Does supplemental photodynamic therapy optimize the disinfection of bacteria and endotoxins in one-visit and two-visit root canal therapy? A randomized clinical trial

AimTo evaluate the effectiveness of supplemental photodynamic therapy (PDT) in optimizing the removal of bacteria and endotoxins from primarily infected root canals after one-visit and two-visit treatments.MethodologyTwenty-four primarily infected root canals with apical periodontitis were selected and randomly divided into one-visit (n = 12) and two-visit treatment groups (n = 12). Chemo-mechanical preparation (CMP) was performed by using the single-file reciprocating technique + 2.5% NaOCL and a final rinse with 17% EDTA. The photosensitizer agent (methylene blue 0.1 mg/mL) was applied to root canals for 60 s before application of laser with a potency of 60 mW and energy density of 129 J/cm² for 120 s after CMP in the one-visit treatment and after 14-day inter-appointment medication with Ca(OH)₂ + Saline solution (SSL) in the two-visit treatment. Samples were collected before and after root canal procedures. Endotoxins were quantified by chromogenic limulus amebocyte lysate assay. Culture techniques were used to determine bacterial colony-forming unit counts.ResultsBacteria and endotoxins were detected in 100% of the initial samples, with median values of 1.97 × 10⁵ CFU/mL and 24.983 EU/mL, respectively. The CMP using single-file reciprocating technique was effective in the reduction of bacteria and endotoxins (All, p < 0.05). The supplemental PDT was effective in reducing bacterial load in the one-visit (p < 0.05) but not in the two-visit treatment after use of Ca(OH)₂ medication for 14 days (p > 0.05). In the two-visit group, after 14 days of inter-appointment medication with Ca(OH)₂, a significant reduction in the median levels of endotoxins was found in comparison to CMP alone (from 1.041 to 0.094 EU/mL) (p < 0.05). Despite the type of treatment, the supplemental PDT was not effective against endotoxins (p > 0.05).ConclusionsThe photodynamic therapy optimized the disinfection of bacteria from root canals in one-visit but not for two visit treatment modality with the accomplishment of calcium hydroxide medication. Despite the type of treatment, the supplemental PDT was not effective against endotoxins.     

缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤中内毒素血症的影响

目的 探讨肠源性内毒素在肝脏缺血再灌注损伤中的作用以及缺血预处理对肠源性内毒素的影响。方法 将３０只ＷＥｉｓｔａｒ大鼠随机分成３组（每组１０只）,缺血再灌注组（ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ,Ｉ／Ｒ）,缺血预处理组（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ,ＩＰＣ）和正常对照组。用自动生化仪测定各组丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ０和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）;用鲎试剂法测定血浆内毒素;用免疫组织     

胆汁转流性外引流术对恶性梗阻性黄疸血内毒素水平的影响

目的 :探讨外引流术体外转流胆汁对恶性梗阻性黄疸病人血内毒素水平的影响。方法 :对 14例肿瘤手术不能切除的恶性梗阻性黄疸病人行胆汁转流性外引流术 ,与同期施行的 15例内引流术、2 0例外引流术病人进行手术前后外周血内毒素水平比较。结果 :术前 3组内毒素水平差别无显著性意义 (P>0 .0 5 )。单纯外引流组手术后内毒素水平略高于术前 (P >0 .0 5 ) ;内引流组术后第 2天内毒素水平反而高于术前 (P <0 .0 5 ) ,第 7天、第 14天显著降低 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ;体外转流组术后内毒素水平逐渐降低 ,与内引流术组变化基本相同。结论 :胆汁转流性外引流术可降低恶性梗阻性黄疸病人外周血内毒素水平。     

异丙酚对内毒素诱导大鼠急性肺损伤的保护作用

目的 探讨不同剂量异丙酚对内毒素(LPS)诱导大鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用。方法 股静脉注射内毒素(LPS)5mg/kg,建立大鼠ALI模型。24只健康雄性Wistar大鼠随机分为四组:对照组(C组,输注生理盐水),LPS对照组(L组,股静脉注射LPS后输注生理盐水),低剂量异丙酚治疗组(Lp1组,股静脉注射LPS后立即输注异丙酚5mg/kg,随后5mg·kg~(-1)·h~(-1)维持),高剂量异丙酚治疗组(Lp2组,股静脉注射LPS后立即输注异丙酚10mg/kg,随后10mg·kg~(-1)·h~(-1)维持),每组6只。于注射LPS后1、2、3、4h抽血并于4h时处死大鼠,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)水平;测肺湿/干重比;并观察BALF中性粒细胞计数比、蛋白浓度。结果 L组大鼠肺湿/干重、BALF中性粒细胞计数比及蛋白浓度均明显增加(P<0.05),血清及BALF中TNF-α、IL-1β、IL-10水平显著性升高(P<0.01),而异丙酚治疗组的各项指标均较内毒素组减轻,大剂量作用更明显(P<0.01)。结论 异丙酚对内毒素诱导的大鼠急性肺损伤有保护作用,大剂量作用较明显。     

内毒素诱导急性肺损伤小鼠基因表达的综合分析

目的利用改良的基因表达综合分析(SAGE)技术监测内毒素诱发小鼠急性肺损伤的基因表达状况，探讨急性肺损伤的分子机制。方法气管内注射内毒素(25mg／kg)复制急性肺损伤模型。正常对照小鼠气管内注射等体积等渗盐水。内毒素注射24h后以氯胺酮深度麻醉后处死小鼠，整块取出肺脏用于SAGE研究。建立正常和急性肺损伤两个SAGE标记物文库。结果正常文库包括24670个SAGE标记物，代表12168个基因。急性肺损伤文库包括26378个SAGE标记物，代表13：397个基因。急性肺损伤组有11种基因升高10倍以上，107种基因升高5～10倍，2121种基因升高2—5倍。7种基因表达降低大于10倍，87种基因降低5～10倍，1571种基因降低2～5倍。结论证实了内毒素诱导的急性肺损伤发生机制中各种基因表达的变化，并发现了以往没有报道的基因。对这些基因功能的进一步研究有助于阐明急性肺损伤的发生机制，并为临床诊断提供有参考价值的血清标记物。     

内毒素对大鼠淋巴细胞表达TLR4及NF-κB与分泌IL-6的影响

目的研究内毒素干预离体大鼠淋巴细胞后TLR4 mRNA、NF-κB mRNA的表达及IL-6分泌的变化,探讨淋巴细胞在全身炎症反应综合征(SIRS)发生及进展中的作用机制。方法制备健康雄性Wistar大鼠脾脏淋巴细胞,培养至对数期,随机分为对照组和实验组。对照组不做处理。实验组加入不等量内毒素,调整浓度为低浓度组(10 ng/ml)、高浓度组(100 ng/ml),培养3、6、12 h。RT-PCR技术检测TLR4及NF-κB的mRNA表达水平,ELISA技术测定IL-6的分泌量。结果干预3 h后,低浓度组:TLR4及NF-κB的mRNA表达与对照组比较无显著差异(P>0.05),IL-6的分泌与对照相比差异有统计学意义(P<0.05)。高浓度组:TLR4 mRNA的表达及IL-6的分泌与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),NF-κB的mRNA表达与对照组比较无显著差异(P>0.05)。干预6、12 h后,低、高浓度组:TLR4及NF-κB的mRNA表达与IL-6的分泌分别与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。此外,TLR4及NF-κB的mRNA表达水平及IL-6的分泌量随时间延长增加。结论内毒素能刺激大鼠淋巴细胞高表达TLR4、NF-κB及分泌包括IL-6在内的各种细胞因子与炎症介质,促进SIRS的发生及发展。     

脑源性多器官功能障碍综合征模型血清内毒素及其受体基因表达

目的探讨急性前脑缺血致多器官功能障碍综合征(MODS)模型血清内毒素含量及其受体在各脏器基因表达的规律,分析脑原性多器官功能障碍综合征(CMODS)的发生机制。方法随机将54只Wistar大鼠分为正常对照组(6只)、假手术组(8只)和前脑缺血组(40只),后者又被随机分为12h、24h、36h、48h、和72h时相点的5个亚组,每亚组各8只;建立大鼠急性前脑缺血模型;分别采用偶氮显色法鲎试验定量法测定血清内毒素和原位杂交技术测定肺、肝、肠和肾组织CD14mRNA水平;使用CMIA真彩色医学图像分析系统,检测CD14mRNA的相对含量。结果大鼠急性前脑缺血后12h血清内毒素升高(0184±0055)Eu/L,24h达高峰(0639±0064)Eu/L,72h基本恢复至正常水平(0117±0024)Eu/L;肺、肝、肠和肾组织CD14mRNA的表达也在缺血后12h升高,24~36h达高峰,48h后下降,并以肺脏变化最显著(P<0001);正常对照组和假手术组CD14mRNA在各脏器均有不同程度的表达,其中两组肺脏的表达有显著性差异(P<001)。内毒素与其受体在各脏器的表达均存在显著相关性(均为P<001),其中与肠、肺组织CDmRNA表达相关最显著(P<0001)。结论急性前脑缺血致MODS大鼠存在内毒素血症;急性脑血管病→应激反应→肠道黏膜屏障损害→内毒素易位→内毒素血症→内脏器官功能障碍→MODS是CMODS发生的     

白细胞介素-1受体相关激酶-4短发夹RNA阻断库普弗细胞激活效应的实验研究

目的 探讨以白细胞介素-1受体相关激酶-4（IRAK-4）特异性短发夹RNA（shRNA）阻断内毒素诱导的库普弗细胞（KCs）激活效应的可行性。方法 构建两对表达IRAK-4-shRNA的阳性载体质粒（pSfIRAK-4-A，pSfIRAK-4-B）及一对阴性载体质粒（pSⅡRAK-4-C）。分离培养小鼠KCs，分为正常对照组，RNA干扰（RNAi）对照组（转染pSⅡRAK-4-C）与RNAi抑制组（转染pSⅡRAK-4-A，pSⅡRAK-4-B）。质粒转染后24h，加入0．1μg／ml脂多糖（LPS）。6h后，蛋白免疫印迹法及逆转录聚合酶链反应测定IRAK-4蛋白和mRNA表达水平；酶联免疫吸附法检测0、1、3、6、12h后KCs的核因子-κB（NFKB）活性及培养上清液中肿瘤坏死因子α含量。结果 RNAi抑制组IRAK-4表达水平，以及LPS刺激后NFKB活性、肿瘤坏死因子α峰值均明显低于正常对照组和RNAi对照组，t值分别为22．50，4．18及958．49，P〈0．01；尤其是pSⅡRAK-4-A组，抑制效果明显优于pSⅡRAK-4-B，t值分别为12．60，3．36及256．39，P〈0．01。结论 以IRAK-4为靶点的shRNA能有效的阻断内毒素诱导的KCs激活效应。     

人血浆高密度脂蛋白对大鼠内毒素血症的治疗及防护作用研究

目的:观察人血浆高密度脂蛋白(HDL)对大鼠内毒素血症的治疗和防护效果。方法:采用鲎试剂法和放射免疫分析法于3个时点动态测定对照组、治疗组和防护组大鼠血浆内毒素(ET)水平和肿瘤坏死因子(TNF)浓度并观察血压及存活时间。结果:①输注ET后对照组大鼠血压进行性下降(P<0.01);治疗组大鼠输注HDL后其血压虽也降低但下降程度明显弱于对照组(P<0.01);防护组大鼠在输注ET后血压无明显下降(P>0.05)。治疗组及防护组大鼠存活时间均明显长于对照组(P<0.01)。②3组大鼠血浆ET水平在各时点均无明显变化(P>0.05)。③治疗组及防护组大鼠血浆TNFα水平于第3时点均明显降低(P>0.05)。结论:人血浆HDL能减轻或抑制内毒素血症大鼠血压下降并明显延长其存活时间,对内毒素血症具有良好的治疗和防护作用,此作用可能与其抑制TNF释放有关。     

脾切除对大鼠血浆及肝肺组织中内毒素廓清的影响

目的 观察脾切除对血浆中内毒素清除的影响及内毒素在主要脏器的分布特征,探索脾切除后上反应与组织损害的发生机制。方法 雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠１１２只,随机分为有脾组（ｎ＝５６,行大网膜切除术,保留脾脏）、脾切除组（ｎ＝５６,行脾切除术）。术后１周静脉注射内毒素０．１ｍｇ／ｋｇ,分别于注射前、注射后１０ｍｉｎ、０．５、１．５、４、１２、２４ｈ活杀动物,测定血浆和肝、肺组织内毒素水平,同时检测肝、肺脏器功