乳猪肝细胞的分离、培养及功能检测

目的 为构建生物人工肝进行肝细胞的准备。方法 采用胶原酶半原位灌流法分离单个乳猪肝细胞,并对其活力及单层和聚集培养后的白蛋白、尿素合成功能进行检测。结果 采用本方法从每头乳猪中分离到的单个肝细胞数为(3.1±1.5)×10~(10),活性超过95％。在加入激素和生长因子的培养基中单层培养时,肝细胞功能良好,可维持2周左右。而在未加入激素和生长因子的培养中肝细胞虽能存活1周,但功能于24h后即丧失。球形聚集培养可实现肝细胞的大量培养,且生物学活性较单层培养显著提高。结论 采用胶原酶半原位灌注法所得单个乳猪肝细胞基本能满足构建生物人工肝对肝细胞数量的要求。聚集培养接种密度大,细胞生物学活性高,可用于构建生物人工肝。     

钙拮抗药及烧伤血浆对大鼠PBMC内NF-κB活化和炎症介质产生的影响

目的 :探讨外周血单个核细胞 (PBMC)内上游信号分子及核因子 κB(NF κB)在烧伤后炎症级联反应中的作用。　方法 :体外检测在烧伤血浆作用下的PBMC内游离Ca2 及NF κB活化的变化 ,观察钙通道阻断药对NF κB活化及IL 6、NO表达水平的调控作用。　结果 :不同时相点的烧伤血浆可使体外PBMC内Ca2 明显增加 ,培养的PBMC核内NF κB的积聚明显增加 ,培养上清中NO和IL 6高表达。应用尼莫通 (Nimodipine)和丹曲林 (Dantrium)对NF κB的活化有调节作用 ,对IL 6和NO亦有下调作用。　结论 :烧伤血浆可使PBMC内信号分子浓度明显增高 ,NF κB过度活化 ,并易位进入细胞核内 ,NF κB介导的促炎性细胞因子和NO过度表达。两种钙通道阻断药有调控细胞内信号转导的作用 ,对烧伤后全身炎症反应综合征 (SIRS)可能有防治作用     

T细胞恶性淋巴瘤误诊为急性阑尾炎1例

患者，女，26岁，因发热伴腹痛、恶心在当地医院应用青霉素及退热药治疗3天效果不好。于第4天，去当地卫生院就诊，诊为急性阑尾炎，行阑尾切除术。术后应用抗生素(青霉素、灭滴灵等)治疗8天，仍腹痛、发热，测T40℃，且出现全身浅表淋巴结肿大。后应用菌必治等治疗5天，出现全身散在红色丘疹，伴有瘙痒及鳞状脱屑，经应用抗过敏药后，瘙痒减轻，后出现咳嗽、咳痰及痰中带血丝，继续用抗生素治疗，     

释疑解难

鉴于目前免疫学检验项目的广泛应用 ,一些读者希望介绍有关免疫学检验项目的正常值和临床意义 ,我编辑部摘录部分较新项目 ,分期刊出 ,以飨读者。     

提高痰液脱落细胞阳性率的方法

近年来肺癌发病率显著提高 ,诊断方法也多种多样。痰液查找癌细胞虽然是病理工作的一部分 ,但由于痰液黏稠操作困难 ,阳性率偏低 ,所以一直是细胞病理工作者研究的重点之一。我院通过试用“航天人牌”痰液溶解剂后不但提高了阳性符合率 ,更方便了技术员制片过程。1　改进制片方法主要试剂 :天津市天宇新技术公司生产的“航天人牌”痰液溶解剂。采集理想的痰标本 :常规方法是留清晨第一口痰 ,此痰细胞易退变结构不清 ,影响诊断 ,而且制片时用棉棍挑取 ,不易挑选到理想痰标本 ,漏诊率高。我们采用的新方法是采集痰液前先将 5ml痰液溶解剂加入…     

应用于治疗的遗传、细胞和免疫学进展（一）

2003年举行了具有里程碑意义的庆典：纪念发现DNA结构五十周年。这是一次展示现代生物学取得非凡成就的机会。这一发现为了解基本的生物学原理铺设了道路，该原理正在开始直接应用于人类疾病的治疗。2004年另外一个标志性的周年纪念：自然医学杂志创刊十周年，在这十     

原发性肝癌患者肝切除术前、后免疫细胞表型分析

目的研究原发性肝癌(PrimaryLiverCarcinoma,PLC)患者肝切除术前、后免疫细胞表型的变化。方法采用直接免疫荧光标记,流量血细胞计数法(FlowCytometry,FCM)检测方法,动态观察120例PLC患者肝切除术前后外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞和HLA鄄DR含量变化。结果肝切除术前肝功能Child鄄PughB级、OGTTL型和术前施行肝动脉栓塞化疗患者外周血CD8+T细胞含量明显低于正常人组,CD4+/CD8+比值则较高(P<0郾05)。全部肝癌患者肝切除术前、后CD3+CD4+T细胞和NK细胞(CD3-CD16+CD56+)含量无明显差异。术后第1天、第3天、第7天和第2周外周血淋巴细胞CD3+CD8+含量明显低于肝切除术前和术后第3周(P<0.01);而CD4+/CD8+比值则显著高于肝切除术前和术后第3周(P<0郾01)。结论PLC合并肝硬变肝储备功能不足、术前肝动脉栓塞化疗和肝切除术可导致机体细胞免疫功能低下,PLC患者肝切除术前行肝动脉栓塞化疗的价值有待深入研究。     

急性脑血管病外周血淋巴细胞、T细胞亚群变化的研究

目的 探讨急性脑血管病患者外周血淋巴细胞、T细胞亚群的变化机制及临床意义。方法 应用HCP5200全自动血球分析仪及FACScalibur流式细胞仪对70例急性脑血管患者及38例健康体检者外周血淋巴细胞、T细胞亚群进行检测。结果 急性脑血管患者外周血淋巴细胞绝对值、百分比均比对照组降低，有应激反应者淋巴细胞百分比降低更明显。并非所有急性脑血管病患者均有T细胞免疫功能失衡，只有在应激状态下，CD4^ 和CD4^ ／CD8^ 降低，CD8^ 升高。结论 急性脑血管病患者发病后机体存在细胞免疫功能紊乱，其严重程度与应激反应有关。     

局部封闭、鞘内注射加全身化疗治疗小儿郎格罕细胞组织细胞增生症6例

目的 提高小儿郎格罕细胞组织细胞增生症的治疗效果。方法 郎格罕细胞组织细胞增生症6例。其中韩-雪-柯氏征4例，骨嗜酸性肉芽肿2例。6例病儿在全身化疗的同时，头颅肿块（颅骨缺损处）均采用醋酸强的松龙局部封闭，4例韩-雪-柯氏征均采用氨甲蝶呤、阿糖胞苷、地塞米松三联多次鞘内注射。结果 6例均获得完全缓解。随访8个月至3年无复发，结论 该综合治疗方法可缩短疗程，疗效明显优于单纯手术或单纯全身化疗，避免了手术的痛若，提高了治愈率，节省治疗费用。