新免疫抑制剂─—康乐霉素C的发酵、分离、理化性质和生物学性质

从我所提供的Ｎｏｃａｒｄｉａｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅｉｖａｒ．ｋａｎｇｌｅｎｓｉｓ１７６７－６４已分离出了３种确定了经构的新抗生素，即康乐霉素Ａ［１］、康乐霉素Ｃ［２］和３１－ｈｏｍｏｒｉｆａｍｙｃｉｎＷ［３］。由于康乐霉素Ｃ具有很强的免疫抑制作用，在体外其活性如环孢菌素Ａ，具有很好的抗肿瘤活性。本文报道康乐霉素Ｃ的发酵、分离、理化性质和生物学性质。     

云南产螺旋藻多糖的分离纯化与分析

云南程海湖工业化养殖的螺旋藻（干品）经热水提醇沉，ｓｅｖａｇ法脱蛋白，透析，再经ＤＥＡＥ－ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ａ２５与ｓｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析纯化，得螺旋藻多糖（ＰＳＰ）。用纸层析，柱层析及电泳检查纯度，表明ＰＳＰ为单一组分。ＰＳＰ经ＵＶ－３００扫描，无核酸（２６０ｎｍ）及蛋白质（２８０ｎｍ）特征吸收峰。ＩＲ－４００扫描，出现典型多糖吸收峰。经纸层析及气相色谱分析表明ＰＳＰ组成单糖为Ｌ－岩藻糖、Ｄ－甘露糖、Ｄ－半乳糖、Ｄ－葡萄糖和葡萄糖醛酸。ＰＳＰ平均分子量约为１６６００。     

大鼠背根神经节细胞的分离及特性探讨

目的探讨大鼠背根神经节（dorsal root ganglion，DRG）细胞的分离方法以及细胞形态和电生理特征。方法采用显微外科技术获取大鼠DRG体，用双酶法急性分离大鼠DRG获得DRG细胞，全细胞膜片钳技术记录动作电位和钠电流。结果本实验能得到完整圆形或椭圆长条形的大鼠DRG体。正常的单个DRG细胞呈圆形或椭圆形，大小不等，胞膜清晰，折光性好，隐约可见细胞核。在DRG细胞上记录的动作电位都具有从0期到4期，呈正立锐角三角形，静息电位小，动作电位时程短。DRG细胞的钠通道最大电流密度在-30mV左右，几乎能被，TTX完全抑制，具有可逆性恢复。结论本实验采用分离方法简单易行，DRG细胞容易获得和辨认，适合膜片钳技术要求，电生理特征明确可靠，值得推崇。     

大鼠A型精原干细胞的分离和纯化

目的摸索完善A型精原干细胞分离、纯化的方法与技术。方法选用9d的SD大鼠,不连续Percoll梯度液分离纯化精原干细胞,应用选择性贴壁法进一步纯化精原干细胞;台盼蓝排斥实验确定精原干细胞的活力;HE染色法观察细胞形态;c-kit细胞免疫组化鉴定细胞类型并进行细胞纯度分析。结果台盼蓝实验显示细胞活力维持于88.73%±0.85%;c-kit细胞免疫组化结果显示分离得到细胞为精原干细胞;细胞纯度为90.48%±1.78%。结论应用梯度离心及选择性贴壁法获得了纯度较高的A型精原干细胞。     

大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养表型鉴定与标记

目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）体外分离培养、表型鉴定和标记的方法，为临床进行细胞移植治疗心、肝、脑等器官急性衰竭提供种子细胞。方法 无菌条件下取大鼠股骨、胫骨和腓骨，用冲洗法冲出骨髓，用直接贴壁法分离纯化MSCs，体外扩增，用免疫细胞化学法及流式细胞仪分别对培养的MSCs进行鉴定，并检测第3代MSCs的细胞周期。结果体外培养的原代MSCs 72h内可见有少量贴壁细胞，7d左右达到汇合。免疫细胞化学示，MSCs CD29、CD44、CD73、CD105、CD166表达阳性，而CD14、CD34、CD45表达阴性。流式细胞仪示，CD14阳性率为0．19％、CD29为64．36％、CD34为0．17％、CT44为86．73％、CD45为0．18％、CD73为90、21％、CD105为74．25％、CD166为54．60％。细胞周期显示，第3代MSCs约有90％的细胞处于G0／G1期。结论 MSCs在体外很容易分离培养和扩增，DAPI标记MSCs敏感性好，标记效率高，可作为标记细胞的一种有效手段，MSCs体外培养成功为细胞移植治疗急危重症器官衰竭提供新的治疗途径。     

Comparison of two digestion strategies on characteristics and differentiation potential of human dental pulp stem cells

Objective: This study aimed to compare the behavior of dental pulp stem cells (DPSCs) after isolation using solutions containing either collagenase/dispase or collagenase alone.Design: DPSCs were isolated by two digestion methods (collagenase/dispase or collagenase alone) from human third molars. Immunophenotypic features were confirmed by flow cytometry for cell markers STRO-1, cluster of differentiation (CD) 146, CD45, and collagen type-I. The proliferation potential of cells was evaluated by 5-bromo-2′-deoxyuridine (brdU) incorporation assay, and finally they were assessed for multi-lineage differentiation potential. Data were analyzed using one-way analysis of variance and independent t-tests.Results: DPSCs isolated by either method showed similar levels of STRO-1, CD45, and collagen type-I and similar incorporation of brdU (P > 0.05). However, DPSCs obtained by collagenase I/dispase treatment had significantly higher numbers of CD146⁺ cells and osteogenic and chondrogenic capacities compared to those obtained by treatment with collagenase I alone (P < 0.05). On the other hand, more STRO-1+/CD164-DPSCs were found in the collagenase alone group with higher adipogenic potential.Conclusions: Different enzyme solutions gave rise to different populations of DPSCs. Dispase enhanced isolation of CD146⁺ DPSCs probably by disrupting the basement membranes of blood vessels and releasing DPCSs embedded in the perivascular niche. Furthermore, the differentiation potential of DPSCs was influenced by the change in enzyme solution.     

鸭绿江中上游水中细菌种类的研究

目的了解鸭绿江中上游水中细菌的种类。方法采集鸭绿江中上游不同水域的水样,经增菌培养、细菌分离,进行细菌学鉴定。结果从鸭绿江中上游水中分离出细菌387株,其中肠杆菌科细菌149株,弧菌科细菌133株,非发酵菌23株,革兰氏阳性杆菌6株,革兰氏阳性球菌76株。结论鸭绿江中上游水中细菌种类多。本次调查可为该水域细菌感染的防治及控制传染病的暴发流行提供参考。     

血培养阳性标本352份的细菌分布及耐药性分析

目的了解血培养阳性标本细菌分布及耐药情况,为菌血症、败血症的诊断及临床用药提供依据。方法回顾分析2011年江阴市人民医院住院及门诊病人送检的血培养阳性标本。采用美国BD公司的BACTEC9120全自动血培养仪及法国梅里埃公司的VITEK32全自动细菌分析仪对阳性标本进行鉴定及药敏试验。结果 352份血培养阳性标本中革兰阳性菌173株,占49.15%;以表皮葡萄球菌、溶血性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌为主,对大多数试验药物敏感性较高,但对青霉素均耐药。革兰阴性菌176株,占50.00%;以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌为主,除铜绿假单胞菌耐药性较高外,其他2种菌对多数抗菌药敏感程度较高。另外,还检出1株白假丝酵母菌,1株热带假丝酵母菌,1株厌氧菌。结论血培养分离的病原菌中革兰阳性菌与革兰阴性菌所占比率差别不大,但病原菌种类较多,根据耐药试验结果,提示应高度重视合理使用抗菌药物,减少细菌耐药性产生,以提高临床治疗效果。