土样自然风干时间对放线菌分离的影响

目的:研究最有利于土壤放线菌分离的自然风干时间。方法:通过对海南的土壤样品自然放置1、7、15、21、30d的土样分别进行分离,并对其细菌、真菌、放线菌菌落数进行统计。结果:放置7d的土样,细菌和真菌菌落数下降明显,且放线菌种类齐全;放置21d的土样放线菌挑取基本不受细菌和真菌菌落的影响,且放线菌单菌落突出,其种类减少不明显。结论:故土样放置7d和21d适合放线菌的分离。     

神经生长因子在不同周龄小鼠睾丸组织中的表达

目的对贵州小型猪幽门螺杆菌进行分离鉴定。方法采集1只生长发育异常迟缓的小型猪标本,采用细菌学分离培养、生化鉴定、药敏试验、血清学试验、PCR检测等方法进行鉴定,并对细菌的分子生物学特征进行分析。结果分离到1株细菌,经鉴定为幽门螺杆菌（HPp0812）。用螺杆菌属16SrRNA基因和幽门螺杆菌ureA基因特异引物对HPp0812细菌的PCR扩增为阳性,经核苷酸序列测定分析证实上述序列与幽门螺杆菌参考株基因序列同源性高达99％。结论首次从中国小型猪中分离到了幽门螺杆菌,为进一步研究该菌及开展流行病学调查提供了科学依据。     

楮头红化学成分的分离与鉴定

目的:分离、鉴定楮头红乙醇提取物中的化学成分。方法:用60%乙醇浸泡提取楮头红,系统溶剂萃取楮头红乙醇提取物,并用硅胶、SephadexLH-20和ODS等柱色谱方法分离氯仿和乙酸乙酯部位,再根据化合物的理化性质、核磁共振光谱和电喷雾质谱数据与相关文献对照鉴定其结构。结果:从楮头红乙醇提取物的氯仿和乙酸乙酯部位中分离得到7个化合物,分别为β-谷甾醇(1)、胡萝卜苷(2)、山柰酚(3)、槲皮素(4)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(5)、芦丁(6)和山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(7),其中化合物3～7为首次从该植物中分离得到。结论:本试验结果可为楮头红的进一步开发利用提供物质基础。     

马齿苋化学成分的分离与鉴定

目的：对马齿苋的化学成分进行分离与鉴定。方法：采用大孔吸附树脂柱、硅胶柱及制备高效液相色谱等色谱方法分离化合物,并通过核磁共振波谱和电喷雾质谱、无畸变极化转移增强谱、1H-1H-COSY谱、异核多量子关系谱、多键碳氢关系谱等谱学技术确定分离出的化合物结构。结果：从马齿苋提取物中分离得到5个化合物,分别为丁香苷（1）、十三烷酸（2）、9,12-十八碳二烯酸（3）、11,14,17-二十碳三烯酸（4）、二十六烷酸（5）,均为首次从该植物中分离得到。结论：本试验结果可为马齿苋的进一步开发利用提供依据。     

大鼠胰岛分离及纯化方案的改进

目的优化大鼠胰岛分离纯化条件,为糖尿病胰岛受损的发病机制研究及胰岛再生的应用提供必要材料。方法胆总管原位灌注胶原酶V消化胰腺并分离胰岛后,比较经典不连续密度梯度Ficoll离心法和Histopaque1077密度离心法纯化胰岛的效果,其间观察胰腺灌注液体积及消化时间不同对大鼠胰岛分离纯化的影响,并对纯化后的胰岛进行数量、纯度和功能的体外检测。结果 Histopaque 1077密度离心法比经典不连续密度梯度Ficoll离心法可得到更多优质的胰岛(P<0.01)。两种方法获得的胰岛在高糖刺激下释放胰岛素的能力差异无统计学意义(P>0.05)。胰腺灌注液之体积及消化时间对胰岛提取有十分重要的影响。结论 Histopaque 1077密度离心法简单易行且效率较高,有望成为纯化大鼠胰岛的首选方法,便于临床和基础研究工作的开展。     

小鼠胚胎胰腺组织分离及内分泌功能鉴定

目的探索小鼠胚胎胰腺组织分离技术,并对其形态学及内分泌功能进行鉴定。方法胚胎期（embryonic,E）11．5～16．5dC57BL／6小鼠胚胎胰腺组织体视显微镜下进行分离。利用常规HE染色、免疫组织化学及免疫荧光实验对分离的E12．5d、E14．5d及E16．5d胚胎胰腺组织进行组织学鉴定;糖刺激实验观察胚胎胰腺组织的内分泌功能。结果〉E12．5d小鼠胚胎胰腺组织可较易完整分离。≤E12．5d小鼠胚胎胰腺组织的形态和颜色均难以与周围组织分辨,需根据其与毗邻脏器的关系仔细辨别。分离的早期胚胎胰腺组织已有胰岛素表达,随着胚胎发育,胚胎胰腺组织胰岛素表达强度逐渐增加。结论小鼠胚胎发育和解剖学知识掌握,可提高胚胎胰腺组织分离技术,保证分离获得完整的胚胎胰腺组织,为胚胎胰腺组织移植研究奠定基础。     

Aging-related changes in the effects of social isolation on social behavior in rats

Aging is generally associated with cognitive dysfunction and alterations in emotional response. Moreover, in social situations, aging decreases social interaction with unfamiliar individuals, suggesting the decline of social cognition/motivation and a high level of anxiety. Although it is known that isolation housing has various effects on subsequent behavior, including social interaction depending on the age at isolation, the effects of isolation on aged subjects have not been examined. In the present study, we investigated the effects of aging and different periods of isolation housing on social interaction in male F344/N rats. Young (3-4 months old) and aged (24-25 months old) rats were either group-housed or socially isolated for 2 or 4 weeks. The rats were tested with age-matched and group-housed unfamiliar males in a social interaction test, and social (e.g. approach/following and sniffing) and non-social behaviors (e.g. self-grooming and ambulation) were recorded. The results indicated that group-housed aged rats showed less approach/following, sniffing, and ambulation than group-housed young rats. Moreover, in young rats, isolation housing gradually increased approach/following and sniffing depending on the isolation period. In contrast, in aged rats, more prolonged isolation (4 weeks) attenuated the 2-week isolation-induced increase of sniffing behavior and had no effect on approach/following. The present study suggests that aging decreases social investigation and induces high emotional response to a novel social environment, and that the behaviors can be differentially affected by social isolation depending on the age at isolation and the period of isolation.     

新生大鼠心肌细胞原代培养方法的改进

目的：对新生大鼠心肌细胞分离培养方法进行改进,以期获得较高纯度和活力的心肌细胞;方法：采用胶原酶消化法分离大鼠心肌细胞,控制消化时间、消化温度、搅拌速度、离心次数和速度等,结合贴壁分离和Brd U干预纯化心肌细胞,流式细胞仪分析肌钙蛋白Ⅰ（troponin Ⅰ,Tn Ⅰ）表达,荧光探针进行胞浆游离钙离子染色;结果：多数心肌细胞自动收缩,逐渐聚集形成肌管,troponin Ⅰ阳性率达92％,所有心肌细胞钙离子染色阳性,并随细胞收缩呈周期性变化;结论：该方法分离培养的心肌细胞具有较高的纯度和活力。     

以膜片钳技术急性分离新生大鼠尾核神经元

背景：许多离子通道研究需要单个分散的神经元。人工原代培养的神经细胞受环境的影响,自身特性改变较大,而急性分离的神经元却能相对保持完好的生理特性。 目的：建立急性分离尾核神经元的方法,用膜片钳技术研究尾核神经元离子通道及其信号转到机制,利于深入了解尾核的功能。 设计、时间及地点：以细胞为对象的观察实验,于2008-02/12在三峡大学医学院实验中心完成。 材料：新生7~10 d Wistar乳鼠12只,雌雄不限。 方法：取7~10 d的大鼠,采用酶和机械分离法制备分散的单个尾核神经元,利用全细胞膜片钳技术记录电压依赖性钙电流。 主要观察指标：用全细胞膜片钳急性分离大鼠尾核神经元的形态学视察和电生理特性。 结果：用链蛋白酶(Protease)消化及机械分离法,急性分离的新生大鼠尾核神经元,表面光洁,胞膜完整,有较长的突起,形态和生理特性良好。利用急性分离的新生大鼠尾核神经元观察L-钙离子通道电流,所记录的电学参数在正常生理范围内,较好地保存电压依赖性钙离子通道活性。 结论：分离出的神经元形态正常,有较长的轴突;保存了主要的离子通道活性,成功建立了一种适用于膜片钳技术的大鼠尾核神经元急性分离方法。     

麻疹野病毒的分离鉴定及病毒分离的影响因素

目的确定吉林省近年流行的麻疹病毒基因型,分析麻疹野病毒分离的影响因素,为防控措施的制定及做好麻疹病原学检测提供参考依据。方法利用Vero／Slam细胞对114份麻疹咽喉拭子标本进行麻疹病毒分离,用逆转录一聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析方法扩增麻疹病毒核酸并进行基因型鉴定;统计分析不同采样时问、不同咽试子保存液对麻疹病毒分离的影响。结果114份麻疹咽喉拭子标本中分离到麻疹病毒31株,经鉴定均为H1基因型,出疹2d内的标本分离率较高,为38．09％。2％DMEM维持液作为咽拭子保存液的病毒分离成功率为30．69％。0．9％生理盐水作为保存液的病毒分离率为0。结论H1基因型麻疹病毒为吉林省近年流行的主要优势基因型,麻疹病毒的成功分离取决于采样时间、好的标本质量以及正确标本保存液。