吉非替尼对肺癌A549细胞系的放射增敏作用

目的:研究分子靶向药物吉非替尼(Gefitinib,Iressa)在体外对人肺腺癌A549细胞系的放射增敏作用。方法:MTT法检测Iressa单药或与放射线联合对A549细胞的抑制率;将细胞分为4组:对照组、Iressa组、照射组、Iressa 照射组,15μg/ml的Iressa处理72h后予照射,进行单细胞集落形成率试验、流式细胞术分析照射后0、24、48h各组细胞周期和凋亡率变化。结果:MTT结果显示,A549细胞的抑制率与Iressa浓度成正相关,Iressa处理48hIC50为49.88μg/ml。当Iressa浓度为5、10、15、20、30、40μg/ml时,能增强放射线对A549细胞的抑制率。各组单细胞集落形成率分别是对照组(11.97±2.82)%、Iressa组(7.43±0.58)%、照射组(1.55±0.5)%、Iressa 照射组(0.57±0.15)%,提示Iressa本身可抑制A549细胞增殖,与放射线联合能增强放射线抑制A549细胞的效果。流式细胞术分析显示15μg/ml的Iressa处理72小时,A549细胞周期中的G0~G1期比例明显升高,从(67.51±2.56)%上升到(73.63±1.62)%;G2~M期比例从(8.39±0.61)%下降到(7.02±1.1)%;S期比例从(24.1±2.65)%下降到(19.36±1.63)%;凋亡率从(0.99±0.56)%上升到(1.95±0.7)%。照射后24hIressa 照射组凋亡率升高明显,为(4.34±1.13)%,对照组(0.33±0.46)%,Iressa组(0.89±0.37)%,照射组(0.98±0.23)%。结论:Iressa在体外对A549细胞有抑制增殖和促进凋亡作用,使细胞周期G0~G1期比例升高,S期和G2~M期比例下降,凋亡率升高。Iressa与放射线联合可以明显提高A549细胞的凋亡率。本试验显示Iressa具有放射增敏作用,为临床开展放射线联合Iressa治疗非小细胞肺癌的研究提供了实验依据。     

流式细胞术用于药物抗真菌效应的检测

目的尝试建立用流式细胞术检测药物抗真菌效应的新方法。方法以碘化丙锭为荧光染料,用流式细胞术检测标准菌株近平滑念珠菌ATCC22019在不同浓度氟康唑（FCZ）作用下各管平均荧光强度,探讨最佳实验条件。结果真菌MFI值随着FCZ浓度的增加而增强,其变化具有浓度依赖性,较好地反映了药物的抗真菌效应。结论成功建立用流式细胞术检测药物抗真菌效应的新方法,流式细胞术在该领域的应用值得进一步研究。     

经胸多普勒超声心动图检测儿童冠状动脉血流

目前儿童各类原发或继发性冠状动脉病变、心肌肥厚所导致的冠状动脉功能的改变已逐步引起广泛的关注。近年来,有不少研究运用经胸多普勒超声心动图成功检测儿童冠状动脉血流及其储备功能,从而为冠状动脉疾病的诊断提供了一种准确有效、安全无创的检测手段。     

木鳖子素的分离与纯化

目的:分离纯化到单一组分的木鳖子素。方法:木鳖子脱脂粉用磷酸盐缓冲液提取,提取液用硫酸铵沉淀,沉淀用水溶解后先上CM Sepharose Fast F low阳离子交换凝胶柱然后上SephacrylTMS-200 H igh F low凝胶柱。结果:纯化到单一组分的木鳖子素,分子量为29000。结论:该方法快速、稳定。     

Validation of the Proximal Isovelocity Surface Area Method for Assessing Mitral Regurgitation in Children

The proximal isovelocity surface area (PISA) method for calculating volume flow through the regurgitant orifice has attracted significant attention. A number of in vitro studies and clinical studies in adults suggest that the method is accurate. However, when applying the method to children it must be noted that the absolute regurgitation volume is small, and the range of body sizes is wide. This study investigated the accuracy of the PISA method for quantitative assessment of the severity of mitral regurgitation in children. Twenty children aged 7 months to 12 years (average 4.7 years) with mitral regurgitation but without interventricular shunt or aortic stenosis were selected for this study. Underlying cardiac diseases included atrioventricular septal defects in nine, isolated mitral regurgitation in five, and association with other heart defects in six. The PISA radius (r) and the duration of regurgitation (T) were measured on color M-mode recordings, with the M line passing through the center of the PISA. Assuming that the PISA is a hemisphere, maximal regurgitant flow rate (MFR: ml/s) was calculated as MFR = 2π×~ r ²×~ V (r= maximal radius, V= aliasing velocity), and regurgitant stroke volume (RSVpisa) as RSVpisa = 2π×~ MSR ×~ V×~ T (MSR = mean square of the PISA radius during regurgitation). As a validating standard, total stroke volume (TSV) using two-dimensional echocardiography determined by the area–length volumetry method and forward stroke volume (FSV) by the pulsed Doppler method were measured, and regurgitant stroke volume (RSV_D: RSV_D= TSV − FSV) and regurgitant fraction (RF: RF = RSV_D/TSV) were calculated. A linear correlation was found between MFR, RSVpisa, and RSV_D (X) (MFR = 4.2X + 54.0, r= 0.84. RSVpisa = 1.0X + 9.8, r= 0.90), and both RSVpisa and MFR divided by body surface area (BSA: m²) revealed a significant correlation with regurgitant fraction (X) by nonlinear regression analysis (RSVpisa/BSA = 26.2 ×~ X/(1 − X) + 16.8, r= 0.85. MFR/BSA = 121.8 ×~ X/(1 − X) + 92.2, r= 0.79). It is concluded that maximal regurgitant flow rate, regurgitant stroke volume, and regurgitant fraction can be accurately predicted in children using the PISA method by Doppler echocardiography.     

Th17、Tc1细胞在宫颈鳞癌组织中的表达及意义

目的:研究宫颈鳞癌组织中Th17及Tc1细胞表达,探讨Th17及Tc1细胞在宫颈鳞癌发生发展中的作用及相互关系。方法:以早期宫颈鳞癌患者为实验组,以良性病变行子宫切除的慢性宫颈炎患者为对照组,制备宫颈组织淋巴细胞单细胞悬液后,用流式细胞术检测组织中Th17及Tc1细胞的表达。结果:实验组和对照组中Th17细胞比例分别为(3.89±1.26)%和(1.51±0.46)%,Tc1细胞比例分别为(1.45±0.71)%和(5.37±2.95)%。与对照组比较,实验组中Th17细胞比例显著升高(P0.01),Tc1细胞比例显著降低(P0.01)。实验组中盆腔淋巴结阳性者较阴性者Th17细胞表达降低(P=0.038);临床分期II期患者较I期患者Tc1细胞表达增高(P=0.046)。宫颈鳞癌组织中Th17与Tc1细胞表达呈负相关(r=-0.445,P=0.014)。结论:Th17及Tc1细胞在宫颈鳞癌患者肿瘤局部免疫调节反应中均起着重要作用,且Th17细胞可能通过抑制Tc1细胞的功能发挥免疫调节作用。     

香菇多糖对原发性肝癌TACE前后外周血CD4+CD25+调节性T细胞的影响

目的 观察香菇多糖在原发性肝癌(TACE)前后对外周血CD4+CD25+调节性T细胞的变化,探讨香菇多糖对原发性肝癌患者的免疫调节机制.方法 原发性肝癌46例,随机分为治疗组24例,对照组22例,治疗组在TACE术后第1天给予香菇多糖1 mg,3次/周,两组化疗方案相同,在TACE前及TACE后4周分别抽外周血,应用流式细胞术检测CD4+CD25+调节性T细胞的变化.结果 外周血CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞的百分率:治疗组在TACE前为(10.59±4.34)%、TACE后4周(6.72±2.60)%;对照组在TACE术前为(10.21±4.42)%、TACE后4周为(8.56±3.12)%.在TACE前两组间差异无统计学意义(P>0.05);TACE后4周时治疗组较对照组低,两组间差异有统计学意义(P<0.05).结论 香菇多糖可提高恶性肿瘤患者的免疫功能,在TACE后立即给药效果更佳.     

血小板微颗粒的促凝功能与流式细胞术绝对计数值的相关性

目的：探讨流式细胞术所获得血小板微颗粒计数与其功能间的关系。方法选取本院2012年9月~2014年9月的100例健康孕产妇及患有合并症孕产妇患者的血液样本作为研究对象,经流式细胞术计数分析及三种功能分析,探讨其相关性。结果流式细胞术获得的乳黏素蛋白促凝血的微粒体计数与Zymuphen MP活性呈弱相关(r越0.5370,P<0.01);与内在凝血酶潜力ETP呈正相关(r越0.7444,P<0.01);与STA磷脂(PPL)促凝分析呈负相关(r=-0.7872,P<0.01)。膜联蛋白V+及促凝血的血小板源性微颗粒的含量水平与功能分析一致。结论血小板微颗粒的促凝功能与流式细胞术绝对计数值密切相关,多参数的使用将会提供更多的生物学信息。     

2型糖尿病患者血小板活化与肾病的关系

目的探索血小板活化异常与糖尿病肾病（DN）的关系。方法我们采用流式细胞术检测116例2型糖尿病（DM）患者周围血中CD62p^＋，CD63^＋，CD31^＋，CD41^＋及血浆α-颗粒膜蛋白（GMP140）含量测定（ELISA法），并依据24h尿白蛋白排出率（UAER）将其分为正常白蛋白尿组（DM1）、微量白蛋白尿组（DM2）、大量白蛋白尿组（DM3），并与40例正常人对照（NC）。结果周围血中CD62p^＋，CD63^＋，CD31^＋，CD41^＋及血浆GMP140在DM各组均较Nc组升高。特别是DM2，DM3组较NC组明显升高。DM合并高血压者周围血中CD62p^＋，CD63^＋，CD31^＋，CD41^＋及血浆GMP140均较无高血压者为高（P〈0．05）。结论血小板活化的增强可能与DN的发生、发展相关。     

原血细胞对于儿童急性B淋巴细胞白血病预后判断的价值

目的 探讨儿童急性B 淋巴细胞白血病(B-ALL)巩固化疗期骨髓原血细胞(HGs)对于儿童急性B 淋巴细胞白血病(B-ALL)预后判断的意义.方法 回顾性分析196 例初发B-ALL 患儿,根据危险分型分为高危(n=55)、中危(n=69)和低危(n=72)3 组;根据临床结局分为完全缓解(n=165)和复发组(n=31).采用欧洲BIOMED-1 标准化流式细胞术微小残留病(MRD)检测方案,检测巩固化疗期HGs 数量.Kaplan-Meier 生存曲线统计患儿无事件生存率(EFS).结果 高危组患儿HGs 明显低于中危和低危组,差异均有统计学意义(PP1.0% 组,差异有统计学意义(P结论 HGs 可反映B-ALL 化疗效果,可用于B-ALL患儿疗效及预后的监测.