硫化氢对肝纤维化大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

【目的】探讨硫化氢（H2 S）对肝纤维化大鼠肝脏缺血再灌注损伤（HIRI）的保护作用。【方法】32只SD大鼠通过胆总管结扎法建立大鼠肝纤维化模型,随机分为4组：①假手术组（Sham组）,② HIRI组,③硫化氢钠（NaHS）预处理组（NaHS组）,④NaHS预处理＋ PI3K抑制剂组（LY294002组）。检测各组谷草转氨酶（Aspartate transaminase ,AST）、谷丙转氨酶（Alanine aminotransferase ,ALT）、超氧化物歧化酶（Super‐oxide Dismutase ,SOD）、丙二醛（Malondialdehyde ,MDA）水平;取左肝外叶组织,透射电镜观察肝细胞细胞中自噬泡情况;Western Blot技术检测各组细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3B及Akt表达水平。【结果】与Sham组比较,其他三组AST 、ALT、MDA水平均显著升高（ P ＜0．05）,其中NaHS组较 HIRI组损伤减轻（ P ＜0．05）,LY294002组较NaHS组损伤加重（ P ＜0．05）,SOD 改变与之相反。与Sham组比较,其他各组自噬泡均增多,其中NaHS组较HIRI组自噬体减少,LY294002组较NaHS组自噬体增多,自噬相关基因表达发生相应的改变。【结论】外源性H2 S对肝纤维化大鼠HIRI发挥保护作用的机制之一,可能是通过PI3K／Akt信号通路抑制细胞自噬作用来实现的。     

不育男性精浆中过氧化氢测定在评估精液质量中的意义

目的:探讨精浆中过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)测定在评估精液质量中的应用价值。方法:收集79例男性不育患者的精液标本,按照精子密度分为A1组(精子密度≥15×106/mL)和A2组(精子密度<15×106/mL);按前向运动精子总数分为B1组(前向运动精子总数≥7.2×106)、B2组(前向运动精子总数<7.2×106);按照精子活动率分为C1组(活动率≥40%)和C2组(活动率<40%)。用比色法测定得出精浆中过氧化氢浓度,使用精子自动分析仪进行精液分析。计算出每106个精子所产生的过氧化氢含量(H2O2/精子密度),然后比较不同组之间的H2O2浓度和H2O2/精子密度有无差异。结果:(1)A1、B1和C1组中的精浆中H2O2与A2、B2、C2组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)A1、B1、C1组中H2O2/精子密度分别低于A2、B2、C2组(P<0.05)。结论:检测精浆中的H2O2可反映不育人群的精液质量,与单纯测定精浆中过氧化氢浓度相比,计算H2O2/精子密度在评估男性不育患者的精液质量方面有更高价值。     

外源性硫化氢对脑缺血再灌注损伤大鼠海马气体信号分子的影响

目的 研究外源性硫化氢（H2S）对脑缺血再灌注损伤大鼠海马气体信号分子的影响。方法 雄性Wistar大鼠24只，日龄90-120 d，体重180-220 g，随机分为4组，每组6只：对照组（Ⅰ组）、脑缺血再灌注组（Ⅱ组）、脑缺血再灌注＋50μmol／L NaHS组（Ⅲ组）和脑缺血再灌注＋100μmol／L NaHS组（Ⅳ组）。采用四动脉阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注损伤模型，Ⅰ组行假手术，Ⅲ组和Ⅳ组夹闭两侧颈总动脉前30 min分别腹腔注射50μmol／L和100μmol／L NaHS各1 ml，Ⅰ组和Ⅱ组分别腹腔注射1 ml生理盐水，再灌注6 h后处死大鼠取海马，测定海马组织中H2S、NO和Co的含量和胱硫醚β-合酶（CBS）、血红素氧合酶（HO）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的活性及CBS mRNA、iNOS mRNA和HO-1 mRNA表达的水平;电镜下观察海马神经元的超微结构，计算线粒体变性率。结果 与Ⅰ组比较，Ⅱ组海马组织中H2S、NO、CO、CBS、iNOS、HO、CBS mRNA、iNOS mRNA和HO-1 mRNA水平及线粒体变性率升高（P〈0．05或0．01）;与Ⅱ组比较，Ⅲ组、Ⅳ组海马组织中H2S、CO、HO和HO-1 mRNA水平升高，NO、CBS、iNOS、CBS mRNA和iNOS mRNA水平及线粒体变性率降低（P〈0．05或0．01）。结论 外源性H2S通过抑制iNOS／NO、激活HO-1／CO减轻了大鼠脑缺血再灌注损伤。     

硫化氢对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响

目的 评价硫化氢对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雄性SD大鼠30只,体重220～250 g,采用随机数字表法,将其随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和不同剂量硫化氢组(H2S1～3组),每组6只.S组仅暴露肝门,不夹闭动、静脉;IR组采用夹闭左、中叶肝蒂、门静脉和肝动脉支1h恢复灌注的方法制备大鼠肝缺血再灌注模型;H2S1～3组于再灌注前5min分别腹腔注射14、28、56 μmol/kg硫化氢钠.于再灌注6h时抽取下腔静脉血样并取肝组织,采用全自动生化分析仪测定血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性,采用二硫代二硝基苯甲酸法测定肝组织谷胱甘肽(GSH)含量,光镜下观察肝组织病理学结果.结果 与S组相比,IR组血清ALT和AST活性升高,肝组织GSH含量下降(P＜0.05);与IR组相比,H2S1～3组ALT和AST活性降低,肝组织GSH含量升高(P＜0.05);H2S1～3组肝病理学损伤较IR组明显减轻.结论 H2S可减轻大鼠肝缺血再灌注损伤.     

硫化氢与急性胰腺炎的研究进展

急性胰腺炎(AP)是一种病情凶险、治疗棘手、并发症多的外科常见急腹症,病死率高.作为第三代气体信号分子,硫化氢(H_2S)在缺血一再灌注损伤、感染性休克及神经源性炎症等多种炎性疾病的发生、发展中均发挥了重要的生理调控作用,且具有分子量小、传播迅速、生物学功能起效快和作用广泛等优点.本文就H_2S在AP中的研究进展做一综述.     

富氢液联合浅低温对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的 观察富氢液联合浅低温对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性SD大鼠50只,周龄9～10周,体重250～300 g,随机分为5组(n=10):假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(IR组)、富氢液组(H组)、浅低温组(M组)、富氢液+浅低温组(HM组).IR组、H组、M组和HM组采用结扎双侧颈总动脉的方法制备大鼠脑缺血再灌注模型,缺血15 min,再灌注6 h.H组和HM组于再灌注即刻腹腔注射富氢液5 ml/kg,其余3组腹腔注射等容量生理盐水.同时S组、IR组和M组维持直肠温37～38 ℃;M组和HM组于15 min内将直肠温降至32～34 ℃,并维持6 h.再灌注6 h时处死大鼠,取一侧海马组织,分别行尼氏染色和HE染色,光镜下观察病理学结果;取另一侧海马组织,采用Western blot法测定CA1区HO-1表达、MDA和TNF-α的含量.结果 H组、M组和HM组病理学损伤较IR组减轻,其中HM组减轻最明显.与S组比较,IR组、H组、M组和HM组海马HO-1表达上调,MDA和TNF-α的含量增加(P＜0.05);与IR组比较,H组、M组和HM组海马HO-1表达上调,MDA和TNF-α的含量降低(P＜0.05);与H组和M组比较,HM组海马HO-1表达上调,MDA和TNF-α的含量降低(P＜0.05);H组和M组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 富氢液联合浅低温可减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,可能与上调海马HO-1的表达,降低MDA和TNF-α的含量有关.     

过氧化氢导致肠上皮细胞线粒体DNA损伤及其编码蛋白活性变化

目的：探讨过氧化氢（H2O2）对肠上皮细胞线粒体DNA（mtDNA）结构与功能的损伤作用。方法：肠上皮细胞株（SW－480），采用4mmol/L H2O2处理细胞后进行线粒体DNA的提取，对细胞色素C氧化酶（COXⅠ、COXⅡ、COXⅢ）基因进行聚合酶链反应（PCR）扩增，并将PCR产物进行直接测序；同时于该时相点测定酶活性。结果：细胞色素C氧化酶COXⅠ从6803－6848出现大范围的点突变及7027出现点突变（TC），在7329（CG）、7341（TG）、7352（GA）出现点突变，在7337出现缺失突变（缺T）；COXⅡ序列在8219－8260段出现大范围的点突变；H2O2可导致mtDNA突变基因所编码的细胞色素C氧化酶活性明显下降，结论：H2O2可明显损伤mtDNA编码的细胞色素C氧化酶基因，这种损伤作用最终导致其编码的酶蛋白活性明显下降。     

骨髓基质干细胞对H_2O_2诱导的肝细胞损伤保护作用的研究

背景:骨髓基质干细胞是一种多能干细胞,不但可分化为肝细胞,并且可通过旁分泌的方式分泌细胞因子,从而促进肝再生。目的:探讨骨髓基质干细胞对H_2O_2诱导的肝细胞损伤的保护作用。方法:以500μmol/L H_2O_2诱导人肝细胞株THLE-3损伤模型,24h后与骨髓基质干细胞共培养。倒置相差显微镜下观察细胞形态改变,检测细胞毒性、caspase-3/7活性以及YO-PRO-1阳性细胞率。结果:与骨髓基质干细胞共培养后,H_2O_2损伤的THLE-3细胞形态明显改善,细胞毒性显著减少(P0.05),caspase-3/7活性显著下降(P0.05),YO-PRO-1阳性细胞率显著降低(P0.05)。结论:骨髓基质干细胞通过降低细胞毒性、caspase-3/7活性和细胞凋亡而对H_2O_2诱导的THLE-3细胞损伤起保护作用。     

氢气在心血管领域的研究进展

既往对氢气的医学应用研究较少,近年来有研究提示,氢气具有选择性抗氧化、抗炎、抗凋亡、抗血管增生等作用,对多种疾病具有显著的治疗效果。本文就氢气在心血管领域的应用及其机制进行探讨,以期为某些心血管疾病的治疗提供新的思路。     

Activation of cellular functions in macrophages by venom secretory Asp-49 and Lys-49 phospholipases A(2).

The in vitro effects of myotoxin III (MT-III), an Asp-49 catalytically-active phospholipase A(2), and myotoxin II (MT-II), a catalytically-inactive Lys-49 variant, isolated from Bothrops asper snake venom, on phagocytosis and production of hydrogen peroxide (H(2)O(2)) by thioglycollate-elicited macrophages were investigated. MT-II and MT-III were cytotoxic to mouse peritoneal macrophages at concentrations higher than 25 microg/ml. At non-cytotoxic concentrations, MT-II stimulated Fcgamma, complement, mannose and beta-glucan receptors-mediated phagocytosis, whereas MT-III stimulated only the mannose and beta-glucan receptors-mediated phagocytosis. Moreover, both myotoxins induced the release of H(2)O(2) by thioglycollate-elicited macrophages, MT-III being the most potent stimulator. MT-II induced the release of H(2)O(2) only at a concentration of 3.2 microg/ml (130% increment) while MT-III induced this effect at all concentrations tested (0.5-2.5 microg/ml; average of 206% increment). It is concluded that, at non-cytotoxic concentrations, MT-II and MT-III activate defense mechanisms in macrophages up regulating phagocytosis, mainly via mannose and beta-glucan receptors, and the respiratory burst.