慢性肾功能衰竭患者认知功能障碍与血浆HSP70的相关性研究

目的采用蒙特利尔认知评估量表(Montreal CognitiveAssessment,MoCA)评价100例观察慢性肾功能衰竭患者认知功能损害的程度;观察慢性肾功能衰竭患者认知功能的损害程度与血浆HSP70浓度相关性;并同时观察慢性肾功能衰竭伴认知功能障碍患者血浆HSP70浓度与MoCA量表各个子项目的相关性;观察慢性肾功能衰竭伴或不伴认知功能障碍的两组患者(根据MoCA量表评分)与血浆HSP70浓度的相关性。方法运用MoCA量表检测118例慢性肾功能衰竭(chronic renal failure,CRF)患者的认知功能,根据MoCA量表评分标准选择100例CRF患者并将其分为2组,即慢性肾功能衰竭伴认知功能正常组(CRF-NCI,n=50)、和慢性肾功能衰竭伴认知功能障碍组(CRF-CI,n=50)。运用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定2组患者血浆HSP70浓度。使用相关性分析观察慢性肾功能衰竭患者认知功能的损害程度与血浆HSP70浓度相关性;采用多元线性回归分析观察慢性肾功能衰竭伴认知功能障碍患者血浆HSP70浓度与MoCA量表各个子项目的相关性;结果 CRF-NCI组和CRF-CI组患者血浆HSP70浓度分别为(10.37±2.86)ng/mL和(17.38±5.38)ng/mL,差异有统计学意义(P<0.01);对HSP70浓度与MoCA量表进行相关性分析显示,慢性肾功能衰竭伴认知功能障碍患者组患者血浆HSP70浓度与MoCA得分呈负相关(r=-0.674,P=0.0001);对慢性肾功能衰竭伴认知功能障碍患者各个认知领域的分值与血浆HSP70浓度水平进行多元线性回归分析显示,血浆HSP70水平与患者记忆能力、视空间执行能力和定向能力存在负相关(R2=0.928,F=78.711,P=0.000)。而与视空间执行能力、命名能力、注意能力和定向能力无明显相关性。结论慢性肾功能衰竭伴认知功能障碍患者HSP70浓度显著高于认知功能正常组。HSP70浓度的改变可以反映慢性肾功能衰竭伴认知功能障碍患者认知功能损害的程度。在慢性肾功能衰竭伴认知功能障碍患者各个认知领域中,血浆HSP70浓度与记忆能力、语言、抽象存在相关性,而与视空间执行能力、命名能力、注意能力和定向能力无相关性。     

神经节苷脂GM1与亚低温对缺氧缺血后脑中HSP70、NPY表达的影响

目的 探讨神经节苷脂GM1与亚低温对缺氧缺血(HI)后新生大鼠脑中热休克蛋白70(HSP70)和神经肽Y(NPY)蛋白和基因表达的影响.方法 50只新生7 d SD大鼠制作HI模型,随机分为假手术(A)组、模型(B)组、神经节苷脂GM1(C)组、亚低温(D)组和神经节苷脂与亚低温联合干预(E)组,每组10只.采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测大鼠脑中HSP70、NPY蛋白及基因表达.结果 A组HSP70、NPY蛋白及其mRNA表达较弱,B组HSP70蛋白及其 mRNA表达增加,NPY蛋白及其mRNA表达明显增强,各干预组HSP70蛋白和mRNA表达进一步升高,而以E组升高更明显(P＜0.05),而NPY和mRNA在各干预组中表达减弱,联合组减弱更明显(P＜0.05).结论 神经节苷脂GM1与亚低温对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用可能与影响HSP70、NPY的表达有关.     

RPL15在K562细胞向红系分化过程中的功能和机制研究

目的研究RPL15基因在K562细胞向红系诱导分化过程中的表达变化,并确定其对珠蛋白表达及红系分化的影响。方法用氯化血红素诱导K562细胞向红系分化,采用实时荧光定量PCR(q PCR)及Western blot法检测RPL15在K562红系分化过程中的表达情况。利用RNA干扰(RNAi)技术抑制K562细胞中RPL15的表达,进而通过四甲基联苯胺染色、q PCR及流式细胞技术检测K562细胞中血红蛋白、红系分化相关基因以及CD235a和CD71表达的变化。结果在K562细胞向红系分化过程中,RPL15的m RNA及蛋白水平均呈先升高后下降趋势。与对照组相比,干扰RPL15表达后,向红系分化24、48和72 h的K562细胞血红蛋白染色阳性率均明显下降;向红系分化的K562细胞中α-、β-、ε-、γ-珠蛋白及红系分化相关基因GATA1和HSP70相对表达量均明显下调(均P<0.05);而抑癌基因P53的m RNA表达水平显著上调(P<0.01)。同时CD235a⁺CD71⁺K562细胞比例在RPL15干扰后显著降低(P<0....     

Non-canonical approaches to targeting hypoxic tumors

Hypoxia is a common characteristic in solid cancers. Hypoxia-inducible factors (HIFs) are involved in various aspects of cancer, such as angiogenesis, metastasis and therapy resistance. Targeting the HIF pathway has been regarded as a challenging but promising strategy in cancer treatment with recent FDA approval of a HIF2α-inhibitor. During the past several decades, numerous efforts have been made to understand how HIFs participate in cancer development and progression along with how HIF signaling can be modulated to achieve anti-cancer effect. In this chapter, we will provide an overview of the role of hypoxia and HIFs in cancer, summarize the oxygen-dependent and independent mechanisms of HIF-1α regulation, and discuss emerging approaches targeting hypoxia and HIF signaling which possess therapeutic potential in cancer. We will emphasize on two signaling pathways, involving cyclin-dependent kinases (CDKs) and heat shock protein 90 (HSP90), which contribute to HIF-1α (and HIF-2α) stabilization in an oxygen-independent manner. Through reviewing their participation in malignant progression and the potential targeting strategies, we discuss the non-canonical approaches to target HIF signaling in cancer therapy.     

热应激对A549细胞HSP70、XPA修复酶表达的影响

目的研究热应激作用下A549细胞热休克蛋白70（HSP70）和XPA修复酶的表达规律及其可能的意义。方法利用免疫印迹方法（Western blot）检测A549细胞中HSP70、XPA修复酶的表达水平。结果A549细胞接受不同温度（39、41、42、43℃）处理2h后,HSP70表达水平随温度的增高而逐渐增加,并在42℃应激时表达最高,与对照组相比有统计学意义（P〈0.05）;细胞接受42℃应激1～4h,HSP70表达水平随应激时间的增加而递增,与对照组相比,细胞在42℃应激2～4h时HSP70表达显著上调（P〈0.05）。两处理组细胞XPA修复酶表达水平均无明显变化（P〉0.05）。结论高温能诱导HSP70的表达,并呈一定的温度-效应和时间-效应关系,而对XPA修复酶未见明显影响。     

热休克蛋白70对离体大鼠供心心肌细胞的保护作用

目的探讨热休克蛋白70（HSP70）对离体大鼠供心的保护作用,观察其对供心心肌细胞功能及超微结构的影响。方法Wistar大鼠18只,随机分为2组：对照组腹腔注射生理盐水0.5mL,24h后取心脏灌注HTK心脏保护液,4℃保存3h后建立Langendorff离体心脏灌注模型,灌注KH液2h;实验组腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素（溶于生理盐水中）3.1μmol/kg（0.53mg/kg）,24h后取心脏,处理方法同对照组。测定两组心肌肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）漏出率以及心肌水含量（MWC）、HSP70、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的水平。观察心肌细胞光镜结构和电镜下的超微结构。结果实验组HSP70、SOD的含量较对照组明显增高（t=17.96,P〈0.01）;实验组MWC、MDA含量、CK、LDH漏出率较对照组明显降低（t=4.13~15.81,P〈0.01）。实验组心肌细胞光镜下以及电镜下超微结构的损伤程度较对照组明显减轻。结论心肌HSP70高表达对离体大鼠供心心肌细胞具有明显的保护效应。     

慢性B淋巴细胞白血病病人骨髓及外周血ZAP-70与CD38表达及意义

目的探讨ZETA相关蛋白（ZAP-70）、CD38在慢性B淋巴细胞白血病（B-CLL）病人骨髓及外周血中的表达及两者相关性,并分析其临床意义。方法采用半定量RT-PCR的方法对19例B-CLL病人及12例正常人骨髓或外周血ZAP-70 mRNA的表达水平进行测定,采用流式细胞术检测CD38的表达水平。结果在19例B-CLL病人中,7例ZAP-70阳性表达,8例CD38阳性表达;对照组ZAP-70、CD38均为阴性表达。结论ZAP-70 mRNA、CD38在B-CLL中表达阳性提示预后不良。ZAP-70可以取代IgVH基因突变状态作为B-CLL有效的预后指标。     

不同强度噪声对豚鼠耳蜗HSP70表达特点的影响

[目的 ]观察无损伤的中等强度的习服声刺激后耳蜗中热应激蛋白 (heatshockprotein ,HSP)的表达特点。 [方法 ]习服组先接受 10d每天 6h习服声暴露 ;对照组静置饲养 10d ;习服 +高噪声暴露组先接受 10d每天 6h习服声暴露 ,休息 2d后 ,再暴露于高强度噪声 2h ;高噪声暴露组直接暴露于高强度噪声 2h。然后以免疫组织化学方法结合图像分析技术检测各组动物耳蜗HSP70表达情况。 [结果 ]习服组耳蜗中HSP70 (积分光密度为 2 2 .99,平均光密度为 0 .2 8)明显高于对照组 (积分光密度为 6.77,平均光密度为 0 .11) (P <0 .0 5 ) ;习服 +高噪声组明显低于高噪声暴露组 (P <0 .0 5 ) ,两组积分光密度分别为 2 0 .0 6和 43 .14 ,平均光度分别为 0 .3 0和 0 .40。 [结论 ]用无损伤的中等强度习服声诱导耳蜗中HSP70的表达高于正常状态时的表达而低于高强度噪声刺激时的表达 ,但习服过程诱导产生的HSP70却对听觉系统提供了一定的保护作用     

粉尘螨HSP16-1原核表达体系构建与温度应激响应功能鉴定

目的 建立原核表达体系,在蛋白水平确认粉尘螨HSP16-1蛋白的温度应激响应功能.方法 基于前期RNA-seq获得的粉尘螨HSP16-1基因序列,设计特异性引物,PCR扩增克隆测序;利用生物信息学软件,分析理化性质,预测亚细胞定位和三维结构;通过构建pET32a/HSP16-1原核表达质粒,转化大肠杆菌感受态细胞BL2...     

丁苯酞联合TLR4抗体鼓室给药小鼠梅尼埃病模型的实验研究

目的研究丁苯酞联合TLR4抗体通过调控Hsp70通道蛋白表达对内淋巴积水(Endolymphatic hydrops,ELH)小鼠模型的诊疗价值。方法选取50只BALB/c雌性小鼠,并随机分为对照组(A组)、模型组(B组)、和实验组(C组)。对照组不予任何处理;模型组予内淋巴积水造模;实验组在模型组基础上2天后:A组予以鼓室注射TLR4抗体50μg+丁苯酞25mg/kg灌胃干预;B组予以鼓室注射TLR4抗体100μg+丁苯酞100mg/kg灌胃干预;C组予以鼓室注射TLR4抗体200μg+丁苯酞100mg/kg灌胃干预。连续干预4周。随后观察小鼠行为学改变,耳蜗切片Hsp70表达,测试耳蜗电图SP/AP值。检测MD小鼠在丁苯酞联合TLR4抗体干预前后血清Hsp70水平及TNF-α、IL-6炎性细胞因子表达。结果与对照组比较,模型组小鼠诱发出明显外周前庭症状,符合MD(Ménière’s Disease)动物造模改变;与模型组比较,实验组3个亚组经4w鼓室注射TLR4抗体50、100、200μg+丁苯酞25、100、100mg/kg灌胃干预后,小鼠前庭反应都明显减轻,模型组与实验组耳蜗电...