影响;用免疫组化法检测L7212白血病小鼠骨髓有核细胞的Fas基因表达;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测可溶性Fas(sFas)。[结果]清毒饮组、养正片组、化疗组都可见较多凋亡阳性白血病细胞,清毒饮组优于养正片组,与化疗合用则更明显,凋亡指数均大于模型组(P<0.01);L7212白血病细胞Fas表达减低,给予清毒饮、养正片、化疗处理后Fas升高,清毒饮组亦较养正片组明显,清毒饮加化疗组则尤其明显(P<0.01);清毒饮组sFas较模型组明显降低(P<0.05),并接近正常空白组水平(P>0.05),养正片组则无明显变化。[结论]清毒饮、养正片能诱导L7212小鼠白血病细胞凋亡,并可促进化疗的诱导凋亡作用,以清毒饮尤为明显;清毒饮、养正片均能提高Fas的表达水平,清毒饮还可使L7212小鼠增高了的sFas水平降低。提示在急性白血病早期,采用祛邪攻毒中药可诱导其细胞凋亡并与化疗有协同作用;而此期采用扶正补虚中药则作用较差。     

通痹灵对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞产生IL-1、TNF-α及PGE2的影响

为探讨中药复方制剂通痹灵（以桂枝芍药知母汤为基础）对佐剂性关节炎大鼠（ＡＡ）滑膜细胞分泌白细胞介素１（ＩＬ－１）、肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）和前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）的影响,采用大鼠膝关节滑膜细胞原代培养的方法,检测脂多糖（ＬＰＳ）诱导关节滑膜细胞培养上清中ＩＬ－１、ＴＮＦ－α的活性和ＰＧＥ２的含量。结果：ＡＡ大鼠滑膜细胞培养上清中ＩＬ－１、ＴＮＦ－α的活性和ＰＧＥ２的含量高于正常组（Ｐ＜０．０１）;通痹灵可使ＡＡ大鼠滑膜细胞异常升高的ＩＬ－１、ＴＮＦ－α和ＰＧＥ２分泌功能恢复正常（与ＡＡ组比Ｐ＜０．０１,与正常组比Ｐ＜０．０５）;甲氨喋呤（ＭＴＸ）也在一定程度上下调了滑膜细胞的分泌功能（与ＡＡ组比Ｐ＜０．０１,与正常组比Ｐ＜０．０５）;消炎痛对ＰＧＥ２的产生具有明显的抑制作用（与ＡＡ组比Ｐ＜０．０１,与正常组比Ｐ＜０．０１）,但进一步上调了ＡＡ大鼠滑膜细胞分泌ＩＬ－１、ＴＮＦ－α的功能（与正常组比Ｐ＜０．０１）。结论：ＩＬ－１、ＴＮＦ－α和ＰＧＥ２在类风湿性关节炎（ＲＡ）发病机理中占有重要地位;通痹灵对ＲＡ的治疗作用可能与其抑制滑膜细胞过度分泌细胞因子及炎症介质有关。     

射麻止喘液对过敏性哮喘豚鼠的作用

射麻止喘液（射干,麻黄,桔梗,杏仁,细辛,地龙,半夏,椒目,甘草等中药组成）是广州中医药大学第一附属医院研制的治疗支气管哮喘的有效方剂,为探讨其作用机理,采用放射免疫分析方法,观察经该方治疗后实验性过敏性哮喘豚鼠血浆及肺组织内皮素水平的变化,并进行细胞形态学观察。     

中西医结合治疗胎盘植入

胎盘植入是产科少见而危重的一种并发症。为寻找一种免行清宫术及子宫切除的保守治疗方法,将１７例胎盘植入患者分为２组,治疗组采用在静脉滴注甲氨喋呤（ＭＴＸ）的基础上,结合中医活血化瘀治疗,方用血府逐瘀汤加减（柴胡、生地、当归、川芎、枳实、桃仁、红花、赤芍、三棱、莪术等）。对照组不服中药,加用宫缩素及抗菌素治疗。结果：治疗组９例胎盘植入患者全部免行清宫术及子宫切除而获痊愈。而对照组８例中,５例行清宫术,