CD25在人肝毛细胆管的表达

肝脏疾病种类繁多,有相当一部分涉及肝毛细胆管,但毛细胆管用普通HE染色无法辨认,往往需电子显微镜才能观察其形态,导致我们对毛细胆管的分布、形态、病变认识不足。因此,有必要寻求一种方便、实用、低成本的方法来标记肝毛细胆管。本研究通过免疫组织化学,免疫荧光均证实人肝组织毛细胆管表达CD25,并通过阻断试验进一步证实CD25表达的特异性。[第一段]     

0～18岁健康人群的血清N末端脑钠肽前体参考值范围研究

【目的】建立0～18岁健康人群血清N末端脑钠肽前体（N terminal pro‐brain natriuretic peptide ,NT‐proBNP）参考值范围。【方法】用免疫荧光法检测1225例0～18岁健康人群的血清NT‐proBNP浓度。【结果】1225例儿童按新生儿期（0～30 d ）、婴儿期（1个月至1岁）、幼儿期（1～4岁）、学龄前期（4～7岁）、学龄初期（7～10岁）、学龄中期（10～13岁）、青春期（13～18岁）年龄分组检测血清 NT‐proBNP水平,结果依次为：中位数1360．0 pg／mL ,参考范围（250．0～3987．0） pg／mL ;中位数106．0 pg／mL ,参考范围（20．0～532．0） pg／mL ;中位数80．0 pg／mL ,参考范围（20．0～324．0） pg／mL ;中位数58．0 pg／mL ,参考范围（20．0～374．0） pg／mL ;中位数38．0 pg／mL ,参考范围（20．0～163．0） pg／mL ;中位数29．0 pg／mL ,参考范围（20．0～296．0） pg／mL ;中位数20．0 pg／mL ,参考范围（20．0～145．0） pg／mL。0～18岁健康人群各年龄组NT‐proBNP水平与年龄的增长呈负相关（R＝－0．230,P＜0．05）。各年龄段男女性别间的NT‐proBNP无显著性差异（ P＞0．05）。【结论】0～18岁健康人群血清NT‐proBNP水平随年龄增加有降低趋势;0～18岁不同年龄段健康人群血清NT‐proBNP参考值范围与成人不同,不能随意套用。     

抗中性粒细胞胞浆抗体3种检测方法的比较

目的:寻找敏感性、特异性较高又适宜我国目前推广、普及的抗中性粒细胞胞浆抗体(antineutrophilcytoplasmicantibodies,ANCA)的检测方法。方法:对598份血清应用间接免疫荧光(indirectimmunofluorescence,IIF)、总抗原ELISA、抗原特异性ELISA(MPO和PR3ELISA)等3种方法进行ANCA检测。结果:IIF法最为敏感,但IIF法易受抗核抗体的影响,故不宜单独应用。MPO和PR3ELISA检测,对于原发性小血管炎的诊断特异性高,但由于需要价格昂贵的特异性纯化抗原,目前难以在我国普及推广。总抗原ELISA对于抗MPO和抗PR3抗体阳性血清检测的敏感性可达92%。结论:IIF法与MPO和PR3ELISA联合应用是较为理想的检测方案;IIF法与总抗原ELISA联合应用也具有较好的敏感性和特异性,且价格便宜,适于现阶段在我国推广应用。     

呼吸道合胞病毒的分型研究

目的 了解北京地区１９９０￣１９９１年和１９９７￣１９９８年两个非连续的流行年中呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）Ａ、Ｂ亚型和基因型的流行情况。方法 用间接免疫荧光法（ＩＩＦ）检测ＲＳＶ阳性鼻咽分泌物（ＮＰＳ）标本或ＲＳＶ分离株,划分Ａ、Ｂ亚型。根据Ｎ基因片段的限制性酶切图型将ＲＳＶ分离株分成至少６个基因型ＮＰＩ－６ＮＰＩ,３和６属于Ｂ亚型,ＮＰ２４和５属于Ａ亚型。根据ＳＨ基因片段的核苷酸序列将Ａ亚型分离株     

可溶性细胞间粘附分子-1时间分辨荧光免疫分析法的建立及对肺癌诊断的临床应用

目的建立可溶性细胞间粘附分子-1生物素-亲和素系统（BSA）时间分辨荧光免疫分析方法 ,并对其方法学及对肺癌诊断临床应用价值进行评价。方法用2株匹配的单克隆抗体分别作为捕获抗体和检测抗体,利用制备的铕标记链亲和素（SA-Eu3＋）作为示踪物并与生物素化的检测抗体特异结合,建立双位点多层夹心法BSA-TRFIA法,检测68例正常对照者和61例肺癌患者血清sICAM-1水平,对其方法学和临床应用价值进行评价。结果 sICAM-1TRFIA检测灵敏度为1.32μg/L,批内和批间CV分别为4.24%和6.83%,平均回收率为99.87%,与ELISA法测定值的相关系数为0.939,可测范围为2.5-933μg/L,肺癌组与健康对照组比较具有显著性差异（P〈0.01）。结论 sICAM-1时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）是一种新型非放射性标记免疫分析法,具有良好的特异性、准确度、稳定性,可作为肺癌的辅助诊断指标。     

骨髓基质细胞自体移植治疗兔创伤性脑损伤

目的:研究BrdU和GFP作为兔骨髓基质细胞标记物的可行性。方法:分别用上述两种标记物标记兔骨髓基质细胞,检测了标记率,及细胞周期、凋亡率,并描绘生长曲线;制作兔创伤性脑损伤模型,并将标记的细胞经腰穿自体移植,移植后4周,行脑组织冷冻切片,并进行免疫荧光检查。结果:BrdU的标记率为73.3%,GFP的标记率为81.6%。两者对体外培养的兔骨髓基质细胞的生长特性均无明显影响。并在脑损伤部位发现移植细胞。结论:BrdU和GFP均可以作为兔骨髓基质细胞的标记物,自体移植标记后的细胞可以迁移到损伤脑组织。     

小儿隐孢子虫病的实验诊断研究

目的 探讨不同检测方法对小儿腹泻粪便中隐孢子虫卵囊（ＣＳＯ）的诊断效果。方法 对６４９例急性腹泻患儿的粪便采用７种方法检测ＣＳＯ：（１）番红－美兰染色法（ＳＭＢ）;（２）改良抗酸染色法（ＭＡＦ）;（３）蔗糖漂浮（ＳＳＦ）后ＳＭＢ染色法;（４）ＰＢＳ－乙醚（ＰＢＳ－Ｅ）离心沉淀后ＭＡＦ染色法;（５）聚蔗糖－泛影酸钠（ＦＳＤ）纯化后扫描电镜法（ＳＥＭ）;（６）ＦＳＤ或Ｐｅｒｃｏｌｌ纯化后免疫组化法（Ａ     

表皮生长因子受体在植入前胚胎细胞中的表达

目的 研究表皮生长因子（ＥＧＦ）受体在植入前胚胎细胞中的表达及其生物学意义。方法 应用间接免疫我法检测人植入前胚胎细胞ＥＧＦ受体的表达情况。结果 未受精卵即卵母细胞,受精卵卵裂后２细胞期至１０细胞期胚胎细胞表面均有ＥＧＦ受体的表达,其表达量的荧光强度基本一致,结论ＥＧＦ受体在植入前胚细胞中有表达,ＥＧＦ超家族成员听肝素结合ＥＧＦ可能通过与ＥＧＦ受体结构,参与早期人类胚的生长、发育和着床。     

时间分辨技术定量检测儿童乙肝病毒抗-HBs水平的研究

目的定量检测儿童体内乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)血清标志物抗-HBs的含量;对儿童体内抗-HBs不同含量进行统计,分析其对HBV的免疫力。方法运用时间分辨荧光免疫技术对3 480例非HBV感染儿童进行HBV抗-HBs定量检测。结果抗-HBs含量在0~mIU/ml 817人(23.5%)、在10~100 mIU/ml 1 142人(32.8%)、>100 mIU/ml 1 521人(43.7%),不同性别间抗-HBs含量差异无统计学意义(Z=0.34,P=0.735);不同年龄组之间抗-HBs含量差异有统计学意义(Z=3 634.00,P<0.001),且年龄组与抗-HBs含量呈现负相关(rs=-0.217,P<0.001)。结论安徽省部分儿童对HBV的免疫力不容乐观,且随着年龄的增长,抗-HBs水平呈下降趋势,因此定期定量检测抗-HBs含量和加强乙肝疫苗预防接种非常必要。