血清microRNA-21在食管鳞状细胞癌中表达的临床意义

目的 探讨食管鳞状细胞癌（ESCC）患者血清中外核体microRNA-21（miRNA-21）表达水平的临床意义.方法 从51例ESCC患者（ESCC组）血清中分离出外核体,提取总RNA,通过实时定量PCR技术检测miRNA-21的表达情况.以良性病变且无全身性炎性反应的41例患者作为对照组.结果 ESCC组患者血清中外核体miRNA-21表达水平明显高于对照组患者（P〈0.01）,而在已去除外核体的剩余血清中检测不到miRNA-21.ESCC患者血清外核体能在体外诱导食管鳞状细胞癌细胞增殖.外核体miRNA-21高表达亚组中年龄≥68岁患者比例、T3/T4型比例、III/IV期患者比例明显高于低表达亚组,而发生癌症转移患者的比例明显降低（P〈0.05,P〈0.01）.结论 ESCC患者血清中外核体miRNA-21表达明显上调,外核体miRNA-21表达水平与肿瘤进展和侵袭性密切相关,提示外核体miRNA-21可能是肿瘤治疗的一个有效靶标.     

自体树突状细胞来源的Exosome活化HBV携带者PBMCs的体外研究

目的探讨负载HBcAg的树突状细胞（DCs）来源的Exosomes（DEXs）体外活化自体外周血单个核细胞（PBMCs）的能力,并对慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者与自然免疫获得者来源的DEXs的功能进行比较。方法培养PBMCs来源的DCs,分级离心法收获DEXs,电镜及Western blot分析DEXs结构及蛋白成分,MTS和ELISPOT法检测负载HBcAg的DEXs体外活化自体PBMCs增殖及产IFN-γ的能力。结果负载HBcAg的成熟DEXs体外刺激自体PBMCs增殖能力强于未成熟者（P〈0.01）,自然免疫者与慢性感染者间差异无统计学意义;成熟DEXs刺激PBMC产IFN-γ能力亦强于未成熟者[（182±7）vs（14±2）,P〈0.05],且自然免疫者刺激PBMCs产IFN-γ能力强于慢性感染者（68±12,P〈0.05）。慢性感染者mDCs联合mDEXs刺激PBMCs产IFN-γ能力强于单用mDCs[（326±3）vs（275±23）,P〈0.05],相当于自然免疫获得者联合组（396±15,P〉0.05）。结论 mDEXs可有效活化自体PBMCs,且自然免疫者mDEXs活化PBMCs能力强于慢性感染者,这一现象可能与慢性感染者体内T细胞活化过程存在缺陷有关。     

GP120-specific exosome-targeted T cell-based vaccine capable of stimulating DC- and CD4(+) T-independent CTL responses

The limitations of highly active anti-retroviral therapy (HAART) have necessitated the development of alternative therapeutics. In this study, we generated ovalbumin (OVA)-pulsed and pcDNAgp120-transfected dendritic cell (DC)-released exosomes (EXOova and EXOgp120) and ConA-stimulated C57BL/6 CD8⁺ T cells. OVA- and Gp120-Texo vaccines were generated from CD8⁺ T cells with uptake of EXOova and EXOgp120, respectively. We demonstrate that OVA-Texo stimulates in vitro and in vivo OVA-specific CD4⁺ and CD8⁺ cytotoxic T lymphocyte (CTL) responses leading to long-term immunity against OVA-expressing BL6-10_OVA melanoma. Interestingly, CD8⁺ T cell responses are DC and CD4⁺ T cell independent. Importantly, Gp120-Texo also stimulates Gp120-specific CTL responses and long-term immunity against Gp120-expressing B16 melanoma. Therefore, this novel HIV-1-specific EXO-targeted Gp120-Texo vaccine may be useful in induction of efficient CTL responses in AIDS patients with DC dysfunction and CD4⁺ T cell deficiency.     

负载乳腺癌抗原的脐血树突细胞外泌体抗肿瘤免疫作用

目的:探讨负载乳腺癌抗原的人脐带血树突状细胞(DCs)分泌的外泌体的抗肿瘤免疫效应。方法:提取新鲜脐血单个核细胞,体外诱导分化为DCs,提取乳腺癌细胞MCF-7肿瘤抗原,并冲击脐血DCs,加入LPS诱导其成熟,利用流式细胞仪检测表型;超速离心法收获负载抗原的脐血DC外泌体;MTT法检测外泌体诱导的T淋巴细胞增殖反应及其激活的CTL对肿瘤细胞的杀伤效应。结果:脐血DC表面标志CD34、CD80、CD86、CD11c阳性细胞数与新鲜脐血单个核细胞相比明显增加(P<0.05);Western-Blot结果显示,负载乳腺癌的脐血DC外泌体携带有MHC-Ⅱ类、CD40、CD80、CD86分子;成熟脐血DC组及负载乳腺癌抗原脐血DC外泌体对同种异体来源的T细胞均有明显促增殖作用;负载乳腺癌抗原的脐血DC及其外泌体激活的CTL均能对乳腺癌细胞MCF-7产生显著地杀伤作用(P<0.05)。且在效靶比100∶1时,外泌体的杀伤作用高于负载抗原的脐血DC(P<0.05)。结论:负载乳腺癌抗原脐血DC分泌大量外泌体,可促进同种异体T细胞增殖,并能诱导特异性抗乳腺癌的免疫效应。     

Exosomes致敏的树突状细胞介导的抗大肠癌LoVo细胞株的作用

目的：分离LoVo细胞释放的exosomes,以其致敏树突状细胞（dendritic cell,DCs）,观察其对细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocytes,CTLs）的激活效应。方法：离心超滤和蔗糖密度梯度离心法分离LoVo细胞释放的exosomes,常规方法从静脉血单个核细胞诱导DC,并分离T细胞,将LoVo细胞来源的exosomes冲击或未冲击的DCs与T细胞共培养。MTT比色法检测体外细胞毒活性。结果：LoVo细胞分泌的exosome致敏的静脉血DCs激活CTL的能力显著高于肿瘤冻融抗原致敏的DCs组,在效靶比为50：1时,两组CTLs对LoVo细胞的杀伤率为（67．9％vs38．7％,P〈0．05）。结论：树突状细胞经来自LoVo细胞分泌的exosomes致敏后,能活化CTLs而杀伤肿瘤细胞。     

不同来源的外泌体对特发性肺纤维化的免疫调节作用

特发性肺纤维化（IPF）是一种慢性进行性的间质性肺病,其发病机制目前尚无定论。成纤维细胞直接参与IPF过程的理论已被广泛接受,同时研究认为IPF的形成、发展与炎症、免疫息息相关,主要表现为免疫细胞与成纤维细胞间的相互作用。外泌体是细胞间进行生物信息通信的重要载体,不同细胞来源的外泌体携带着不同的信号因子,可作为免疫细胞与成纤维细胞的桥梁,在IPF的炎症反应和免疫调节中发挥作用,同时外泌体或将成为临床诊断和治疗IPF的重要方法。该文就不同细胞来源的外泌体在IPF中的研究进展进行综述,以了解外泌体作为细胞间信息交流的载体在调节IPF的形成与发展中的作用。     

外泌体在肾间质纤维化中作用的研究进展

慢性肾脏病（CKD）已成为全球性的公共卫生问题,CKD患者的最终结局往往会发展为终末期肾病（ESRD）。肾间质纤维化（RIF）是不同病因的CKD进展为ESRD的共同途径。因发病机制复杂,目前RIF尚无有效的治疗方法,近期研究表明外泌体在多种肾脏疾病的发生发展中发挥着重要作用。该文对外泌体在RIF发病机制中作用的最新研究...     

慢性丙型肝炎患者血清和外泌体LncRNA HEIH水平及其临床意义探讨*

目的 探讨慢性丙型肝炎(CHC)患者血清和外泌体肝细胞癌中高表达的中长链非编码RNA(long non-coding RNA HEIH,LncRNA-HEIH)水平变化及其临床意义。方法 2017年9月～2020年7月我院诊治的77例CHC患者和同期40例肝细胞癌(HCC)患者,采用定量RT-PCR法检测血清和外泌体LncRNA HEIH水平。CHC患者接受标准抗病毒治疗和肝活检。采用多元Logistic回归分析,应用ROC曲线分析血清和外泌体LncRNA HEIH水平预测肝组织病变的价值。结果 CHC患者血清和外泌体LncRNA HEIH水平分别为(2.3±0.2)和(3.6±0.6),均显著低于HCC患者【分别为(13.4±2.5)和(8.6±1.5),P<0.05】;53例肝组织炎症G0～G1患者血清和外泌体LncRNA HEIH水平分别为(2.5±0.3)和(3.9±0.6),显著高于24例肝组织炎症>G2者【分别为(1.9±0.4)和(2.9±0.5),P<0.05】,62例肝纤维化S0～S1患者血清和外泌体LncRNA HEIH水平分别为(2.6±0.4)和(4.1±0.7),均显著高于15例肝纤维化>S2者【分别为(1.6±0.4)和(2.5±0.5),P<0.05】;59例对抗病毒治疗应答组血清和外泌体LncRNA HEIH水平分别为(2.8±0.4)和(4.1±0.6),均显著高于18例不应答组【分别为(2.1±0.5)和(3.4±0.6),P<0.05】;CHC患者血清和外泌体LncRNA HEIH水平预测肝组织显著炎症或纤维化的AUC分别为0.764～0.778和0.723～0.736之间,具有一定的临床意义。结论 CHC患者血清和外泌体LncRNA HEIH水平异常,监测它们的变化可能对预测肝组织炎症分级和肝纤维化分期有帮助。     

Therapeutic applications of exosomes from adipose-derived stem cells in antifibrosis

Fibrosis is a condition in which connective tissue replaces normal parenchymal tissue, resulting in significant tissue remodeling. Fibrosis can affect several organs and pose a serious threat to human health and life. Adipose-derived stem cells (ASCs) have been suggested as promising candidates for antifibrotic therapies. Paracrine secretion is one of the key processes in stem cell therapy due to its critical function in cellular communication. ASC-derived exosomes (ASC-exos) are used as tools for restoring and regenerating damaged tissue, and they are now thought to orchestrate antifibrosis-related events. In this review, we summarize the recent findings and present an extensive view of the therapeutic applications of ASC-exos in fibrotic diseases.