丙型肝炎病毒感染患者血清肝特异性自身抗体的检测及临床研究

目的了解丙型肝炎患者血清中肝特异性自身免疫性抗体的检出率,探讨自身免疫在丙型肝炎(HCV)感染中的意义。方法采用间接免疫荧光法,对220例丙型肝炎病毒感染者血清进行肝特异性自身抗体的检测;应用聚合酶链反应定量检测血清HCV-RNA含量,HCV抗体的检测用ELISA法;回顾性分析HCV-RNA病毒、AST、ALT、ALP和r-GT与自身抗体检出的关系。结果220例丙型肝炎患者总自身抗体检出率为32.73%;HCV-IgG单阳性(HCV-IgG( )HCV-RNA(-))的检出率为29.57%;HCV-IgG( )HCV-RNA( )自身抗体检出率为40.59%,HCV-IgG( )HCV-RNA(-)与HCV-IgG( )HCV-RNA( )组比较差异有统计学意义(P<0.01)。各组与正常对照比较差异均有统计学意义(P<0.01);自身抗体以低滴度为主,主要为抗核抗体。自身阳性的检出与性别无关(P>0.05)与年龄关系密切(P<0.01)。自身抗体阳性丙型肝炎患者的血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)及γ-球蛋白均高于自身抗体阴性患者,差异有统计学意义(P<0.01)。结论HCV在感染过程中可诱导自身免疫反应,使感染者体内产生多种自身抗体,自身抗体检出率与年龄关系密切且与病毒的复制有关。自身抗体以低滴度为主,主要为抗核抗体。自身抗体可能是HCV感染后肝组织损伤的重要因素,应引起重视。     

免疫荧光技术中不同固定剂对细胞p65核移位观察效果的影响

目的观察免疫荧光技术中不同固定剂以及Triton X-100不同渗透时间对小鼠腹腔巨噬细胞p65蛋白核移位的影响,找出最适合观察p65蛋白移位的固定方法及Triton X-100渗透时间。方法采用免疫荧光的方法观察使用不同固定剂(甲醇,1%～4%甲醛)固定,0.1%Triton X-100渗透3～15min的条件下,观察脂多糖刺激2h后,p65蛋白细胞内定位的情况。结果 p65蛋白在对照细胞主要定位于细胞质,脂多糖(LPS)刺激后p65蛋白移入胞核。甲醇固定后细胞荧光染色显色很弱且核区不明显,染色弥散;1%、2%甲醛固定不良可引起细胞收缩;4%甲醛固定后,核区与胞质p65蛋白荧光染色对比明显。0.1%Triton X-100作用3～5min效果最佳,而作用10～15min对照细胞核内也有较强荧光。结论本实验表明,在免疫荧光技术中采用4%甲醛固定20min,0.1%Triton X-100渗透3～5min可更好的观察LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞p65核移位。     

人羊膜上皮细胞的分离培养及其免疫原性初步研究

目的:分离培养人羊膜上皮细胞(HAEC),通过与同种异体淋巴细胞混合培养探讨HAEC的免疫原性,为进一步的临床研究提供指导.方法:体外分离培养HAEC,透射电镜观察细胞超微结构,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和细胞免疫荧光方法检测上皮细胞相关基因及细胞表面标记细胞角蛋白CK18表达情况.与同种异体外周血来源淋巴细胞...