“杜仲-当归”介导Wnt/β-catenin信号转导调控MMP-13表达防治关节炎的作用机制研究

目的 研究“杜仲-当归”介导Wnt/β-catenin信号转导调控MMP13表达防治骨性关节炎（osteoarthritis,OA）的作用机制。方法 取SD大鼠,随机分为Sham组、OA组、OA+补肾组（杜仲40 mg·kg^-1）、OA+活血组（当归40 mg·kg^-1）、OA+补肾活血组（杜仲-当归药液40 mg·kg^-1）、OA+阳性药物组（西乐葆10 mg·kg^-1+奥泰灵1.2 mg·kg^-1）共6组。OA模型制备成功后,各组大鼠给予对应药物治疗,连续给药8周。番红O染色检测软骨组织变化,免疫组织化学检测软骨组织中MMP-13表达,ELISA检测大鼠血清IL-6、IL-8含量,Western blotting检测软骨组织中MMP-3、MMP-9、MMP-13、β-catenin蛋白表达。分离正常SD大鼠软骨细胞,IL-1β（10 ng·mL^-1）干预诱导体外OA炎症模型并进行药物干预。番红O染色检测软骨细胞表型变化,ELISA检测软骨细胞IL-6、IL-8含量,免疫荧光染色检测软骨细胞β-catenin表达,qRT-PCR检测软骨细胞中IL-6、IL-8、MMP-3、MMP-9和MMP-13的mRNA表达,Western blotting检测软骨细胞中MMP-3、MMP-9、MMP-13、β-catenin蛋白表达。结果 药物处理对OA导致的软骨组织损伤有不同程度的修复作用;杜仲-当归可下调血清中IL-6、IL-8水平,下调软骨组织中MMP-3、MMP-9、MMP-13、b-catenin的蛋白表达。与IL-1b组相比,杜仲-当归可提高软骨细胞存活率,改善细胞形态,下调软骨细胞IL-6、IL-8水平,降低软骨细胞中b-catenin荧光强度,并下调软骨细胞中IL-6、IL-8、MMP-3、MMP-9、MMP-13的mRNA表达和MMP-3、MMP-9、MMP-13、b-catenin的蛋白表达。结论 体内、体外试验表明补肾活血中药“杜仲-当归”可以通过促进软骨细胞增殖、调控炎症因子水平、改善软骨基质降解、改善软骨病理损伤起到对OA的防治作用,且作用机制可能与介导Wnt/β-catenin信号转导调控MMP-13表达有关。     

杜仲中活性成分的分布及其累积动态变化规律的研究

目的 研究产地、生长季节及采后处理方式对杜仲皮、叶中5种主要生物活性成分含量的影响。方法 利用HPLC法测定杜仲皮、叶中5种主要生物活性成分的含量。结果 不同产地的杜仲皮、叶其生物活性成分含量相差悬殊，且同一产地的杜仲皮、叶中各种主要生物活性成分的含量没有一定相关性，并不随其他成分含量的增加而增加。杜仲中生物活性成分含量随季节变化而变化，杜仲皮、叶的最佳采收季节分别为4，5和7月，且采收后的杜仲皮、叶应及时处理使酶失活，避免自然干燥过程中胞内酶分解活性成分。此外，杜仲皮和叶中生物活性的含量差异很大，但有一定的互补性。结论 产地、生长季节及采后处理方式对杜仲皮、叶中5种主要生物活性成分含量的影响很大，且不能简单的以叶代皮。     

Mebendazole and insulin secretion from isolated rat islets

In a preliminary communication we reported that mebendazole, a vermicide, decreased plasma glucose and free fatty acid concentrations and increased plasma C peptide concentrations in both type II diabetic patients. Therefore, we suggested that mebendazole was an insulin secretagogue. However, these were uncontrolled studies, and improved metabolic control in these patients due to spontaneous remission rather than drug-induced insulin secretion was a possibility. To investigate the direct effect of mebendazole on insulin secretion we used intact islets isolated from normal rat pancreata. Mebendazole in concentrations as low as 10 to 20 mumol/L caused a twofold to threefold increase in acute-phase insulin release from isolated perifused rat islets. This heightened insulin release occurred in the presence of glucose-stimulated insulin secretion.     

杜仲提取物对运动后小鼠血清尿素氮、肝糖原和血乳酸含量的影响

目的:研究杜仲醇提水溶部位(DT)对小鼠运动及运动后代谢变化的影响。方法:对小鼠负重游泳时间、运动后血清尿素氮、肝糖原、血乳酸含量进行测定。结果:杜仲醇提水溶部位不影响小鼠正常体重。延长负重游泳时间、降低运动后血清尿素氮含量,增加肝糖原含量,降低血乳酸含量。结论:杜仲醇提水溶部位具有抗疲劳作用。     

中药杜仲抗HIV作用的实验研究

目的 观察中药杜仲及其单体化合物抗HIV作用,为寻找新的有效治疗艾滋病药物提供实验依据。方法 用植物化学的方法从中药杜仲中提取单体化合物;以HIV病毒感染的MT4细胞为实验模型,以病毒引起合胞体的产生为评价指标,观察药物的作用。结果 从中药杜仲中获得6个单体化合物,其中氯原酸、咖啡酸、表儿茶素、儿茶素等4个单体化合物可有效保护病毒感染的细胞,使其不产生病变。咖啡酸和儿茶素的效果尤为显著,IC50值均为50μg.mL^-1。结论 杜仲提取物及其单体化合物具有抗HIV作用,儿茶素作用为新的发现。     

正交试验优选杜仲中绿原酸的提取工艺

目的对杜仲中绿原酸的提取方法进行优选,确定最佳提取工艺。方法采用正交试验表L8(2)7安排试验。结果提取溶剂对杜仲绿原酸百分含量影响最大。结论确定杜仲中绿原酸的最佳提取工艺,即加20%甲醇超声提取,提取次数为2次,每次1 h。     

杜仲带腋芽茎段组织培养的研究

目的研究不同培养条件下杜仲带腋芽茎段愈伤组织的诱导和生长情况,以及腋芽的生长情况。方法以带腋芽的杜仲茎段为外植体,设计9种不同的培养基配方,为了防止褐化,在23.4℃下培养箱中暗培养,30 d后调查出愈率及腋芽的生长情况。结果 NAA浓度从0.05~0.5 mg.L-1,随着浓度增加,腋芽生长受抑制;6-BA浓度从0.3~1.0 mg.L-1,随着浓度增加,愈伤组织块增大,达到1.0 mg.L-1时愈伤组织的生长受到抑制;本实验中最佳的杜仲愈伤组织诱导和生长培养基配方为6号培养基:B5+0.5 mg.L-1NAA+0.3 mg.L-16-BA。腋芽生长最佳培养基配方为4号培养基:B5+0.05 mg.L-1NAA+0.5 mg.L-16-BA。结论本试验的结果对杜仲的生物技术利用有一定的参考价值。