tBHQ对无机砷致人皮肤角质细胞损伤保护作用

目的 探讨叔丁基对苯二酚(tBHQ)对亚砷酸钠(NaAsO₂)致人皮肤角质细胞系HaCaT细胞损伤的保护作用.方法 用Alamar Blue还原法检测细胞活力,用荧光探针2',7'-二乙酰二氯荧光素(DCFH-DA)检测细胞内活性氧(ROS)的生成,用硫代巴比妥酸(TBA)法检测细胞内过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA)的生成.结果 NaAsO₂(25、50μmol/L)单独处理后,各组细胞活力明显下降(P<0.01),分别为82%和59%;细胞经tBHQ(25、50μmol/L)预处理后,tBHQ 25μmol/L组细胞活力分别恢复至(101.44±1.63)%和(92.06±9.95)%,tBHQ 50μmol/L组细胞活力分别恢复至(98.88±2.03)%和(91.12±7.87)%;NaAsO₂(25、50μmol/L)单独处理后,各组细胞内ROS水平明显上升(P<0.01),分别为对照组的1.64和3.86倍;细胞经tBHQ(25、50μmol/L)预处理后,tBHQ 25μmol/L组ROS水平分别下降为对照组的0.95和1.87倍,tBHQ 50μmol/L组ROS水平分别下降为对照组的0.79和1.69倍;NaAsO₂(25、50μmol/L)单独处理后,细胞内MDA含量明显上升(P<0.01),分别为2.28、2.96 nmol/(mgμprot);细胞经tBHQ(25、50μmol/L)预处理后,tBHQ 25μmol/L组MDA含量分别下降为2.05、2.43 nmol/(mgμprot),tBHQ 50μmol/L组MDA含量分别下降为2.10、2.60 nmol/(mg.prot).结论 tBHQ对无机砷致人皮肤角质细胞损伤具有保护作用,且具有一定的剂量-反应关系.     

紫外线对角质形成细胞的细胞因子分泌的影响

目的　观察紫外线 (ultraviolet,U V)对体外培养的角质形成细胞株 (Ha Ca T细胞 )细胞因子分泌的影响。方法　 UV照射佛泊脂和脂多糖 (PMA/L PS)刺激的 Ha Ca T细胞 ,用 EL ISA法检测细胞培养上清液中细胞因子 IL - 1α、IL - 2、IL - 6和 IL - 8的含量。结果　正常 Ha Ca T细胞有 IL - 1α、IL - 2、IL -6和 IL - 8的自发性分泌。 PMA和 L PS刺激 Ha Ca T细胞 ,其 IL - 1α分泌量下降 (P<0 .0 5 ) ,IL - 6和 IL - 8分泌量明显增加 (P<0 .0 1)。正常 Ha Ca T细胞经 U V照射 ,IL - 1α、IL - 2、IL - 6的分泌无明显变化 (P>0 .0 5 ) ,IL - 8分泌量升高 (P<0 .0 5 )。 PMA和 L PS刺激的 Ha Ca T细胞经 UV照射 ,其 IL - 1α、IL - 6和 IL -8的分泌量明显增加 (P<0 .0 1)。结论　 U V对不同状态下 Ha Ca T细胞的作用是不同的     

基于ERK信号通路研究补阳还五汤促糖尿病足溃疡愈合的作用机制

目的 基于细胞外调节激酶（ERK）信号通路研究补阳还五汤对人永生化表皮（HaCaT）细胞增殖和迁移的作用。方法 CCK-8法检测不同浓度补阳还五汤（0、5、10、15、25、50 mg/mL）对HaCaT细胞增殖的影响,Western blot检测不同浓度补阳还五汤作用下HaCaT细胞磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达水平;划痕实验检测HaCaT细胞的迁移情况;CCK-8法检测适宜浓度补阳还五汤联合ERK抑制剂（U0126）作用下HaCaT细胞增殖的情况,Western blot法检测适宜浓度补阳还五汤以及ERK抑制剂（U0126）作用下HaCaT细胞p-ERK1/2蛋白的表达水平。结果 CCK-8法实验结果表明,5、10、15、25、50 mg/mL补阳还五汤细胞的吸光度值分别为（1.1704±0.076）、（1.2642±0.078）、（1.3845±0.060）、（1.6996±0.080）、（1.7211±0.088）,与空白组（1.0514±0.080）比较,25 mg/mL时促增殖效果最佳（P<0.01）。Western blot实验结果表明...     

紫草素对IL-17刺激HaCaT细胞分泌VEGF影响的研究

目的 观察白细胞介素-17(IL-17)对HaCaT细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响及紫草素的干预作用。方法 收集IL-17刺激组和紫草素处理后HaCaT细胞及其培养土清，分别用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)及实时荧光免疫定量-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测VEGF含量。应用细胞计数盒-8(CCK-8)检测各组HaCaT细胞活力。结果 与对照组相比，不同时间IL-17刺激组HaCaT细胞及其培养上清中VEGF表达均高于对照组(P＜0.001)；紫草素处理组HaCaT细胞及其培养上清VEGF表达均低于IL-17处理组(P＜0.001)；与对照组比较，CCK-8检测各组HaCaT细胞活力无明显差异(P＞0.05)。结论 IL-17可促进HaCaT细胞分泌VEGF，呈时间依赖型，而紫草素对其具有抑制作用。     

Fabrication and Impact of Fouling-Reducing Temperature-Responsive POEGMA Coatings with Embedded CaCO3 Nanoparticles on Different Cell Lines

In the present work, we have successfully prepared and characterized novel nanocomposite material exhibiting temperature-dependent surface wettability changes, based on grafted brush coatings of non-fouling poly(di(ethylene glycol)methyl ether methacrylate) (POEGMA) with the embedded CaCO₃ nanoparticles. Grafted polymer brushes attached to the glass surface were prepared in a three-step process using atom transfer radical polymerization (ATRP). Subsequently, uniform CaCO₃ nanoparticles (NPs) embedded in POEGMA-grafted brush coatings were synthesized using biomineralized precipitation from solutions of CaCl₂ and Na₂CO₃. An impact of the low concentration of the embedded CaCO₃ NPs on cell adhesion and growth depends strongly on the type of studied cell line: keratinocytes (HaCaT), melanoma (WM35) and osteoblastic (MC3T3-e1). Based on the temperature-responsive properties of grafted brush coatings and CaCO₃ NPs acting as biologically active substrate, we hope that our research will lead to a new platform for tissue engineering with modified growth of the cells due to the release of biologically active substances from CaCO₃ NPs and the ability to detach the cells in a controlled manner using temperature-induced changes of the brush.     

萝卜硫素对HaCaT细胞的影响研究

目的：探讨西兰花提取物的活性成分萝卜硫素（SF）对永生化角质形成细胞株（HaCaT细胞）的影响作用,以初步了解SF对HaCaT细胞的安全性。方法：采用培养至亚融合状态的HaCaT细胞,分别加入不同浓度的SF干预处理,24h后以MTT法检测细胞的生长活性,进一步对筛选组以ELISE法测定细胞上清液中TNF-α的水平,以流式细胞术检测细胞的凋亡率。结果：MTT法检测结果提示200、400、600 nmol/L浓度组的细胞生长出现抑制,P〈0.05,并呈浓度相关性。50、100、150nmol/L浓度组的细胞生长没有受到明显影响,P〉0.05;进一步对501、001、502、00nmol/L浓度组的细胞进行流式细胞术检测凋亡率,仅有200nmol/L组P〈0.05;以ELISE法测定50,1001,502,00nmol/L各组细胞上清液中TNF-α的水平,均无明显统计学差异,P〉0.05。结论：50,100,150nmol/L浓度的SF对HaCaT细胞生长没有明显影响,200nmol/L以上的浓度对细胞的生长开始出现抑制。     

杜仲对UVA致HaCaT细胞光老化保护作用的实验研究

目的：研究杜仲不同提取部位抗UVA致HaCaT细胞光老化的作用,并初步探讨其作用机制。方法：杜仲乙醇提取物经大孔树脂制备不同浓度乙醇梯度洗脱部位,分别作用于HaCaT细胞光老化模型,倒置显微镜下观察细胞形态,MTT法测定细胞活性,测定细胞培养液中LDH、MDA、SOD活力,确定并筛选杜仲抗皮肤光老化的作用及有效部位。结果：与模型组相比,浓度为1255μg/ml的50%乙醇大孔树脂洗脱部位能提高细胞活性（P〈0.05）,使培养液中LDH降低（P〈0.01）、SOD活力提高（P〈0.05）、MDA活力降低（P〈0.05）;浓度为125μg/ml的水洗脱部位使细胞培养液中LDH活力降低（P〈0.05）。结论：杜仲抗皮肤光老化作用的有效成分主要集中在50%乙醇大孔树脂洗脱部位,其作用机制可能与其能清除氧自由基、保护细胞膜免受损伤有关。