刺五加提取液对慢性疲劳模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的调节作用

目的：观察刺五加提取液对慢性疲劳（chronic fatigue,CF）大鼠的行为和下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴的影响,探讨其抗疲劳机制。方法：30只大鼠随机分为5组：对照组,CF组,刺五加提取液50、100、200 mg/kg组。除对照组6只大鼠外,其余24只大鼠用跑台训练法建立CF模型。各组大鼠分别灌胃给予生理盐水,生理盐水,刺五加提取液50、100、200 mg/kg,每天给药1次,共21 d。测定各组大鼠给药后力竭时间;放射免疫分析法（RIA）检测促肾上腺皮质激素释放素（CRH）、促肾上腺皮质激素（ACTH）和皮质酮的血浓度,实时（real-time）PCR法检测下丘脑促皮质素释放激素受体1（CRHR1）mRNA表达。结果：刺五加提取液100、200 mg/kg大鼠跑台致力竭时间比CF组明显延长（P＜0.01）。CF模型大鼠CRH、ACTH和皮质酮的血浓度显著升高（P＜0.01）,下丘脑CRHR1 mRNA表达上调（P＜0.01）。刺五加提取液50、100、200 mg/kg可部分逆转由CF引起的CRH、ACTH及皮质酮血清浓度升高（P＜0.05,P＜0.01）和CRHR1 mRNA表达的上调（P＜0.05,P＜0.01）。结论：刺五加提取液的抗疲劳作用可能与抑制HPA轴功能亢进,改善CRHR1偶联的信号通路有关。     

均匀设计法优化刺五加中总黄酮的提取工艺

目的：优化刺五加中总黄酮的提取工艺。方法：采用均匀设计方法,通过紫外分光光度法测定了刺五加中的总黄酮的含量。结果：以50%的乙醇浓度、20倍量、提取3次、每次30分钟为最佳提取工艺。结论：试验结果可为刺五加中的总黄酮的提取工艺的确定提供科学依据。     

刺五加制剂对老年人恒定负荷下运动耐力的影响

以１３名５０～５７岁志愿者为试验对象，研究了刺五加制剂对人体运动能力的影响。结果表明服用刺五加制剂后，在４５０ｋｇ．ｍ／ｍｉｎ（７５Ｗ）持速恒定功率负荷运动时呼吸商由０．９６下降至０．８８，使运动时脂肪供能增加２７．２％；心率下降８．７％，每博摄氧量增加１６．１８％。结果均提示刺五加制剂能提高人体摄氧能力，节省肌糖元，从而发挥抗疲劳作用     

刺五加叶中金丝桃苷的薄层鉴别和含量测定

目的：以金丝桃苷为指标成分,建立刺五加叶的薄层定性和含量测定的方法。方法：采用薄层色谱法对刺五加叶中金丝桃苷进行定性鉴别,并用高效液相色谱法进行含量测定,色谱柱：Kromasil 100-5C18色谱柱（4.6mm×250mm）;流动相：甲醇-0.1％冰醋酸水溶液(35：65);流速：0.8mL/min;检测波长：360nm;柱温：30℃;进样量：10μL。结果：刺五加叶金丝桃苷的薄层鉴别特征明显,金丝桃苷在0.13～0.78μg范围内具有良好线性关系,r=0.9994,平均回收率为98.17％,RSD为1.02％（n=5）。结论：此方法简便、快速、准确,可用于刺五加叶的质量控制。     

刺五加总皂苷对麻醉犬急性心肌梗死的保护作用

目的：研究刺五加总皂苷对犬急性心肌梗死的保护作用。方法：30条犬麻醉后结扎冠状动脉前降支造成急性心肌梗死模型，随机分为5组：生理盐水组、丹参注射液组（0．6mL／kg）、刺五加总皂苷高、中、低剂量组（30、15、7．5mg／kg），记录心外膜电图，检测血清乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸磷酸激酶（CPK）活性，计算心肌梗死面积（MIS）。结果：刺五加总皂苷可明显降低实验性心肌梗死犬的ST段升高总毫伏数（∑ST）及ST段升高超过2mV总点数（N—ST），缩小MIS，可降低犬心肌梗死后引起的血清LDH、CPK活性升高。结论：刺五加总皂苷对犬急性心肌缺血有较好的保护作用。     

Prophylactic and Therapeutic Effects of Acanthopanax senticosus Harms Extract on Murine Collagen‐induced Arthritis

Evidences are accumulating that extract of Acanthopanax senticosus Harms (ASH; syn Eleutherococcus senticosus [Rupr. & Maxim.] Maxim), a shrub native to Northeastern Asia, has antiinflammatory effects. In this study, we examined prophylactic and therapeutic effects of ASH extract (ASHE) on rheumatoid arthritis using collagen‐induced arthritis (CIA) mouse model. Acanthopanax senticosus Harms extract was administered before the onset of arthritis in the prophylaxis model. In the therapeutic model, ASHE was administered after the onset of arthritis with or without anti‐TNF‐α antibody. The ASHE treatment showed efficacy before onset of CIA but there was no effect after CIA was established. The ASHE treatment delayed the onset and decreased severity of CIA. In vitro examinations showed that ASHE is an antioxidant and that ASHE suppresses TNF‐α and interleukin‐6 production in human peripheral blood mononuclear cells. The combination therapy with ASHE and anti‐TNF‐α antibody reduced the severity of arthritis compared with anti‐TNF‐α antibody alone. The present study shows that ASHE has prophylactic effect against CIA and support therapeutic effect of anti‐TNF‐α antibody. © 2014 The Authors. Phytotherapy Research published by John Wiley & Sons Ltd.     

刺五加GPS基因克隆及表达特征与皂苷含量相关性研究

目的克隆刺五加香叶基焦磷酸合成酶(geranyl pyrophosphate synthase,GPS)基因的cDNA序列并分析基因序列特征、不同器官中基因表达水平及其与皂苷含量的相关性。方法提取刺五加的RNA,逆转录为cDNA。根据转录组测序结果中编码GPS的unigene(c37362.graph_c0),设计特异性引物,经过PCR扩增GPS基因的cDNA全长。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析GPS基因在不同器官中的表达水平,并通过分光光度法检测刺五加总皂苷含量。结果克隆得到长1260bp、编码419个氨基酸的刺五加GPS基因cDNA。GPS蛋白定位于线粒体内且不存在跨膜区域。GPS基因在各个器官中均有表达,在叶片中的表达量最高,是根中表达量的5.26倍。GPS基因的相对表达量与皂苷量呈现出同升同降的变化趋势,表现为显著正相关关系(r=0.851,P0.05)。结论首次克隆获得刺五加GPS基因的cDNA全长序列,明确了刺五加GPS基因的表达量与皂苷含量之间存在正相关关系。     

刺五加总黄酮对小鼠红细胞膜流动性的影响

目的 观察刺五加提取物中总黄酮的含量及其对红细胞膜流动性的影响。方法 采用分光光度法测定刺五加总黄酮的含量，采用荧光偏振法测定红细胞膜流动性和微粘度。结果 刺五加提取物与刺五加注射液的总黄酮含量相近，两组溶液均可增加红细胞膜流动性，降低微粘度，其中刺五加注射液的作用更为显著。结论 刺五加总黄酮可以增加红细胞膜流动性，从而降低血液粘度，改善血液流变学指标。     

刺五加Actin基因cDNA全长序列的克隆与生物信息学分析

目的：克隆刺五加Aetin基因的全长cDNA序列,并对其进行生物信息学分析。方法i以刺五加的叶片为材料,提取总RNA,逆转录为cDNA,根据初步克隆到的刺五加Actin基因保守序列设计引物,利用套式PCR进行3’和5＇RACE扩增,得到Aetin基因的3’和5’端cDNA序列片段,拼接获得cDNA全长。将该序列进行BLAST比对、相似度分析,并对刺五加Aetinl蛋白的二级结构和三级结构进行预测。结果：刺五加的Aetin基因全长1507bp,命名为ESActinl,注册号KC469585。该基因开放阅读框（ORF）长1134bp,编码377个氨基酸,5’端非编码区长140bp,3’端非编码区长233bp。ESAetin1与GenBank中注册的其它植物肌动蛋白核苷酸序列的相似性在75％以上,蛋白质序列的相似性在94％以上。结论：首次报道了刺五加Actin基因的全长cDNA序列,为刺五加的分子生物学研究奠定基础。     

机械化学法辅助提取刺五加总黄酮的工艺研究

目的研究机械化学法辅助提取刺五加总黄酮的最佳工艺。方法以总黄酮提取率为考察指标,通过单因素及正交实验考察机械化学法辅助提取刺五加总黄酮的主要影响因素,确定最佳工艺条件;采用分光光度法测定总黄酮含量。结果最佳工艺条件为:Na2CO3/Na2B4O7助剂用量4%(W/W),物料粒度D95≤37μm,乙醇浓度为20%(V/V),料液比为1∶60(g∶ml)。该工艺条件下,总黄酮提取率比热回流法提高13.2%。结论机械化学法辅助提取具有提取率高,时间短,无需加热,乙醇用量少等特点,是提取刺五加总黄酮的一种有效方法。