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81.
目的运用pADxsi系统构建带人PDX1与NKX6.1双基因表达腺病毒载体。方法采用基因克隆技术,将目的基因NKX6.1克隆至pShuttle-GFP-CMV中,得到pShuttle-GFP-CMV-NKX6.1;将PDX1克隆至pShuttle-CMV-GFP/CMV-NKX6.1上,替换掉GFP,得到pShuttle-CMV-PDX1/CMV-NKX6.1;将CMV-PDX1/CMV-NKX6.1从pShuttle-CMV-PDX1/CMV-NKX6.1转移到ADxsi骨架载体上,得到pADxsi-CMV-PDX1/CMV-NKX6.1,在293细胞中进行包装与扩增活病毒,病毒滴度测定;体外感染人胎肝间充质干细胞。结果分别酶切重组人PDX1与NKX6.1基因表达穿梭质粒与腺病毒载体质粒,阳性克隆均获得与理论相一致的目的条带;重组腺病毒感染人胎肝间充质干细胞比例达90%以上;RT-PCR结果表明目的基因在人胎肝间充质干细胞内能稳定表达;免疫细胞化学与间接荧光检测目的PDX1与NKX6.1蛋白分子均特异在细胞核表达。结论应用pADxsi系统重组技术成功构建了人PDX1与NKX6.1双基因表达腺病毒载体。 相似文献
82.
中国壮族、白族、藏族和蒙古族群体中D19S400基因座的遗传多态性研究 总被引:2,自引:0,他引:2
采用PCR技术分析中国壮族、白族、藏族和蒙古族4个群体中D19S400基因座的遗传多态性,获得了该4个群体D19S400基因座的群体遗传学数据。从356份分别采自南宁壮族、大理白族、拉萨藏族和海拉尔蒙古族4个群体的无血缘关系个体的静脉血,共发现9个等位基因,观察到40种基因型。观察杂合度为0.75~0.89,个人识别机率为0.9274~0.9625。观察到的基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。等位基因频率的分布在4个群体之间有显著性差异。作者认为D19S400基因座个人识别能力高,方法简便、灵敏、重复性好,在法医学个人识别和亲子鉴定应用中有较高的价值。 相似文献
83.
目的 :小鼠脊髓重量和脊髓颈膨大截面积大小两个性状进行数量性状基因座 (Quantitativetraitlocus ,QTL)的分析定位。方法 :利用了两个近交系品种的亲本A/J(简称A)和C5 7BL/ 6J(简称B)以及其F2代小鼠 ,根据已知小鼠微卫星DNA数据资料合成了 87对覆盖小鼠全基因组微卫星DNA引物 ,在基因组中的平均遗传距离为 15 .5cM。取 10 0只脊髓发育偏向两个极端的F2代小鼠 ,其中一半来自A×B杂交 ,一半来自B×A杂交 ,应用PCR方法进行基因组扫描。结果 :有 9个QTL与脊髓重量相关 ,这些QTL分别位于 4、8、14、15、17、18、19和X染色体上。A×B (F2 )小鼠基因组扫描的结果显示 ,D14Mit3 7、D15Mit15 8、D17Mit16和D19Mit16四个位点与脊髓重量连锁 ;B×A(F2 )则是在D4Mit2 14、D8Mit2 42、D18Mit12 2、DXMit14 0和DXMit64五个位点上与脊髓重量连锁。其中 3个QTLp <0 .0 1;分别位于D15Mit15 8、DXMit14 0和DXMit64附近 ;其表型变异的解释率分别为 2 4%、19%和 15 % ;加性效应分别为 -3 .78、3 .41和 2 .0 6。其他QTL的P值在 0 .0 1~ 0 .0 5之间。 7个QTL与颈膨大截面积相关 ,分别位于 相似文献
84.
[目的]调查获得华南地区汉族群体遗传多态性参数,并与以往相关文献报道的群体资料进行统计比较.同时评估PowerPlexTM 16体系应用于华南汉族人群进行法医学个体识别及亲子鉴定的价值.[方法]应用PowerPlexTM 16荧光标记复合扩增系统检测4 786名华南地区汉族无关个体15个STR基因座的多态性,统计计算群体遗传学参数,并将获得的等位基因频率与文献报道的群体资料进行统计比较.[结果]15个STR基因座的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),共检出241个等位基因,频率在0.0001~0.5458;共1 043种基因型.在13个基因座上检出共60个等位基因阶梯以外的等位基因.15个基因座的杂合度观察值(Ho)在0.6030~0.9076之间,多态信息含量(PIC)在0.5428~0.9044之间,累计个人识别率(TDP)达0.9999999999999999971,三联体累计非父排除概率(CPE)达到0.99999981,单亲鉴定累计亲权排除概率(CPE*)为0.9543.本文调查结果与以往文献报道的人群等位基因频率资料有不同程度的差异.[结论]15个STR基因座在华南汉族人群中有较高的多态性,PowerPlexTM 16荧光标记复合扩增系统对华南汉族人群的个体识别及亲子鉴定具有很高的应用价值.本文调查获得的群体遗传学数据可为法医学个人识别和亲子鉴定提供结果评估的依据. 相似文献
85.
86.
目的 分析INK4/ARF基因座甲基化状态与非小细胞肺癌临床病理特征的相关性及探讨基因座内各编码基因甲基化协同调控的可能性。 方法 临床收集81例非小细胞肺癌患者手术切除的配对癌灶及癌旁石蜡组织标本;采用甲基化特异性PCR(MSP)对石蜡组织标本DNA进行p16INK4a、p15INK4b及p14ARF基因甲基化检测并与临床病理特征进行相关性分析。结果 癌灶组织中的p16 INK4a基因甲基化在鳞状细胞癌中的分布明显高于腺癌(P<0.01),并与肿瘤大小密切相关(P<0.05)。癌灶组织中p16INK4a与p15INK4b基因甲基化状态密切相关(P<0.05);结论 INK4/ARF基因座启动子区甲基化与非小细胞肺癌发生、发展相关;p16INK4a与p15INK4b基因甲基化状态的关联提示INK4/ARF基因座可能存在表观协同调控方式。 相似文献
87.
目的探讨输血后不同时间、不同输血量供者STRs基因型对受者STRs基因型的影响。方法采集3例患者输血前以及输血后4h、8h、12h的血液和供者血液,EDTA抗凝,用Chelex-100法提取DNA,选D1S549、D18S865、D3S1754、D12S391、D12S375、D6S477等6个STRs基因座进行PCR扩增,扩增产物用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳,银染显色分型。结果6个STRs基因座的检测结果显示受者输血前及输血后12h内STRs基因型一致。结论输血量不大于1200ml的受者输血后12h内STRs基因型未受供者血液STRs基因型的影响。 相似文献
88.
目的 了解鼠疫菌102kb pgm基因座一端IS100的缺失与pgm~1稳定性的关系。方法 采用聚合酶链式反应(PCR)扩增国内各型鼠疫菌102kb pgm基因座色素沉着这一端IS100的片段,并选择克隆测序分析。结果 通过PCR扩增,其中只能扩增出约2560bp左右条带的生态型,也就是其102kb pgm基因座色素沉着这一端IS100的片段缺失,除锡林郭勒高原布氏田鼠型,还有北天山东段型、北天山西段A、B型,其pgm~ 表型非常稳定;而有一部分菌株的扩增结果为阴性另一部分菌株扩增出4492bp条带的生态型,扩增出4492bp条带的菌株102kb pgm基因座色素沉着这一端有IS100,结果为阴性的菌株其整个102kb pgm基因座可能已经丢失,此种情况包括祁连山型,青藏高原型,冈底斯山型,滇西纵谷型等,其pgm~ 表型表现出不稳定。结论 鼠疫菌102kb pgm基因座一侧缺失IS100的菌株,可具有较稳定的pgm~ 表型,而鼠疫菌102kb pgm基因座两侧有IS100的菌株,pgm~ 表型不稳定。 相似文献
89.
目的调查福建福州地区汉族群体遗传15个STR基因座多态性参数,同时评估AmpFlmSTR IdentifilerTM体系应用于该地区汉族人群进行法医学个体识别及亲子鉴定的价值。方法应用AmpFlmSTR IdentifilerTM体系荧光标记复合扩增系统检测350名福建福州地区汉族无关个体15个STR基因座的多态性,统计计算群体遗传学参数。结果 15个STR基因座的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P0.05),发现4个稀有等位基因。15个STR遗传标记均具有高度多态性,杂合度0.12~0.405,匹配概率0.032~0.225,个体识别力0.775~0.968,多态性信息含量0.55~0.86,非父排除率0.285~0.761。结论 15个STR基因座在福建福州地区有较高的多态性。通过这份样本实验和等位基因频率总结,得到了福建福州人群更多法医学亲权鉴定和个人识别等位基因多样性的客观数据。 相似文献
90.
目的调查20个常染色体短串联重复序列(STR)基因座的突变情况。方法采集1 140例亲子鉴定的3 180份血样本,采用STRtyper-21G和Power Plex21系统扩增20个STR基因座分型,共有40 800次等位基因传递,统计各基因座发生突变的频率。结果在20个基因座中发现16个基因座共发生30次突变,平均突变率为0.7×10-3(95%CI 0.5×10-3,1.1×10-3),其中一步突变25次,两步突变3次,三步突变2次;父、母源性突变比率为3∶1,不能确定来源突变6次。结论 STR基因座突变是较为常见的现象,应不断积累STR基因座突变数据,选择其他多态性好、突变率低的遗传标记,以保证检验结论的准确可靠。 相似文献