福建省北部林区人群人粒细胞无形体血清流行病学检测

目的了解福建省北部林区人群人粒细胞无形体病感染状况与分布特点,以及无形体与莱姆病、恙虫病重叠感染的情况,为林区人群无形体的预防提供科学依据。方法2007年7月开始在福建省武夷山林区采集林业工人、农民和干部等269份血清,用试剂盒采用间接免疫荧光法(IFA)检测人粒细胞无形体、莱姆病和恙虫病抗体,并进行不同地区、年龄、性别、职业分布比较。数据库建立和统计分析均采用SPSS14.0,χ2检验的显著性水平α=0.05。结果269份血清中检出46份人粒细胞无形体血清抗体阳性,阳性率17.10。人粒细胞无形体血清抗体除年龄外不存在地区、性别、职业差异。46份人粒细胞无形体抗体阳性的血清中检测到1份与莱姆病混合感染,9份混合感染了莱姆病和恙虫病病原体。结论福建省武夷山林区人群存在人粒细胞无形体感染,并且是莱姆病、恙虫病重叠流行区。在林区人粒细胞无形体病、莱姆病、恙虫病三者的防治应同时进行。     

PCR和免疫荧光法诊断急性肺炎衣原体感染的研究

[目的 ]探讨聚合酶链式反应 (PCR)和免疫荧光法 (IF)联合应用诊断急性肺炎衣原体感染 ,寻找早期诊断的有效方法。[方法 ]采集咽拭子标本 ,用PCR法检测肺炎衣原体DNA ,采静脉血用IF法检测IgG和IgM抗体。[结果 ]在所有 76个病例中 ,PCR检测和血清抗体同为阳性 6例 ,只有PCR阳性的病例 3例 ,只有血清抗体为阳性的 1例。联合使用 2种方法 ,检出结果的阳性率比单独任何 1种方法高 (P <0 0 1)。[结论 ]联合应用PCR和免疫荧光法在诊断急性肺炎衣原体感染中较单独使用任何 1种检测方法具有快速、全面、敏感和特异的优点。     

猪细小病毒单克隆抗体的制备和鉴定

目的制备猪细小病毒(PPV)杂交瘤细胞株,并对其分泌的PPV单克隆抗体进行鉴定。方法按常规方法制备并获得2株杂交瘤细胞。用染色体分析对杂交瘤细胞进行鉴定,用间接ELISA、免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)和间接免疫荧光试验(IFA)对其分泌的单克隆抗体进行效价测定、亚型鉴定和特异性鉴定。结果得到2株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株2H9、1F9,染色体数目介于90～110之间。细胞上清效价均达1∶1×104,腹水效价均达1∶1×107,其亚型分别为IgG1、IgM,均为kappa链。2H9、1F9单抗与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒I型(PCV-1)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)、乙脑病毒(JEV)等均无交叉反应。IPMA和IFA检测结果显示2H9、1F9单抗均能与接种于PK-15细胞的PPV发生特异性反应。结论成功制备了2株抗PPV杂交瘤细胞株,证实其产生的单克隆抗体具有良好的特异性和敏感性。     

大鼠仙台病毒ELISA、间接免疫荧光和免疫印迹三种检测方法的比较

目的比较ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)、IFA(immuno-fluorescence assay)和WB(Western blot)三种方法在大鼠仙台病毒血清学检测中的差异。方法仙台病毒蛋白抗原经凝胶电泳分离转移后用于血清学检测的WB方法;使用IFA、ELISA方法对20份无菌大鼠、227份SPF大鼠以及63份清洁级大鼠送检血清样品进行检测,阳性及可疑样品用WB方法进行了验证。结果 20份无菌大鼠血清样品被3种方法检测为仙台病毒抗体阴性;SPF级大鼠样品被IFA方法判定为阴性,1.32%(3/227)被ELISA方法判定为阳性,其中有2/3被WB确认为阳性;ELISA、IFA和WB在清洁级大鼠样品中检出仙台病毒的阳性率分别为为18.12%、11.34%和15.87%。结论三种检测方法灵敏度从高到低依次为ELISA、WB和IFA。WB方法可作为IFA和ELISA难以确定结果的替代方法。     

实验小鼠痘病毒感染检测分析

小鼠痘病毒急性感染可导致实验小鼠脱脚病 (鼠痘 )发作 ,临床症状明显 ,发病动物短期内大量死亡。近 10年某地区鼠痘发生次数依次为昆明小鼠 (7次 )、NIH小鼠 (3次 )、ICR小鼠 (2次 )和BABL c小鼠 (1次 )。无明显临床症状慢性持续性感染 (隐性感染 ) ,是病毒传播或转化成急性感染主要原因 ,用免疫荧光技术 (IFA)可检测到病毒抗体 ,鸡胚病毒培养意义不大。流行病学调查证实IFA抗体阳性小鼠群体脱脚病发病率显著高于IFA抗体阴性小鼠群体 (P <0 0 0 1)。     

莱姆病诊断技术应用探讨

目的:探讨不同莱姆病诊断技术的灵敏度和特异度。方法:应用间接免疫荧光抗体法(IFA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、蛋白印迹法(WB)3种方法检测新疆123例疑似莱姆病患者血清及部分脑脊液抗伯氏疏螺旋体IgM、IgG抗体,其中3例PCR法检测尿液,结合相应的影像学、电生理检查诊断莱姆病。似然比方法计算灵敏度。结果:依据中国疾病控制中心制定的标准确诊莱姆病43例。其神经系统、皮肤损害、关节炎发生率分别为31·7%(39/123),1·62%(2/123),1·62%(2/123)。IFA、ELISA、和WB3种检验方法的阳性率分别为60·47%、48·84%、39·53%。用似然比方法计算灵敏度:IFA为60·47%、ELISA为48·84%、WB为39·53%;联合灵敏度为79·60%;特异度均为100%。3例PCR均阳性。结论:应用IFA、ELISA和WB技术检测血清和脑脊液抗伯氏疏螺旋体抗体有助于临床诊断。     

青岛地区供血者巨细胞病毒特异性抗体检测

我们采集青岛地区344名供血者单份血清做巨细胞病毒(HCMV)感染状况调查。用IFA测HCMV-IgG,ELISA测HCMV-IgM、HCMV-IgA。其抗体阳性率分别为99.45%、4.65%和3.20%。结果表明青岛地区供血者HCMV感染普遍,活动性感染的发生率高于国外的报道。根据目前的状况,以HCMV-IgG做为筛选供血者的指标是不现实的。     

以异种抗原间接荧光抗体试验检测间日疟原虫抗体的评价

使用Pc及Pf抗原对单纯间日疟流行区的疟疾病人血清进行IFA试验,以评价其替代PV抗原检测间日疟原虫抗体的效应程度。用Pc,Pc及Pf抗原分别检测155例确诊的间日疟病人血清,其GMRT依次为175.8,37.4及12.7,两两相比均有非常显著差异;其阳性符合率依次为97.4％,81.9％及63.9％,差异亦非常显著。3种抗原测得的抗体滴度进行直线回归分析,获得表示Pv和Pc抗原检测间日疟原虫抗体时抗体滴度关系的回归方程Y=1.22+0.65X。假此方程,通过Pc抗原检测时的抗体滴度,可能推算用Pv抗原检测时的抗体滴度。     

应用螨抗原片间接荧光抗体试验（IFA）诊断肺螨病的研究

本文首次应用以粉螨类为主的混合螨种制成的螨抗原片作间接荧光抗体试验(IFA),55例患者的阳性率为90.91％,阳性滴度几何均值为121.10,15例阴性对照3例显示荧光,其中最大滴度为1:8。荧光显色的螨体轮廊清晰可辨,体表呈荧光浓染。结果提示患者体内产生了针对螨抗原的特异性IgG,螨体抗原性较强的部位在体表、螫肢和足,同时表明本文创用的螨抗原片间接免疫荧光试验具有较高的敏感性和特异性,对肺螨病的辅助诊断具有一定的实用价值。