血竭素高氯酸盐诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的机制

目的研究血竭素高氯酸盐诱导HeLa细胞凋亡机制。方法MTT法测定血竭素高氯酸盐对HeLa细胞的细胞毒作用。通过显微镜，荧光染色观察细胞形态学变化，用琼脂糖凝胶电泳检测DNA片断化。用Western印迹法分析药物对蛋白质表达的影响。结果血竭素高氯酸盐明显抑制HeLa等细胞的增殖，诱导HeLa细胞调亡。Caspase-1，-3，-8，-9及家族抑制剂可明显抑制血竭素高氯酸盐诱导的凋亡。Western印迹结果显示血竭素高氯酸盐作用12 h后Bax及Bcl-X_L的表达明显改变，caspase-3，-8前体及caspase-3底物ICAD和PARP发生降解。结论血竭素高氯酸盐(60 μmol·L^-1)通过改变Bax/Bcl-X_L的表达激活caspase途径诱导HeLa细胞凋亡。     

大蒜素对人宫颈癌Hela细胞增殖影响及其作用机制

目的探讨大蒜素对体外培养宫颈癌Hela细胞增殖的影响及其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定不同浓度大蒜素对Hela细胞增殖抑制率;流式细胞术测定细胞周期变化及凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax的表达。结果 MTT显示大蒜素能抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,并具有时间-剂量依赖性关系;流式细胞术测定结果显示10μg/ml大蒜素可明显诱导宫颈癌Hela细胞凋亡,并将细胞周期阻滞在G2/M期;可降低癌基因蛋白Bcl表达（P〈0.01）,而促进Bax表达（P〈0.01）。结论大蒜素对人宫颈癌Hela细胞增殖具有抑制作用,与细胞周期阻滞和凋亡相关蛋白表达有关。     

细胞周期对肿瘤坏死因子诱导Hela 细胞凋亡的影响

 目的　研究细胞周期对肿瘤坏死因子 ( TNF)诱导 Hela细胞凋亡的影响。方法　通过胸腺嘧啶核苷酸 ( Td R)阻断法阻滞 Hela细胞的细胞周期 ,以 MTT法、流式细胞术和荧光染色分析 Td R阻滞细胞和周期化的 Hela细胞对 TNF诱导凋亡的敏感性。结果　Td R阻滞细胞周期较周期化的 Hela细胞对 TNF诱导的凋亡的敏感性降低。结论　揭示 TNF诱导 Hela细胞凋亡与细胞周期有关.     

^32P照射对Hela细胞杀伤效应的研究

目的研究在不同照射条件下肿瘤细胞生物学效应的特点及不同剂量与时间组合方式对肿瘤细胞的杀灭效果.方法采用人宫颈癌Hela细胞系体外培养,制作32p放射性贴片照射细胞,通过观察照射后细胞增殖能力变化,研究不同剂量、剂量率、照射时间的细胞放射反应特点.应用克隆形成率和细胞群体倍增大小评价肿瘤细胞的增殖能力.结果单次照射显示Hela细胞的剂量、时间、剂量率的阈值特点.照射时间在2h以上、剂量和剂量率分别大于148.00MBq·h、2.78 MBq·h才可以有效抑制Hela细胞增殖;总剂量一定时,一定范围内增加照射时间,细胞总体增殖数目减小.分次与单次照射的比较显示,分次照射组克隆增殖率明显低于单次照射组(P＜0.05),间隔4h的分次照射方案细胞杀伤效率最高.结论32pβ射线照射Hela细胞的生物反应具有剂量、时间、剂量率的阈值特点.在一定剂量、一定剂量率范围内延长照射时间,可以更有效地杀伤肿瘤细胞.在现有的剂量范围内,一定总剂量、小剂量分次照射可以产生与单次照射相近或更大的细胞杀伤效应.     

激活蛋白-2对Hela细胞中survivin的抑制作用

目的探讨激活蛋白-2(AP-2)对Hela细胞中survivin基因表达的影响,为靶向抑制survivin基因表达的肿瘤治疗奠定理论和临床应用基础。方法共转染survivin启动子-荧光素酶报告基因质粒和AP-2,双荧光素酶活性检测AP-2对survivin启动子活性的影响;转染AP-2到Hela细胞中,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot检测AP-2对Hela细胞中survivin基因表达的影响。结果AP-2能抑制survivin核心启动子活性;并在转录和翻译水平上抑制Hela细胞中的survivin基因表达。结论AP-2可抑制Hela细胞中survivin基因的表达,为有效控制survivin基因表达提供了新的思路,为靶向survivin的肿瘤基因治疗奠定基础。     

马甲子叶提取物的抗肿瘤活性研究

目的 研究马甲子叶提取物的体内外抗肿瘤活性.方法 采用系统溶剂萃取法萃取马甲子叶醇提物,采用MTT法分别检测马甲子叶水提物、醇提物、石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位对人肝癌HepG-2、人胃癌MGC-803、人宫颈癌Hela细胞的体外抗肿瘤活性;考察马甲子叶乙酸乙酯部位对S180荷瘤小鼠的体内抗肿瘤活性.结果 马甲子乙酸乙酯部位对3种肿瘤细胞均有明显抑制作用,呈一定量效关系,IC50分别为23.68、24.91、75.32 μg·mL-;乙醇提取物和石油醚部位对3种肿瘤细胞均有一定抑制作用;正丁醇部位和水提物的抑制作用不明显.乙酸乙酯部位对S180荷瘤小鼠的体内抗肿瘤作用明显,中剂量的抑瘤效果与环磷酰胺的相当,抑瘤率达49.38％.结论 马甲子叶乙酸乙酯部位的抗肿瘤活性最强.     

胡桃醌对肿瘤细胞的增殖抑制作用和抗菌作用

本文主要探讨胡桃醌对部分移植性肿瘤细胞增殖作用的影响。经72h的作用结果表明,胡桃醌对不同肿瘤细胞的增殖抑制浓度分别为:HeLa Cell IC_(50) 13.8μg/ml,P388 CellIC_(50) 9.8μg/ml,P388/ADR Cell IC_(50) 7.1μg/ml,S180 Cell IC_(50) 11.6μg/ml. 从胡桃醌对S_(180)细胞的增殖抑制作用,可以得出该化合物的作用方式有,杀伤细胞与浓度的依赖关系。     

藤茶双氢杨梅树皮素对Hela细胞及A2780细胞增殖的抑制作用

目的探讨藤茶双氢杨梅树皮素（ampelopsin,APS）的抗肿瘤作用。方法以四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT法）、克隆形成法观察APS对Hela细胞及A2780细胞的体外抑制作用。结果APS均能明显抑制体外培养的Hela细胞及A2780细胞的生长,MTT法的半数抑制浓度（IC50）分别为24．6μg／mL和1．2μg／mL,集落形成法中APS质量浓度在4．4～22．2μg／mL时抑制率均为100％。结论藤茶APS对体外培养的Hela细胞及A2780细胞均有明显的抑制作用。     

小剂量紫杉醇对乏氧Hela细胞放射敏感性影响的研究

目的探讨紫杉醇对正常和乏氧状态下人宫颈癌细胞Hela的放射增敏作用。方法细胞乏氧模型、细胞放疗、采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）快速比色法检测细胞增殖率;结果不同浓度的紫杉醇作用于乏氧和正常状态下的Hela细胞,均表现出增殖抑制作用,且呈浓度依赖性,乏氧状态下的Hela细胞增殖率明显大于正常状态下的细胞,两者相比差异有统计学意义（P〈0.05）,说明乏氧细胞可对对化疗药物表现出一定的抵抗作用。小剂量的紫杉醇（1×10-3mg/L）可增加正常和乏氧状态下的He-la细胞对放射线的敏感性,其增殖率分别为（19.67±5.06）%、（12.38±3.55）%,且两者相比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论乏氧细胞对化疗药物有一定的抵抗作用;紫杉醇对乏氧及正常状态下的Hela细胞均有抑制作用,且呈现浓度依赖性;小剂量的紫杉醇对乏氧状态下的Hela细胞具有放射增敏作用。     

RNAi沉默环氧合酶-2基因对宫颈癌Hela细胞细胞周期影响的实验研究

目的:利用RNA干扰(RNAi)抑制宫颈癌Hela细胞环氧合酶-2(cyclooxygen-ase-2,COX-2)表达研究其对细胞周期的影响。方法:构建特异性COX-2小干扰RNA(siRNA)真核表达载体质粒Pgenesil-COX-2,以脂质体法将其转染至人宫颈癌Hela细胞。转染48h分别用RT-PCR和Western blot方法评价Pgenesil-COX-2对COX-2表达的抑制效应,48和96h时用流式细胞技术检测Hela细胞细胞周期,用RT-PCR方法检测CyclinE的表达变化。结果:转染48h后,Pgenesil-COX-2特异性抑制了Hela细胞COX-2的表达,与对照组比较差异有统计学意义,t=4.496,P=0.002。48及96h流式细胞仪分析显示,转染Pgenesil-COX-2后Hela细胞增殖活性降低,与对照组比较G0/G1期细胞增多,t值分别为3.217和2.495,P值分别为0.011和0.043;S期细胞减少,t=5.978和6.137,P值均为0.000。同时,CyclinE表达降低,t值分别为2.879和8.612,P值分别为0.020和0.000。结论:siRNA真核表达载体可特异性抑制Hela细胞COX-2基因的表达,抑制COX-2表达可能通过下调Cy-clinE的表达使细胞周期阻滞于G0/G1期。