松果菊苷固体脂质纳米粒的表征及体外细胞摄取评价

[目的]对本实验室前期处方优化的松果菊苷固体脂质纳米粒(ECH-SLN)的物理性质和体外细胞摄取情况进行评价,为今后眼部制剂的改进奠定基础。[方法]根据本实验室前期优化的处方,采用乳化-固化法制备ECHSLN,运用差示扫描量热法(DSC)及X射线衍射法(XRD)表征其物理性质,并选取人角膜上皮HCEpiC细胞与人晶状体上皮SRA 01/04细胞,对罗丹明123固体脂质纳米粒(Rhodamine 123-SLN,Rh 123-SLN)进行体外细胞毒性评价及细胞摄取研究。[结果] DSC结果显示仅松果菊苷和物理混合物(空白SLN∶松果菊苷=5∶1)在150℃出现松果菊苷的熔化吸热特征峰,空白SLN、ECH-SLN和物理混合物在110℃和230℃均出现SLN的两个熔化吸热特征峰;XRD结果显示松果菊苷和物理混合物在20°时出现明显的松果菊苷特征峰,空白SLN,ECH-SLN和物理混合物在20°～25°范围均显示SLN的范围特征峰;结果均表明松果菊苷作为药物以分子分散状态被包裹在固体脂质纳米粒(SLN)中;细胞活力影响实验结果显示Rh 123-SLN浓度为5.13μg/mL和10.25μg/mL时对两种细胞均无明显毒性,与对照组相比无显著性差异;细胞摄取实验结果表明Rh 123溶液不能被细胞所摄取,而Rh 123-SLN的细胞摄取量与药物浓度和孵育时间呈正相关。[结论] ECH-SLN能够将松果菊苷递送到眼细胞,这可能为氧化性白内障的治疗提供一种有效的药物递送系统。     

The influence and mechanism of ligustilide,senkyunolide I,and senkyunolide A on echinacoside transport through MDCK‐MDR1 cells as blood–brain barrier in vitro model

Efficient transcytosis across the blood–brain‐barrier is an important strategy for accessing drug targets within the central nervous system. Ligusticum chuanxiong Hort. was used as a messenger drug to increase the distribution of drugs in brain tissue in Traditional Chinese Medicine. The present study investigates the transport of echinacoside (ECH) through MDCK‐MDR1 cell and the effects of ligustilide (LIG), senkyunolide A (SENA) and senkyunolide I (SENI) in chuanxiong on its transport. The results indicated that the absorption of ECH was relatively poor in MDCK‐MDR1cells, and was concentration dependent and not saturable. The P‐glycoprotein inhibitor verapamil could significantly increase the transport of ECH. It indicated that the transport mechanism might be passive diffusion as the dominating process with the active transportation mediated mechanism involved. The increased apparent permeability of ECH in A → B direction by ethylenediaminetetraacetic acid‐Na₂ suggested that ECH was absorbed via the paracellular route. The transport of ECH in A → B direction significantly increased when co‐administrated with increasing concentrations of LIG, SENI and SENA. Western blot analysis and a decrease in transepithelial electrical resistance during the permeation experiment indicated that LIG, SENI and SENA had enhanced the transport of ECH in the BBB models attribute to down‐regulate the expressions of claudin‐5 and zonula occludens‐1 expression.     

内蒙古盐生肉苁蓉中松果菊苷和麦角甾苷的含量测定

目的:采用高效液相色谱法,测定盐生肉苁蓉中有效成分松果菊苷和麦角甾苷的含量。方法:Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6mm×250mm)。流动相:乙腈-甲醇-1%醋酸溶液(9:14:77)。流速:1.0mL/min,柱温为室温,检测波长334nm。结果:松果菊苷在0.0258mg-0.774mg呈良好的线性关系,回归方程为Y=2141.5X-35.72,r=0.9999;麦角甾苷在0.030mg-0.750mg呈良好的线性关系,回归方程为Y=4065.6X+159.35,r=0.9999。松果菊苷、麦角甾苷平均加样回收率分别为102.2%、103.9%。结论:本法测定简便、快速、灵敏、重复性好,方法可行。     

HPLC法测定藤黄健骨丸中松果菊苷的含量

目的：建立藤黄健骨丸中松果菊苷含量的HPLC测定方法。方法：色谱柱：DiamonsilC18（250mm×4．6mm,5μm）,流动相：甲醇旬．1％甲酸（28．5：71．5）,流速：1．0ml·min^-1,柱温：25℃,检测波长：330nm。结果：松果菊苷线性范围为0．18—1．84μg,r=0．9999,平均回收率为98．36％,RSD为0．56％（n=6）。结论：本法操作简便,结果准确。     

松果菊苷对脑缺血大鼠纹状体细胞外液中去甲肾上腺素含量的影响

目的通过高效液相-电化学检测器(HPLC-ECD)检测大鼠纹状体细胞外液中去甲肾上腺素(NE)神经递质的变化,探讨松果菊苷(ECH)对脑神经保护作用的可能机制。方法 40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、ECH高、低剂量组和川芎嗪组(CXQ)。各组大鼠给予相应的药物或生理盐水腹腔注射,1次/d,连续7 d,末次给药1 h后,制作大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),造模后立刻进行微透析,HPLC-ECD测定各组纹状体细胞外液中去甲肾上腺素的含量。结果与对照组相比,模型组动物纹状体细胞外液中NE含量先升高,后下降;而ECH高、低剂量组和川芎嗪(CXQ)组可以抑制NE减少,ECH高剂量组、CXQ组与模型组相比具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论实验建立测定脑内NE的方法简便,准确。ECH对增加脑缺血大鼠纹状体细胞外液中的NE含量释放具有较好的作用。     

基于膜分离技术富集纯化肉苁蓉苯乙醇苷的研究

目的探讨膜分离技术提取分离肉苁蓉有效成分的应用价值。方法肉苁蓉80%乙醇提取,以水溶解,经不同截留分子量超滤膜超滤,再经纳滤膜处理,用高效液相色谱法检测毛蕊花糖苷和松果菊苷的含量。结果不同截留分子量超滤膜处理,产品的出膏率和目标成分的含量存在明显差异。结论该方法可显著降低生产成本,清洁安全,方法可行。     

基于松果菊苷的异质性瘢痕修复过程的细胞内信号研究及效果评价

目的 探究松果菊苷在异质性瘢痕修复过程中的细胞内信号及效果。方法 选择120只斯普拉格-道 利大鼠,以随机数字表法分为对照组（n=60）和研究组（n=60）。通过创伤诱导异质性瘢痕生成,对照组 接受安慰剂处理,研究组接受松果菊苷处理。在特定时间点观察伤口愈合速度,并收集组织样本进行组织 学分析,使用分子生物学技术分析炎症标志物、血管生成、基质金属蛋白酶活性和细胞凋亡。结果 研究 组伤口愈合时间为（8.48±1.13）d,短于对照组的（11.35±1.57）d,差异有统计学意义（P＜0.05）;研究 组炎症程度、血管密度及胶原沉积面积均优于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;研究组白细胞浸 润、TNF-α、IL-6表达水平均低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;研究组CD31阳性血管数目、 VEGF表达水平均高于对照组（P＜0.05）。结论 松果菊苷在促进异质性瘢痕修复过程中的作用确切,修 复效果良好,能够有效促进伤口愈合,减轻瘢痕组织的炎症反应并加快血管生长。     

松果菊苷药动/药效研究进展与思考

本文综述了近年来松果菊苷（ECH）在抗衰老、提高记忆力与神经保护、抗肿瘤、保护肝脏及免疫调节等方面的药理作用研究进展,探讨了其可能的作用机制。此外,还对ECH的吸收和代谢等药代动力学最新研究进展进行总结,并将其药效学特征与药代动力学行为进行联系与比较,指出了ECH药效学和药代动力学之间存在的表面矛盾,并就如何解释这些矛盾进行了探讨。在此基础上,提出天然来源的创新药物通常具有系统前广泛代谢的特点,发挥整体药效作用的可能是其活性代谢产物;应针对中药I类新药的这些特点,加强系统前代谢转化研究;并制订科学合理的临床前药物代谢动力学技术指导原则,用以指导具有类似特点的中药I类新药的研究。     

快速制备液相色谱分离紫锥菊中咖啡酰基酒石酸、菊苣酸和松果菊苷

目的建立快速制备液相色谱高效、快速分离制备紫锥菊中的主要成分咖啡酰基酒石酸、菊苣酸和松果菊苷的工艺。方法通过调节紫锥菊浸膏水溶液的pH,分别以乙酸乙酯萃取,得中性乙酸乙酯层1(F1)和酸性乙酸乙酯层2(F2),然后,采用快速制备液相色谱分别对两个乙酸乙酯层进行分离,得到3个化合物。结果 %经UV、IR、MS和NMR鉴定,HPLC测定纯度,3个化合物分别为咖啡酰基酒石酸(99.51%)、菊苣酸(98.02%)和松果菊苷(96.30%)。结论通过调节pH预处理和采用快速制备液相色谱从紫锥菊中分离纯化咖啡酰基酒石酸、菊苣酸和松果菊苷的方法简便、快速,所得产物纯度较高,可用于对照品的制备。     

松果菊苷通过IL-33/STAT轴对脓毒症大鼠急性肾损伤的保护作用及机制研究

目的 探究松果菊苷对脓毒症大鼠急性肾损伤(AKI)的保护作用,并探讨可能机制。方法 55只SPF级SD大鼠中随机选择10只设为对照组;剩余45只大鼠建立脓毒症模型,成功40只,并将其随机分为模型组、松果菊苷低剂量组、松果菊苷中剂量组、松果菊苷高剂量组,每组各10只。松果菊苷低、中、高剂量组尾静脉注射松果菊苷(分别为25、50、100 mg/kg),对照组、模型组注射等量DMSO,术后6、12、18 h分别给药一次。流式细胞术检测外周血Th1、Th2构成比;检测血清炎症因子;检测血清肾功能指标;HE染色观察肾组织病理学变化;免疫印迹法检测肾组织白介素-13(IL-13)、Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)、p-JAK2、信号转导及转录激活子3(STAT3)、p-STAT3蛋白表达水平。结果 HE染色结果显示,对照组肾组织结构完整,形态正常;模型组肾组织结构严重破坏,肾小球基质增多、系膜区增厚,可见大量炎性细胞浸润;松果菊苷低、中、高剂量组系膜区增厚减轻,炎性细胞浸润减少,中、高剂量组改善更加明显。与模型组比较,松果菊苷低、中、高剂量组外周血Th2构成比、血清IL-6、IL-8、尿素氮...