Anti-Proliferative Effects of Ginsenosides Extracted from Mountain Ginseng on Lung Cancer

Objective

To investigate the effect of three major ginsenosides from mountain ginseng as anticancer substance and explore the underlying mechanism involved in lung cancer.

Methods

The inhibitory proliferation of lung cancer by major five ginsenosides (Rb1, Rb2, Rg1, Rc, and Re) was examined using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide assay. Calculated 50% inhibition (IC₅₀) values of five ginsenosides were determined and compared each other. Apoptosis by the treatment of single ginsenoside was performed by fluorescence-assisted cytometric spectroscopy. The alterations of apoptosis-related proteins were evaluated by Western blot analysis.

Results

The abundance of ginsenosides in butanol extract of mountain ginseng (BX-MG) was revealed in the order of Rb1, Rg1, Re, Rc and Rb2. Among them, Rb1 was the most effective to lung cancer cell, followed by Rb2 and Rg1 on the basis of relative IC₅₀ values of IMR90 versus A549 cell. The alterations of apoptotic proteins were confirmed in lung cancer A549 cells according to the administration of Rb1, Rb2 and Rg1. The expression levels of caspase-3 and caspase-8 were increased upon the treatment of three ginsenosides, however, the levels of caspase-9 and anti-apoptotic protein Bax were not changed.

Conclusion

Major ginsenosides such as Rb1, Rb2 and Rg1 comprising BX-MG induced apoptosis in lung cancer cells via extrinsic apoptotic pathway rather than intrinsic mitochondrial pathway.

     

正交试验法优化珠子参总皂苷提取工艺

目的优选珠子参总皂苷的提取工艺,为珠子参中皂苷类化合物的开发利用提供理论依据。方法采用紫外分光光度法建立珠子参中总皂苷含量的测定方法,检测波长540 nm,并通过正交试验考察乙醇浓度、溶剂倍量、提取时间及提取次数对珠子参总皂苷提取工艺的影响。结果珠子参总皂苷的线性范围为0.052~0.182 mg,平均加样回收率为98.64%。珠子参总皂苷最佳提取工艺为加入70%的乙醇10倍量,提取3次,每次提取1 h,平均收率12.32%。结论建立的紫外分光光度法检测珠子参总皂苷含量方法准确可靠,优选的珠子参总皂苷提取工艺简便、稳定可行。     

通脉丸溶出液中士的宁和马钱子碱的含量测定

目的:建立通脉丸溶出液中士的宁和马钱子碱的含量测定方法。方法:采用超高效液相色谱法测定通脉丸溶出液中士的宁和马钱子碱的含量,色谱条件:Acquity UPLC BEH C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以乙腈-0.02 mol·L~(-1)磷酸二氢钾与0.014 8 mol·L~(-1)庚烷磺酸钠等量混合溶液(用体积分数10%磷酸调节PH为2.8)(17∶83)为流动相;检测波长为260 nm;流速为0.3 m L·min~(-1);柱温30℃。结果:本方法对通脉丸溶出液中士的宁与马钱子碱均能适用,其中马钱子碱在3.712~74.24μg、士的宁在3.472~69.44μg内呈良好线性关系,r~2=0.999 9,平均加样回收率分别为102.65%(RSD 1.08%),104.19%(RSD 1.46%)。结论:该法分离效果好,专属性强,操作简便快捷,适用于通脉丸溶出液中马钱子碱与士的宁的测定。     

野蔷薇根醇提物对动脉粥样硬化模型大鼠脂代谢、血钙及内皮功能的影响

目的:观察野蔷薇根醇提物对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)模型大鼠脂代谢、钙及内皮功能的影响。方法:50只SD大鼠随机分为空白对照组,模型组,野蔷薇根醇提物(YT)组低剂量组(4.15 g·kg-1)、高剂量组(8.30 g·kg-1),阿托伐他汀钙片(AL)组(2.0 mg·kg-1);空白对照组喂标准饲料,其余组高脂饮食联合注射维生素D3并加免疫损伤;灌胃给药90 d后,检测血清总胆固醇(serum total cholesterol,CHO)、三酰甘油(triacylglycerol,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterin,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、血钙(blood calcium,Ca)、血清内皮素(endothelin,ET)、一氧化氮(nitric oxide,NO)、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS);并计算肝脏指数,心脏指数和动脉硬化指数(arteriosclerosis index,AI)。结果:空白对照组肝脏指数为2.40±0.19,AI为0.75±0.17,血清CHO为(1.39±0.23)mmol·L-1,LDL-C为(0.49±0.17)mmol·L-1,HDL-C为(0.82±0.14)mmol·L-1、钙为(2.10±0.07)mmol·L-1,ET为(39.85±7.99)ng·L-1;模型组大鼠肝脏指数为0.88±0.45,AI为6.89±1.36,血清CHO为(18.13±4.45)mmol·L-1,LDL-C为(16.15±4.44)mmol·L-1,HDL-C为(2.73±0.52)mmol·L-1,钙为(4.44±0.28)mmol·L-1,ET为(53.91±9.83)ng·L-1;两组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。各干预组大鼠肝脏指数:YT低剂量组为4.38±0.38,YT高剂量组为4.23±0.43,AL组为4.41±0.45,均显著低于模型组(P0.05);肝脏体积肉眼观察明显小于模型组。AL组大鼠AI为4.93±1.19,CHO为(11.36±3.95)mmol·L-1,LDL-C为(9.78±3.92)mmol·L-1,ET为(39.07±8.98)ng·L-1,显著低于模型组(P0.05);YT高剂量组大鼠AI为4.35±1.40、LDLC为(8.68±2.22)mmol·L-1,显著低于模型组(P0.05);NOS为(51.55±5.83)U·L-1,显著高于模型组(P0.05);YT低剂量组大鼠钙为(3.19±0.32)mmol·L-1,显著低于模型组(P0.05)。结论:野蔷薇根醇提物可通过调节脂质代谢、钙和内皮功能紊乱来改善AS。     

葱白提取物对充血性心力衰竭家兔心室相关电生理指标的影响

目的：探讨葱白提取物(FOB)对充血性心力衰竭(CHF)引起室性心律失常相关电生理的影响。方法健康成年雄性新西兰大耳白兔分为正常对照组(Control组,n=15)、CHF模型组(CHF,n=15)和CHF+FOB干预组(FOB组,n=15)。CHF模型制备经兔耳缘静脉注射异丙肾上腺素(0.3 mg· kg-1· d-1,连续注射3周)诱导,后继续喂养6个月成功完成。利用记录在体心脏左心室单相动作电位（MAP）相关静息膜电位（RMP）,动作电位幅度(APA)、最大上升速率(Maxdv/dt)、动作电位复极化恢复10%、20%、50%、90%(APD10、APD20、APD50、APD90)和短阵快速刺激观察心律失常刺激周长(BCL)、诱发率和持续时间在各组变化。酶解法分离单个心室肌细胞,全细胞膜片钳技术观察心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)在用药前后改变。结果与Control组比较,CHF组RMP、APA、Maxdv/dt显著减小, APD10、APD20、APD50和APD90明显延长,并且BCL、诱发率明显增加,持续时间更长(P均<0.01);与CHF组比较, FOB组RMP、APA、Maxdv/dt明显增加,各APD显著缩短,且BCL严重缩短,诱发率和持续时间均降低(P均<0.01)。FOB能明显抑制CHF心室肌细胞ICa-L电流密度(P<0.01),当钳制电压为+20 mV时,与Control组比较,CHF组ICa-L电流密度由(7.1±0.3) pA/pF增加为(10.9±0.5）pA/pF (P<0.01);当加入FOB作用CHF组心室肌细胞后,ICa-L减小为(6.4±0.2) pA/pF (P<0.01)。FOB能使CHF组ICa-L的I-V曲线明显上调,超过Control组。结论 FOB能显著改善CHF心室肌电生理易损性和室性心律失常的易感性,起到抗CHF室性心律失常作用。其机制可能与FOB抑制CHF心室肌细胞ICa-L有关。     

胃痛宁片质量标准的研究

目的 建立胃痛宁片的质量标准.方法 采用TLC法对处方中龙胆粉进行定性鉴别,采用HPLC法测定蒲公英提取物中咖啡酸的质量分数.结果 在薄层色谱中可检出龙胆苦苷的特征斑点;咖啡酸回归方程为A=42.128 6ρ-19.133 2(r2=1),在6.29～ 62.9 μg/mL范围内线性关系良好,平均加样回收率为96.4％,RSD为0.28％(n=6).结论 所建立的定性方法专属性强,定量方法简便、准确,能有效地控制胃痛宁片的质量.     

六味地黄丸含药血清对Eahy926细胞ERK/Nrf2-HO-1信号通路的影响

目的 观察六味地黄丸含药血清对人血管内皮细胞Eahy926增殖及其ERK/Nrf2-HO-1信号通路的影响.方法 CCK-8检测大鼠5％、10％、20％空白血清与5％、10％、20％含药血清对Eahy926细胞增殖的影响,并用Western-blotting方法检测10％含药血清对Eahy926细胞ERK/Nrf2-HO-1信号通路分子蛋白表达的影响.结果 六味地黄丸含药血清可以促进Eahy926细胞的增殖;在Eahy926细胞中,10％六味地黄丸含药血清能够促进ERK的磷酸化、Nrf2核转位和HO-1蛋白的表达,明显高于无大鼠血清组和10％空白血清组.结论 10％六味地黄丸含药血清诱导ERK磷酸化介导Nrf2入核和HO-1蛋白的表达.     

瓜蒌薤白提取物中3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇的大鼠在体肠吸收研究

目的：研究瓜蒌薤白（GX）提取物中3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇（DK）的大鼠在体肠吸收机制。方法采用单向灌流模型,高效液相色谱-二极管阵列检测器（HPLC-PDAD）测定大鼠在体肠灌流GX提取物中DK的浓度变化,研究其吸收部位和吸收动力学特征。结果 GX提取物中DK的主要吸收部位为空肠、回肠和结肠,且三部分肠段间的吸收无显著性差异,均显著大于十二指肠的吸收（P＜0.05）;不同浓度的GX提取物中的DK的Ka值和Papp值无显著差异。结论 GX提取物中DK在全肠道有不同程度的吸收,其中空肠、回肠和结肠吸收最好,药物浓度对GX提取物中DK的Ka值和Papp值无影响,其吸收机制为被动扩散。     

杜仲乙醇提取物对脑老化模型小鼠血中氧化应激指标的影响

目的：探讨杜仲对脑老化模型小鼠血中氧化应激指标的影响。方法皮下注射D-半乳糖建立小鼠老龄化模型,杜仲乙醇提取物灌胃给药。采用流式细胞仪测定不同组小鼠脑细胞凋亡率,采用ELISA试剂盒测定一系列氧化指标,包括丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、蛋白质羰基含量（PCO）和一氧化氮（NO）含量。结果流式细胞仪测定结果显示,与模型组相比,杜仲提取物组小鼠脑细胞凋亡率明显下降（P＜0.01）。ELISA测定结果表明,与正常组相比,杜仲组小鼠血中NO和SOD水平显著升高（P＜0.01）。与模型组相比,杜仲组小鼠血中MDA和PCO水平显著降低（P＜0.01）,而SOD水平显著升高（P＜0.01）。结论杜仲提取物可能通过有效减轻氧化损伤而发挥其抗脑老化作用。     

“通体结香技术”所产沉香提取物对胃肠动力及胃溃疡的作用

目的：评价“通体结香技术”所产沉香提取物对胃肠道功能的影响,为其今后临床应用及产品开发提供科学依据。方法采用炭末法小肠推进实验,观察沉香对小肠推进速率的影响;甲基橙法胃排空实验检测沉香对小鼠胃内甲基橙残留量的影响;采用应激水浸的方法建立大鼠胃溃疡实验模型,考察沉香对大鼠胃溃疡发生情况及溃疡指数的影响。结果单次和多次灌胃给予通体沉香醇提物（150 mg/kg）能显著增强小鼠肠推进和胃排空速率,多次给予市售沉香醇提物450 mg/kg也能显著增强肠推进作用,但它们各自的沉香水提物作用不明显。同时,通体沉香醇提物单次给药能显著抑制大鼠胃溃疡的发生,多次给药（300 mg/kg）对胃溃疡抑制率为（73.1±5.6）%。结论利用“通体结香技术”所产沉香的醇提物具有促进肠推进、胃排空和抑制胃溃疡的作用。