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31.
骨肉瘤细胞特异性结合短肽的筛选 总被引:2,自引:1,他引:1
目的:获得与骨肉瘤细胞株os-732特异结合的短肽,作为骨肉瘤靶向治疗的先导化合物。方法:以骨肉瘤细胞os-732为靶细胞,成骨细胞为吸附细胞对噬菌体12肽库进行差减筛选,用细胞ELISA、免疫组化鉴定阳性噬菌体克隆并测序。结果:经三轮筛选,从随机挑选的20个噬菌体克隆中得到9个特异性与骨肉瘤细胞os-732结合,而不与正常成骨细胞结合的阳性克隆。但其氨基酸序列无同源性。结论:得到多个序列不同的特异性结合骨肉瘤的噬菌体克隆,提示骨肉瘤细胞表面结构复杂,具多个骨肉瘤抗原表位。本实验获得的短肽具有一定的亲合力和肿瘤特异性,为针对不同位点的靶向药物设计提供了实验依据。 相似文献
32.
pp32表达引起人肝癌细胞HepG2形态改变 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:研究pp32在肝癌细胞中的作用.方法:采用RT-PCR的方法钓取pp32全长基因.脂质体介导的方法将pp32基因导入HepG2细胞.观察细胞形态,血清依赖性和接触抑制等细胞表型,测量细胞生长曲线,检测ALP、LDH、γ- GT、ALB和AFP等生化指标.结果:成功钓取了pp32全长基因,筛选获得pp32稳定表达的HepG2细胞株.pp32表达使HepG2细胞伸出细长突起,但不影响HepG2细胞增殖.ALP和LDH酶活力升高,其他指标没有变化.结论:pp32表达引起人肝癌细胞HepG2形态改变,但不改变其恶性表型. 相似文献
33.
目的构建诱导型表达载体pTKS3-CAT,并转染人表达G-CSF受体的NFS-60不依赖细胞,将粒细胞集落刺激因子(G-CSF)依赖的细胞株鼠髓样白血病细胞株NFS~60,筛选为NFS-60不依赖细胞的克隆。方法在培养体系中加入0.5-10ng/ml浓度的rhG-CSF,培养、传代。结果得到NFS-60不依赖细胞株的克隆,其细胞表面包含G-CSF相应受体,而增殖曲线不依赖于G-CSF因子浓度。结论克隆NFS-60不依赖细胞作为工程细胞用于G-CSF样活性化合物发现的研究。 相似文献
34.
环氧乙烷对大鼠DNA损伤机理的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为探讨环氧乙烷(EtO)对DNA分子水平的损伤作用,采用血红蛋白基因特异性的单引物,对用EtO染毒不同时间的Wistar雄鼠和对照个体的肝、肾、睾丸等组织的DNA进行半随机PCR扩增。结果显示:在吸入染毒(800mg/m3)6~9周条件下,EtO可引起肝、肾、睾丸等组织不同程度的DNA损伤,其中睾丸组织DNA损伤最为严重。 相似文献
35.
36.
微生物来源的作用于微管的活性物质及其筛选模型的研究 总被引:3,自引:1,他引:2
张克 《国外医药(抗生素分册)》1998,19(4):260-264
随着对紫杉醇(taxol)作用机理的深入研究,作用于微管的药物已引起广泛的重视.微管是真核细胞的重要组成部分,参与许多细胞功能,包括染色体运动,细胞形状的变化,细胞内运动,稳定细胞膜表面受体及与纤毛、鞭毛有关的细胞运动.由于微管在细胞分裂中有着重要作用,一些干扰微管功能的化合物可使细胞停留在有丝分裂期,从而达到抗肿瘤的效果.因此,微管成为许多抗肿瘤药物的重要靶点,筛选抗微管药在抗癌药物研究中尤为令人注目. 相似文献
37.
活性氧自由基在生物体内参与生理,病理过程并起重大作用,在筛选和评价抗氧化药物时,越来越需要一种快速,简便,价廉而又可靠的抗氧化活性测定方法,本文发展了一种具备了上述优点新方法,SOD(超氧化物歧化酶)及其模拟物的工作已有很多,很多文献报道了其活性一;Cu(Ⅱ)。本文着重研究了另一个金属辅基,Zn^2+并且发现了Zn^2+独特的,但为人们忽视了的;抗氧化活性加强作用。 相似文献
38.
筛选肿瘤抑制基因的方法 总被引:1,自引:0,他引:1
目前,分离和鉴定的抑癌基因还很少,其主要百由于抑癌基因属于野生型基因,很难通过选择法得到。因此,我们对分离克隆抑癌基因的几咱方法加以介绍和分析。最近发明的一种称为差异表达mRNA呈现技术具有很多优越性,特别适合分离鉴定抑癌基因。 相似文献
39.
本文通过半巢式PCR对 82例慢性胃炎和十二指肠溃疡患者的牙菌斑、唾液及胃黏膜中的幽门螺杆菌 (Hp)进行了检测。 82例患者中活动期十二指肠溃疡患者 2 4例 ,慢性浅表性胃炎 2 7例 ,慢性萎缩性胃炎 31例 ,其中男性 4 2例 ,女性 4 0例 ,平均年龄 4 2 .3岁。半巢式PCR首先以 1对引物扩增出磷酸葡萄糖胺变位酶基因 (phosphogluco saminemu tasegene ,glmM) 75 6bp的片段作为模板 ,再以半巢式引物扩增出 4 96bp的最终产物。引物 0 :5′ CGCGAGCCACAACCCTTTTGAAG 3′ ;引物 1:5′ CGCGCTCACTTGCAAAGCGCACAC 3′;引物 2 :5′… 相似文献
40.
氨甲酰磷酸合成酶单克隆抗体的制备、鉴定及应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:制备抗人氨甲酰磷酸合成酶(CPSI)的单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定与应用.方法:将正常成人肝组织匀浆离心并分离线粒体,用线粒体总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备 mAb,并通过间接ELISA法、Western blot、免疫组化及免疫荧光染色的方法对mAb进行特性鉴定,通过免疫沉淀联合质谱、Uni-ZAP XR表达文库筛选鉴定抗原,借助免疫捕获的方法用抗体来分离复合物.结果:获得3株可稳定分泌抗人CPSI mAb的杂交瘤细胞系.mAb的Ig亚类(型)为IgGl(K),该mAb可用于ELISA检测、Western blot、免疫组化、免疫荧光染色、免疫沉淀实验和复合物的分离.结论:成功制备了抗人CPSI的mAb,为CPSI的研究提供了有力的工具. 相似文献