Effects of endothelin-1 on calcium-independent contraction of bovine trabecular meshwork

BACKGROUND: Endothelin-1 (ET-1) is known to induce contraction of trabecular meshwork (TM) and is probably involved in the pathogenesis of glaucoma. Calcium (Ca(2+))-independent contraction has been shown in TM, and its inhibition may represent an interesting way of influencing outflow facility, and thus intraocular pressure (IOP). This study investigates the role of ET-1 and its receptors ET-A and ET-B (ET-AR and ET-BR) in TM Ca(2+)-independent contractility. METHODS: Isometric tension measurements of bovine TM (BTM) strips were performed using a force-length transducer system. Intra- and extracellular Ca(2+) buffering was achieved by means of EGTA and BAPTA-AM. Under Ca(2+)-free conditions, ET-1-induced contractility of TM was assessed also in the presence of the specific inhibitors for ET-AR and ET-BR, BQ123 and BQ788 respectively. In order to clarify the intracellular mediators of Ca(2+)-independent contractility induced by ET-1, TM contraction was further measured in the presence of Y-27632, a selective inhibitor of Rho-associated kinases (ROCKs). The expression of ROCK1 and of its activating protein RhoA in BTM cells was investigated using western blot analysis. RESULTS: ET-1 induced a significant contraction of native BTM after intra- and extracellular Ca(2+)-depletion (45% +/- 8% of the maximally inducible contraction). Both endothelin receptor inhibitors BQ123 and BQ788 significantly reduced TM Ca(2+)-independent contraction in response to ET-1 (8.4 +/- 3.3% and 20.3 +/- 4.8% respectively). In the presence of the ROCK inhibitor Y-27632, ET-1-induced contraction of TM under Ca(2+)-free conditions was almost completely abolished (4.3% +/- 1.7%, p < 0.001). A clear signal for RhoA at 24 kDa and ROCK1 at 160 kDa could be detected in lysates of native tissue and cultured BTM cells with western blot. CONCLUSIONS: This study shows evidence that a significant portion of ET-1-induced contraction of TM is Ca(2+)-independent. In this contraction pathway, both ET-AR and ET-BR are involved with RhoA and its kinases as intracellular mediators. Ca(2+)-independent contraction of TM in response to ET-1 may represent a specific target to modulate IOP.     

浓百合剂对慢性支气管炎大鼠肺组织中肿瘤坏死因子和内皮素含量的影响

目的探讨浓百合剂对实验性慢性支气管炎治疗作用的内在机制。方法采用改良烟熏法复制大鼠慢性支气管炎模型,实验分组为模型组,浓百合剂高剂量组、中剂量组、低剂量组、地塞米松组,并设不加处理的正常组。造模各组以高、中、低剂量浓百合剂、地塞米松、生理盐水进行干预,测定各组大鼠肺组织中肿瘤坏死因子(TNF)和内皮素(ET)的含量。结果模型组大鼠肺组织中TNF和ET的含量均较正常组明显升高(P<0.01)。与模型组相比较,治疗各组肺组织中TNF和ET含量均明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论TNF和ET在慢性支气管炎的病理生理过程中起着重要作用,浓百合剂通过降低TNF和ET含量,控制炎症反应。     

内皮素-1对人肺腺癌SPC-A1细胞内游离钙离子的影响及机制

背景与目的 既往的研究发现内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)与肺腺癌细胞生长关系密切,其促肺腺癌细胞生长作用可能与细胞内游离钙离子增加有关.本研究探讨ET-1对人肺腺癌SPC-A1细胞内游离钙离子(Intracellular free calcium,[Ca2 ]i)的影响及其机制.方法采用Fura-2/AM荧光技术测[Ca2 ]i浓度,检测ET-1对SPC-A1细胞[Ca2 ]i的影响.应用钙离子通道阻滞剂、内皮素受体(Endothelin Receptor,ETR)拮抗剂及其细胞内信号传导通路阻滞剂,研究ET-1对SPC-A1细胞[Ca2 ]i影响的细胞学机制.结果 ET-1(1×10-15-1×10-8)mol/L呈浓度依赖性地促进SPC-A1细胞[Ca2 ]i升高,ETAR特异性拮抗剂BQ123(1×10-7mol/L)可完全抑制ET-1(1×10-10 mol/L)的促[Ca2 ]i升高作用(P<0.05),而ETBR特异性拮抗剂BQ788(1×10-7mol/L)无此作用(P>0.05);细胞外无钙离子或用Nifedipine(1×10-6mol/L)阻断钙离子内流后ET-1(1×10-10 mol/L)促[Ca2 ]i升高作用明显减弱(P<0.05);Ryanodine(50×10-6mol/L)抑制细胞内钙离子释放后ET-1(1×10-10 mol/L)促[Ca2 ]i升高作用减弱(P<0.05);磷脂酶C抑制剂U73122(1×10-5 mol/L)可以抑制ET-1(1×10-10mol/L)促[Ca2 ]i升高作用(P<0.05);U73122的无活性同分异构体U73433不能抑制ET-1促[Ca2 ]i升高作用(P>0.05);蛋白激酶C抑制剂Staurosporine(2×10-9mol/L)对ET-1(1×10-10mol/L)促[Ca2 ]i的作用无明显影响(P>0.05).结论 ET-1能够促进SPCA-1细胞[Ca2 ]i升高,其途径主要是通过L-型钙离子通道开放使细胞外钙离子内流,内流钙离子促发细胞内钙离子释放.同时ET-1激活细胞内磷脂酶C诱发的钙离子释放也是ET-1促进[Ca2 ],升高的机制之一.     

三七皂苷对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞保护作用的研究

目的:研究三七皂苷(PNS)对氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)损伤血管内皮细胞的保护作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),加入100mg·L-1Ox-LDL造成细胞损伤,同时加入不同浓度PNS进行干预。观察形态学变化;采用MTT法测定细胞活性;比色法检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的释放量;硝酸还原法和放射免疫法分别测定HUVEC培养上清液中一氧化氮(NO)、内皮素(ET)含量。结果:各剂量PNS可使作用Ox-LDL的HUVEC形态趋于正常。与正常对照组比较,HU-VEC经Ox-LDL作用后,细胞活性显著下降,LDH的释放量显著升高;300、100、30mg·L-1PNS显著升高细胞活性,抑制LDH释放。HUVEC经Ox-LDL作用后,与正常对照组比较,培养上清液中NO含量显著降低,ET含量显著升高;300、100mg·L-1PNS显著升高NO含量,300mg·L-1PNS显著降低ET含量。结论:PNS对Ox-LDL损伤的血管内皮细胞具有一定的保护作用,可调节内皮细胞活性物质NO、ET的分泌。     

坎地沙坦治疗充血性心力衰竭的疗效及对内皮素和心钠素水平的影响

目的研究一种新型血管紧张素II（AngII）受体拈抗剂（ARB）-坎地沙坦治疗充血性心力衰竭（CHF）的疗效以及对血浆内皮素（ET）和心钠素（ANY）水平的影响。方法50例CHF患者随机分为两组，对照组（n=25）用利尿剂和洋地黄治疗，坎地沙坦治疗组（n=25）在前者基础上加用坎地沙坦酯胶囊（4～8mg／d）治疗8周，观察治疗前后NYHA分级、血浆ET和ANP浓度的变化。结果经8周治疗后，坎地沙坦治疗组NYHA分级明显下降（P〈0．01），并使血浆ET和ANP的水平明显降低（P〈0．01），临床有效率优于对照组，但差异无显著性（P〉0．05）。结论在常规治疗的基础上加用坎地沙坦可以更好地改善CHF患者的心功能，坎地沙坦能明显降低血浆ET和ANP的水平，这可能是ARB治疗CHF的机制之一。     

纳洛酮对急性脑梗死内皮素和氧化亚氮的影响

目的观察纳洛酮对急性脑梗死患者血浆内皮素(Endothelin,ET)和氧化亚氮(Nitrous Oxide,NO)水平的影响。方法随机将78例急性脑梗死分为两组,对照组38例予以常规抗脑梗死治疗,治疗组40例加用纳洛酮。动态检测治疗前后血浆ET和NO水平。结果治疗组1例(2.5%)死亡,对照组4例(10.5%)死亡,两组死亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。和治疗前比较,两组ET和NO治疗后同步进行性下降(P<0.05)。治疗组血浆ET和NO下降与纳洛酮早期干预正相关(P=0.78)。结论纳洛酮能缓解ET和NO在急性脑梗死时的血管作用,ET和NO水平可判断预后和判定治疗脑梗死疗效的指标。     

阿魏酸钠对慢性肾功能衰竭患者血浆、尿内皮素（ET）的影响

目的：研究内皮素受体拮抗剂阿魏酸钠对慢性肾功能衰竭患者血浆、尿内皮素（ET）以及肾功能的影响。方法：应用常规治疗加注射阿魏酸钠治疗慢性肾衰竭患者，观察治疗前后血浆、尿ET-1及血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）改变，并与常规治疗组、健康对照组相比较。结果：常规治疗组与常规治疗加阿魏酸钠治疗组治疗前血浆、尿内皮素ET-1水平明显高于健康对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），常规治疗组与常规治疗加阿魏酸钠治疗组治疗前血浆、尿内皮素ET-1水平差异无统计学意义（P〉0．05）。常规治疗加阿魏酸钠治疗后，其血浆、尿ET-1及Scr、BUN均显著下降，与治疗前相比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。常规治疗组治疗后，其血浆、尿内皮素（ET）及血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）与治疗前相比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：阿魏酸钠能够降低慢性肾功能衰竭患者血浆、尿ET水平，改善肾功能，延缓慢性肾衰竭进展。     

C反应蛋白和原发性高血压血管内皮损伤标志物的研究进展

炎症在原发性高血压血管内皮损伤的病理过程中发挥重要作用。C反应蛋白由肝脏产生并分泌,是评价炎性反应的一项敏感指标。C反应蛋白在血液循环中的含量和活性与原发性高血压患者某些血管内皮损伤标志物的浓度存在正相关,成为原发性高血压治疗的新靶点。     

β-hCG、Uric Acid和ET含量与妊高征疾病程度的关系

目的评价妊高征患者血中β绒毛膜促性腺激素、尿酸和内皮素的水平及其关系。探讨B—hCG、Uric Acid和ET在妊高征发病中的作用。方法按标准将70例妊高征分为：轻度35例，重、中度35例。另选正常中晚期妊娠妇女30例；β—hCG测定采用化学发光法；尿酸测定采用生化分析法；ET采用放射免疫测定法。结果重、中度妊高征组ET、β-hCG和Uric Acid含量均高于正常中晚期妊娠组（P均〈0．05～0．01）；轻度妊高征组血浆ET和β-hCG水平与正常中晚期妊娠组无显著性差异（P〉0．05）；Uric Acid水平高于正常中晚期妊娠组（P〈0．05）；重、中度妊高征组ET、β-hCG和Uric Acid水平均高于轻度妊高征组（P〈0．05）；重、中度妊高征组血中ET、β—hCG和Uric Acid呈正相关（r=0．5713，r=0．5688，r=0．5849，P均〈0．05）；而轻度妊高征组和正常晚期妊娠组血中ET和β—hCG变化无显著性相关（P〉0．05）。血清尿酸水平与血压仅有较弱的相关性（r=0．2313）。结论重、中度妊高征血管内皮细胞损伤可能与胎盘滋养细胞功能失调相关。尿酸水平可以作为判断高血压孕妇是否合并妊高征的监测方法之一。